北京市自然科学基金(7142155)
- 作品数：9 被引量：16H指数：3
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- 相关机构：解放军第309医院河北北方学院山西医科大学更多>>
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- GJB2基因条件敲除小鼠耳蜗凋亡相关基因表达差异研究被引量：3
- 2014年
- 目的研究GJB2基因条件敲除(cCx26Pax2Cre)小鼠耳蜗膜迷路细胞中凋亡相关基因的差异性表达情况,探讨GJB2基因突变导致耳聋的机制。方法由Cx26loxp/loxp和Pax2Cre/+小鼠杂交产生的cCx26Pax2Cre小鼠为实验组,野生型BALB/C小鼠作为正常对照组,两组分别选取P10和P18小鼠各3只,提取耳蜗膜迷路总RNA,反转录成cDNA,用QRT-PCR Array检测两组与凋亡相关的84个功能基因的表达差异。结果与野生型小鼠相比,cCx26Pax2Cre小鼠在P10时,共有16个基因表达有生物学意义(19.05%,16/84),其中14个基因表达下调(87.5%,14/16),包括9个抑制细胞凋亡和促进细胞增殖的基因下调和5个促进细胞凋亡和炎症反应的基因下调,2个基因表达上调(12.5%,2/16),均为促进细胞凋亡的基因,此期促进细胞凋亡的趋势十分明显;在P18时,共有4个基因(4.76%,4/84)表达变化有生物学意义,包括3个基因表达下调(75%),全部为抑制细胞凋亡的基因(100%),1个基因表达上调(25%),为促进细胞凋亡的基因,总体趋势仍为促进细胞凋亡的发生。与P10相比,cCx26Pax2Cre小鼠P18时耳蜗组织中共6个基因表达变化有生物学意义,其中促进细胞凋亡的caspase-8基因和抑制细胞凋亡的No13基因表达上调(33.3%,2/6),4个基因表达下调(66.7%,4/6),包括促进细胞凋亡的Tnfrsf10b、Cideb基因和抑制细胞凋亡的CD40、Bc110基因。结论 GJB2基因敲除后,可能通过上调死亡受体5(death receptor 5,DR5)激活死亡受体途径直接导致细胞凋亡,同时也可能通过caspase-8间接激活线粒体通路使凋亡信号进一步放大,最终引起cCx26Pax2Cre小鼠耳蜗细胞的广泛缺失和听力下降。
- 崔小缓张延平张晓强李丽娜蒋兴旺
- 关键词：凋亡基因
- 坑道噪声性听力损失易感者血清差异表达蛋白的筛选及鉴定被引量：3
- 2018年
- 目的探讨坑道作业部队官兵噪声性听力损失(noise induced hearing loss,NIHL)易感者血清差异表达蛋白的水平及意义。方法选择某部坑道施工部队官兵坑道噪声性听力损失易感组和非易感组各20例作为研究对象,均为男性,易感组平均年龄24.79±2.03岁,高频平均听阈48.55±11.54dB HL,语频平均听阈22.43±8.31dB HL;非易感组平均年龄23.67±3.56岁,高频平均听阈9.40±2.54dB HL,语频平均听阈13.40±4.13dB HL。两组对象分别抽取静脉血5毫升,利用双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分类和鉴定两组间血清差异表达蛋白。结果坑道噪声性听力损失易感组和非易感组血清差异表达的蛋白斑点总数为37个,易感组这37个差异蛋白斑点灰度值均值为13 804.27±14 510.62,非易感组为79 820.32±139 333.2,易感组灰度值低于非易感组,差异有统计学意义(t=-2.758,P=0.009 1)。鉴定获得10个差异表达多肽,其中蛋白酶体亚基α-5、补体C4A、载脂蛋白A-I、结合珠蛋白和玻璃体结合蛋白在NIHL易感组表达上调(P<0.05),而甲状腺素运载蛋白、分子量为35kDa胰蛋白酶抑制剂的重链H、色素上皮衍生因子、β-2糖蛋白-I和溶菌酶C表达下调(P<0.05)。结论坑道噪声性听力损失易感者血清中差异表达的蛋白酶体亚基α-5、补体C4A、结合珠蛋白、载脂蛋白A-I、β-2糖蛋白-1、色素上皮衍生因子、胰蛋白酶抑制剂重链H和甲状腺素运载蛋白均与氧化应激反应有关,可能通过该途径参与了NIHL的发生,进而成为坑道作业官兵NIHL易感个体血清特异性候选分子标志物。
- 段富家张延平李丽娜蒋兴旺刘金伟肖林
- 关键词：噪声性听力损失双向电泳
- 耳聋蛋白质组学的研究及进展
- 2016年
- 伴随基因组计划测序的完成、“后基因组时代”的到来，以探索细胞内蛋白质组成及其活动规律为主要内容的蛋白质组学成为热点的研究领域。目前蛋白质组学已经运用到遗传性耳聋、药物性耳聋、老年性耳聋、其他前庭功能听力损害、中耳炎等疾病的研究，本文综述了耳聋蛋白质组学研究方法、最新进展及相关耳科疾病变化的研究，旨在探索各类耳聋的病因、发病机制提供参考。
- 段富家薛刚张延平
- 关键词：耳聋听觉蛋白质组学听力下降
- C57B L／6J 小鼠随年龄增长耳蜗内毛细胞带状突触数量变化的观察被引量：3
- 2015年
- 目的探讨C57BL/6J小鼠随年龄增长耳蜗内毛细胞带状突触(ribbon synapses,RS)的数量变化情况。方法分别取2、6、10、12月龄C57BL/6J小鼠耳蜗基底膜(每组5只),应用免疫组织化学染色方法对RS前、后膜进行双重标记,激光共聚焦显微镜下定位成像,并应用三维重建技术对基底膜各段RS的数量进行计数。结果与2月龄小鼠相比较,6月龄C57BL/6J小鼠耳蜗基底膜RS数量减少主要发生在底回,10月龄时各回RS数量均明显减少,12月龄时顶回、中回RS数量继续减少,底回反而有少许增多。结论RS数量减少可能发生在C57BL/6J小鼠老年性聋的早期阶段,探索阻止RS数量减少的治疗措施可能成为早期干预老年性聋的重要途径。
- 李晓瑞蒋兴旺张延平
- 关键词：C57BL/6J小鼠内毛细胞
- 老年性耳聋易感个体血清差异表达蛋白的初步研究
- 2018年
- 目的利用弱阳离子磁珠加MALDI-TOF MS技术检测并鉴定老年性耳聋易感个体血清差异蛋白表达情况,为老年性耳聋的发病机制和易感个体血清生物标志物提供实验数据。方法对78例符合条件的老年非耳科疾病住院患者行纯音测听和问卷调查,根据Z值的大小排列进行易感者与非易感者分组,并应用弱阳离子磁珠加MALDI-TOF MS技术筛选和鉴定老年性聋易感个体血清差异表达蛋白。结果得到显著性差异的多肽峰共有9个,分子量分别为4047.1 Da、2957.1Da、4084.5 Da、4260.1 Da、2102.9 Da、1288 Da、3276 Da、4146.2 Da、3153.4 Da(P<0.05),其中6个上调,3个下调;共鉴定出差异多肽8个,排除高峰度蛋白,最后获得5个差异多肽,分别为载脂蛋白J、胰蛋白酶抑制剂、血小板生成素、补体C4b和角蛋白。结论老年性耳聋易感个体血清差异蛋白有可能成为老年性耳聋易感个体血清特异性生物标志物。
- 张延平姜春丽蒋兴旺李丽娜宋徽刘金伟于丽玫
- 关键词：老年性聋疾病易感性
- DR5在GJB2基因条件敲除小鼠耳蜗表达分布及年龄相关性变化
- 2014年
- 目的研究GJB2基因条件敲除（cCx26Pax2Cre）小鼠耳蜗DR5表达情况，探讨GJB2基因突变导致耳聋的机制。方法 cCx26Pax2Cre小鼠为实验组，BALB/C小鼠为对照组，分别取P8、P12和P21时小鼠耳蜗行冰冻切片，利用荧光标记免疫组织化学方法和激光共聚焦显微镜技术观察死亡受体5（death receptor，DR5）蛋白在耳蜗的表达情况，用Image Pro Plus 6.0计算平均光密度值，SPSS 18.0进行统计分析。结果 P8时DR5主要表达在柯蒂氏器外侧的支持细胞、耳蜗外侧壁Ⅱ型纤维细胞、盖膜，随着日龄的增加，表达逐渐向内侧延伸到内侧支持细胞，P12和P21时还出现了螺旋缘、毛细胞、螺旋神经节细胞、螺旋凸DR5表达阳性，而且表达强度随日龄增加而逐渐变强。在野生小鼠DR5也有表达但较弱。与野生型小鼠相比， cCx26Pax2Cre小鼠耳蜗蜗轴螺旋管内神经纤维DR5表达的光密度值明显增大，经统计学分析两者具有显著性差异（P＆lt;0.05）。结论 cCx26Pax2Cre小鼠缝隙连接功能异常，可能导致耳蜗细胞出现葡萄糖短缺，导致三磷酸腺苷（adenosine-triphosphate， ATP）不足，引起DR5的表达上调，直接激活凋亡的死亡受体途径，或间接激活线粒体通路使凋亡信号进一步放大，导致耳蜗细胞凋亡的发生，最终引起cCx26Pax2Cre小鼠听力下降。
- 崔小缓张延平蒋兴旺李丽娜
- 关键词：死亡受体5凋亡遗传性耳聋
- 耳蜗螺旋神经节细胞的凋亡与再生研究进展被引量：2
- 2015年
- 耳蜗螺旋神经节细胞（spiral ganglion cell，SGC）是听觉信息传入的初级神经元，具有整合和传递毛细胞接收到的声音信息的功能。SGC凋亡过程的激活不可逆，与细胞内基因、蛋白和传导途径相关。衰老、耳毒性药物、噪声、缺氧等损伤因素均可导致螺旋神经节细胞的凋亡，由于哺乳动物耳蜗螺旋神经节细胞缺乏再生能力，导致耳聋发生,抑制其凋亡和促进再生对耳聋的治疗将起到积极作用。本文对螺旋神经节细胞的损伤机制、阻止螺旋神经节细胞的凋亡手段和促进螺旋神经节细胞的再生手段进行了综述。
- 胡德强张延平
- 关键词：螺旋神经节凋亡
- 咽喉反流性疾病相关动物模型研究进展被引量：4
- 2018年
- 咽喉反流性疾病(laryngopharyngealrefluxdisease,LPRD)是指胃内容物反流至食管上括约肌以上部位,引起一系列症状和体征的总称\[1\]。既往有学者认为该病是胃食管反流病的食管外表现,近年来研究证实存在咽喉反流性疾病者并不一定伴发反流性食管炎\[2\]。目前国内外学者对于该病的基础研究较少,发病机制尚不十分明确,因此,选择和建立有效的LPRD动物模型,不仅有助于进一步了解该病的发生发展,更可为临床治疗方案的选择提供理论依据;为便于建立咽喉反流性疾病相关动物模型,进一步探讨其可能的发病机制,现将国内外LPRD相关动物模型建立的方法综述如下。
- 宋徽张延平
- 关键词：相关动物模型反流性疾病食管上括约肌胃内容物反流动物模型建立
- 老年性聋易感个体血清差异蛋白的筛选被引量：1
- 2016年
- 目的 研究老年性聋（age-related hearing loss,ARHL）易感个体外周血血清蛋白质组表达变化,筛选差异表达蛋白,建立ARHL易感个体血清蛋白指纹图谱诊断模型。方法 选择2015年1-11月年龄大于60岁的非耳科疾病住院患者,对符合条件的78例进行纯音测听及填写问卷调查表,参照声学听阈与年龄关系的统计分布（GB/T 7582-2004/ISO 7029：2000）国家标准将频率特异性听阈转换为Z值（Z值为在给定频率上个体实际听阈与中位听阈的差异）,以Z值大于零者为易感组（52例）,Z值小于零者为非易感组（26例）,应用弱阳离子磁珠加MALDI-TOF MS技术,结合生物资料管理器软件（bio explorer,BE）筛选老年性聋易感个体血清差异表达蛋白并构建诊断模型。结果 得到显著性差异的多肽峰共有9个,分子量分别为4 047.1、2 957.1、4 084.5、4 260.1、2 102.9、1 288、3 276、4 146.2、3 153.4Da,其中6个上调,3个下调;选用其中2个建模效果最好的差异蛋白峰（分子量为3 276.0、3 153.4Da）建立老年性聋易感个体血清蛋白指纹图谱诊断模型,经盲法验证,该模型的敏感度和特异度分别为68.18%、66.67%,ROC曲线下面积为0.711 823,对老年性聋易感者与非易感者有一定的识别能力。结论 本研究筛选出了ARHL差异蛋白,建立了首个ARHL易感个体血清蛋白指纹图谱诊断模型,对老年性聋易感者与非易感者有一定的识别能力,为进一步探讨ARHL防治措施提供了数据参考。
- 姜春丽张延平刘金伟于丽玫张晨彬
- 关键词：老年性聋疾病易感性蛋白质组学质谱技术
