北京市自然科学基金(7072014)
- 作品数：6 被引量：36H指数：4
- 相关作者：李萍梁雅慧戴淼可黄启福刘欣更多>>
- 相关机构：北京中医药大学北京市中医研究所首都医科大学附属北京中医医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Arsenic trioxide regulates the production and activities of matrix metalloproteinases-1,-2, and -9 in fibroblasts and THP-1被引量：2
- 2012年
- LIANG Ya-huiLI PingZHAO Jing-xiaDAI Miao-keHUANG Qi-fu
- 关键词：皮肤成纤维细胞P38MAPKWESTERN印迹法MMP-1
- 朱红膏对基质金属蛋白酶活性及成纤维细胞分泌的影响被引量：11
- 2013年
- 目的:观察朱红膏是否通过对基质金属蛋白酶的影响来促进创面的愈合。方法:收集阳证疮疡创面渗液8例,检测朱红膏对渗出物中明胶酶MMP-2,MMP-9酶活性的影响;在蛋白水平观察朱红膏对MMP-1,-2活性的影响;检测朱红膏对HSF细胞的细胞毒性及IC50及用药前后HSF细胞MMP-1,-2,-9的蛋白表达。结果:朱红膏对创面渗出液中MMP-2活性有明显的抑制作用,与对照组相比P<0.01;对创面渗出液中MMP-9活性在1 g.L-1时与对照组比较无差异,但高于5 g.L-1时有明显抑制作用,与对照组比较有差异。当汞质量浓度为320 mg.L-1时,朱红膏溶液能直接抑制MMP-1活性(P<0.01)和MMP-2活性(P<0.05);但当汞质量浓度为2.56～0.51 mg.L-1时,朱红膏溶液能增强MMP-1活性(P<0.05);同时当汞在0.51～64 mg.L-1时,朱红膏溶液能够增强MMP-2活性(P<0.01)。朱红膏在DMEM的饱和浓度为39.6 mg.L-1,当汞质量浓度大于1.23 mg.L-1时有细胞毒性,HSF细胞IC50汞质量浓度为61.11 mg.L-1,在1.23,0.62,0.31 mg.L-1组均可促进HSF细胞MMP-1的蛋白表达(P<0.01);朱红膏1.23,0.62 mg.L-1组对HSF细胞MMP-2蛋白表达有抑制作用,作用不明显,0.31 mg.L-1组对MMP-2蛋白表达有促进作用,作用不明显;在汞0.62 mg.L-1时,朱红膏可促进HSF细胞表达MMP-2(P<0.01);但在这3个汞浓度条件下,朱红膏均可降低HSF细胞MMP-9的蛋白表达。结论:朱红膏在高浓度情况下对创面渗出液的MMP-2,MMP-9均有抑制作用,且抑制作用呈朱红膏含量依赖性增强;并直接抑制体外激活的MMP-1,MMP-2活性。但低浓度情况下却刺激正常成纤维细胞MMP-1,2蛋白的表达及体外酶活性;但对正常成纤维细胞MMP-9的表达表现出抑制效应。
- 林燕戴淼可何秀娟李萍
- 关键词：朱红膏慢性皮肤溃疡基质金属蛋白酶类
- 三氧化二砷调节基质金属蛋白酶-1,-2,-9的活性
- 砷及其化合物如雄黄、砒石等一直是中医外科常用的外用中药,具有蚀疮祛腐作用,在临床治疗痈疽等慢性疮疡疾病有显著的疗效,如著名方剂三品一条枪、白降丹、化毒散、青金散等。
- 李萍梁雅慧黄启福赵京霞刘欣戴淼可
- 文献传递
- 丹酚酸B在体外对基质金属蛋白酶1、2和9活性的抑制作用(英文)被引量：7
- 2009年
- 目的:基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类活性依赖于金属锌离子的蛋白酶,它可以降解绝大多数细胞外基质成分。MMPs水解蛋白质的特性有利于创伤愈合过程中坏死组织的清除,以及细胞的迁移。降低慢性创面升高的MMPs活性可能是治疗慢性皮肤溃疡的新途径。丹参外用可治疗慢性皮肤溃疡,丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)是丹参中含量丰富且具有较高生物活性的水溶性成分。本研究主要观察SalB在体外对MMPs的活性是否有直接影响。方法:人MMP-1和MMP-2被醋酸氨基苯汞(p-aminophenylmercuric acetate,APMA)激活后,与不同浓度的SalB共同孵育1h,通过底物裂解法观察其活性的改变。MMP-9在中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)中含量丰富,因此以大鼠腹腔PMN作为MMP-9的来源。PMN裂解产物与不同浓度的Sal B共同孵育1h,通过明胶酶谱法,观察其中MMP-9活性的改变。结果:Sal B在0.0024～0.3g/L浓度范围内对MMP-1和MMP-2的活性有抑制作用,半抑制浓度(50% inhibiting concentration,IC50)分别为(0.090±0.015)g/L和(0.080±0.005)g/L;在0.003～0.3g/L浓度范围内对MMP-9的活性表现出不同程度的抑制作用(P<0.01),其抑制作用呈浓度依赖性。结论:SalB可抑制MMPs的活性,改善慢性创面高酶活性是丹参治疗慢性皮肤溃疡的作用机制之一。
- 梁雅慧李萍黄启福赵京霞刘欣戴淼可
- 关键词：丹参基质金属蛋白酶类
- 阴证、阳证皮肤溃疡创面渗出液MMPs和TIMPs的酶活性对比分析被引量：6
- 2009年
- 目的:探讨皮肤溃疡阴证、阳证创面渗液基质金属蛋白酶及组织抑制因子活性和水平的差异,揭示其证候基础。方法:收集皮肤溃疡阳证20例、阴证25例创面渗液及10例健康成人血清对照,通过明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性和ELISA法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的含量。结果:阴证创面MMP-2、MMP-9活性和含量不同程度高于阳证组和对照组(分别P<0.01);同时其TIMP-1、-2含量却不同程度低于阳证组和对照组(分别P<0.01),且MMP-9/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2比值明显高于阳证组和对照组(分别P<0.05)。结论:阴证疮疡MMPs/TIMPs平衡失调,这可能是皮肤溃疡创面不易愈合的机制之一。
- 戴淼可李萍梁雅慧王伊光杨焕杰盛巡梁代英
- 关键词：皮肤溃疡基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制因子
- 乳香酸与三氧化二砷配伍对成纤维细胞和THP-1细胞基质金属蛋白酶产生及活性的调节作用被引量：9
- 2010年
- 目的:探讨乳香、砒石主要单体成分11-羰基-β-乙酰乳香酸(acetyl-11-keto-beta-boswellic acid,AKBA)与三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)配伍对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSFb)、人单核细胞系THP-1细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1、MMP-2和MMP-9的调节作用,揭示其在促进创面愈合中的作用。方法:模拟创面炎症微环境建立3个细胞模型:由肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)刺激的HSFb模型,佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)活化的THP-1细胞模型和HSFb、THP-1共培养细胞模型。AKBA、ATO与这3个细胞模型共同孵育24 h后,分别用酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedi mmunosorbent assay,ELISA)法和明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMP-1、MMP-2和MMP-9的含量及MMP-2和MMP-9的活性;逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞中MMP-1、MMP-2和MMP-9 mRNA的表达情况;ELISA法检测各细胞模型炎性因子TNF-α和白细胞介素-1β(interleukin-1beta,IL-1β)的分泌量;蛋白印迹法检测细胞中细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases 1 and 2,ERK1/2)及p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38mitogen-activated proteinkinase,p38 MAPK)磷酸化水平。结果:AKBA与ATO配伍对TNF-α刺激后的HSFb、PMA活化的THP-1细胞以及细胞共培养体系产生的MMP-1、MMP-2和MMP-9分别在活性、含量和mRNA水平有一定抑制作用(P<0.05,P<0.01);同时,AKBA与ATO配伍可降低THP-1细胞和共培养体系中TNF-α和IL-1β的分泌(P<0.01),并降低HSFb和THP-1细胞中ERK1/2及p38 MAPK磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论:AKBA与ATO配伍应用可能是通过抑制炎症状态下细胞炎症因子释放及抑制p38 MAPK信号转导通路,使成纤维细胞和炎性细胞产生MMP减少,从而发挥活血化腐、促进创面愈合的作用。
- 梁雅慧李萍赵京霞刘欣黄启福
- 关键词：11-羰基-Β-乙酰乳香酸三氧化二砷成纤维细胞基质金属蛋白酶类
- 三氧化二砷对皮肤成纤维细胞、中性粒细胞MMPs活性,TIMP-1及TGF-β_1表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:砒石是化腐生肌的常用中药,其主要成分是三氧化二砷(As2O3)。本研究通过观察As2O3对基质金属蛋白酶(MMPs)活性、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及转化生长因子β1(TGF-β1)表达影响,探讨化腐中药能否调节胶原代谢,从而治疗慢性皮肤溃疡。方法:明胶酶谱法检测大鼠中性粒细胞(PMNs)来源的MMP-9活性、人成纤维细胞(hFb)分泌的MMP-1、MMP-2的活性,免疫细胞化学法检测hFb TIMP-1、TGF-β1的表达。结果:As2O3浓度在50mg/L时可以提高大鼠PMNs来源的MMP-9的活性(P<0.01);在0.8mg/L可以提高hFb分泌的MMP-1、MMP-2的活性(分别P<0.01);同时As2O3作用于hFb6h、12h、18h后,TIMP-1、TGF-β1表达持续降低(P<0.01)。结论:As2O3在一定范围内可提高PMNs来源的MMP-9的活性;也可提高hFb分泌的MMP-1、MMP-2的活性,同时抑制hFbTIMP-1、TGF-β1的表达。提示砷类制剂可通过提高多种MMPs的活性,降低TIMP-1的表达从而发挥化腐作用。
- 梁雅慧李萍黄启福张玮盛巡梁代英
- 关键词：成纤维细胞中性白细胞胶原代谢
