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干扰ALDH1A1表达的shRNA载体成功转染宫颈癌HeLa细胞及意义被引量：3: 2013年; 目的:采用shRNA转染构建干扰乙醛脱氢酶-1(ALDH1A1)表达的宫颈癌HeLa细胞,以进一步探讨ALDH1A1与宫颈癌细胞的生物学特性之间的关系。方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞,加入梯度浓度G418溶液进行筛选,确定最佳筛选浓度;取对数生长期细胞,采用Lipofectamine 2000脂质体将4种干扰重组质粒(ALDH1A1-1719、ALDH1A1-574、ALDH1A1-740、ALDH1A1-921,其中有一种具最佳干扰效果)及1种阴性对照质粒(shNC)转染宫颈癌HeLa细胞。5种重组质粒与Lipofectamine 2000脂质体的比例均为0.2μg:1μL,空白对照组中仅加入Lipofectamine2000脂质体。6 h后换液,24 h后荧光显微镜下观察荧光表达情况。结果:确定G418的最佳筛选浓度为400 mg/L;5种重组质粒均成功转染入HeLa细胞中。其中ALDH1A1-1719的转染效率为4.67%;ALDH1A1-574的转染效率为1.16%;ALDH1A1-740的转染效率为12.45%;ALDH1A1-921的转染效率为3.42%;shNC组的转染效率为1.02%。结论:干扰ALDH1A1表达的shRNA载体转染宫颈腺癌HeLa细胞成功可行且效果好。; 刘龙阳姚婷婷易娟娟陈勍张丙忠周晖彭永排林仲秋; 关键词：RNA 小分子干扰转染 HELA细胞

基因芯片筛选上调miRNA-205表达后HeLa细胞相关基因被引量：6: 2012年; 目的:应用基因表达谱芯片技术筛查上调微小RNA-205(miR-205)表达后人宫颈腺癌细胞株HeLa细胞中差异表达基因,并探讨其功能及上调miR-205致癌机制。方法:应用含有23 232条人类全长基因的cDNA表达谱芯片,对上调miR-205表达的HeLa细胞及HeLa细胞原株的基因表达谱进行分析。结果:与HeLa细胞原株相比,上调miR-205表达的HeLa细胞中有差异表达的基因共172条,其中34条上调,138条下调。结论:基因芯片技术能够有效筛查出上调miR-205表达后HeLa细胞中差异表达基因,miR-205引发宫颈癌是多因素多基因共同作用的结果。; 韦丽娅姚婷婷陈庆瑜沈青丽林仲秋; 关键词：宫颈肿瘤 HELA细胞芯片分析技术微RNAS

OCT4在妇产科中的研究进展: 2013年; 八聚体结合因子4(OCT4)是秀丽隐杆线虫神经(POU)转录因子家族的一员,主要表达于胚胎干细胞、生殖细胞、胚胎性癌细胞和肿瘤干细胞中,被公认为是干细胞的标记物,在维持干细胞的多能性、自我更新能力及在肿瘤的恶性行为学中起着举足轻重的作用。同时OCT4也参与胚胎发育过程中多向性分化调节。近年来随着干细胞理论及其相关研究的发展,OCT4作为干细胞的标记物也被用于不同领域的研究中,综述其在妇产科领域的研究进展。; 张微微陈勍; 关键词：肿瘤干细胞胚胎干细胞间质干细胞

实时荧光定量PCR法测定has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p在不同HPV感染的宫颈癌细胞中的表达: 2013年; 目的探讨has-miR-429、has-miR-127-3 p及has-miR127-5 p在不同宫颈癌细胞中的表达水平。方法用SiHa、Hela和C33A三种宫颈癌细胞株,提取和纯化mRNA,逆转录成cDNA,在测定最佳反应条件后,采用实时荧光定量PCR技术测定has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p的表达情况,结合内参U6进行相对定量分析。结果 miR-429、miR-127-3p及miR127-5p在SiHa细胞相对于Hela细胞表达为(0.0031±0.0002),(59.3786±3.7024)和(0.0524±0.0148),相对于C33A细胞表达为(0.0059±0.0005),(15.5625±1.2780)和(0.0334±0.0103)。结论 has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p可能与宫颈癌的HPV感染相关。; 姚婷婷刘秀婷张定梅禹夜林仲秋; 关键词：SIHA细胞

采用慢病毒载体干扰ALDH-1表达的宫颈癌Hela细胞稳转株的构建及意义: 2013年; 目的:采用干扰乙醛脱氢酶1(ALDH-1)表达的慢病毒载体转染宫颈癌Hela细胞,构建干扰ALDH-1表达的稳转株,以利进一步探讨干扰ALDH-1表达的宫颈癌Hela细胞株的生物学特性。方法:体外培养宫颈癌Hela细胞,加入梯度浓度的嘌呤霉素溶液进行筛选,确定最佳筛选浓度;取24孔板中对数生长的宫颈癌Hela细胞,吸弃旧培养液,加入400μL新培养基,分别加入4种干扰慢病毒液(ALDH-1、ALDH1-1719、ALDH1-740、ALDH1-921,其中有一种具最佳干扰效果)及1种阴性对照慢病毒液(LV3-NC),同时均加入Polybrene液。其中5种慢病毒液的加入量均为50μL(滴度均为1×108TU/mL),Polybrene的加入量为0.5μL(浓度为5 mg/L);24 h后换新鲜培养液,72 h后荧光显微镜下观察荧光表达情况。然后采用最佳筛选浓度的嘌呤霉素溶液进行筛选,以获得稳定转染的干扰ALDH-1表达的宫颈癌Hela细胞株。结果:确定嘌呤霉素的最佳筛选浓度为0.9 mg/L;5种慢病毒载体均成功转染入宫颈癌Hela细胞中,经嘌呤霉素筛选2周后成功获得稳定转染细胞株。结论:干扰ALDH-1表达的宫颈癌Hela细胞稳转株成功构建。; 刘龙阳张帝开易娟娟陈勍张丙忠陈志辽梁金晓林仲秋; 关键词：氧化还原酶类乙醛慢病毒属 HELA细胞

特异性干扰ALDH-1表达的子宫颈癌细胞系HeLa细胞的构建及鉴定被引量：1: 2014年; 乙醛脱氢酶1（ALDH-1）是细胞内乙醛氧化的解毒酶。短发夹状RNA（shRNA）以慢病毒为载体转染人宿主细胞后，可以整合到宿主DNA上发挥稳定持久的干扰效果。; 刘龙阳易娟娟张帝开陈惠祯陈勃林仲秋; 关键词：HELA细胞宫颈癌细胞系特异性乙醛脱氢酶宿主细胞解毒酶

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广东省医学科学技术研究基金(B2011088)