国家教育部博士点基金(2000063006)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：鲍朗谢勇恩于向华张万江王晓樱更多>>
- 相关机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 2002年
- 目的 为结核病新型疫苗研究提供靶基因和靶抗原。方法 采用PCR扩增的方法获得结核杆菌两种免疫保护性抗原Ag85A及ESAT - 6的基因 ,将其定向克隆入真核及原核穿梭表达型载体 pBK -CMV构建含嵌合目的基因的重组质粒 ,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达 ,并通过SDS -PAGE和Western -blotting对表达蛋白进行初步分析。结果 1)从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Ag85A及ESAT - 6基因。 2 )成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达质粒 pBK - 85A -E6。 3)重组质粒 pBK - 85A -E6经IPTG诱导后能在大肠杆菌中稳定表达 38kDa的融合蛋白。 结论 成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达载体 ,并在大肠杆菌中实现了稳定表达 ,为进一步研究其在结核病基因工程疫苗研制中的应用奠定了基础。
- 谢勇恩鲍朗陈炜李学敏于向华
- 关键词：结核杆菌AG85AESAT-6大肠杆菌
- 利用基因芯片技术快速检测结核杆菌耐药性的初步研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :探讨利用基因芯片技术检测结核杆菌的耐药性。方法 :结核杆菌耐药性检测基因芯片的制备 ;临床分离株结核杆菌培养和药敏检测 ;结核杆菌基因组DNA的制备和结核杆菌耐药基因的聚和酶链反应 ;基因芯片的杂交、洗涤、检测与分析。结果 :临床分离株结核杆菌培养和药敏检测结果 :1株为药物敏感株结核杆菌 (对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇 4种药物均敏感 ) ;4株为多耐药株结核杆菌 (对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇 4种药物均耐药 ) ;药敏检测结果与 5位患者临床的诊断性治疗的结果完全一致 ;进一步利用基因芯片技术进行检测 ,检测结果与上述结果相符合。结论 :利用基因芯片技术检测结核杆菌的耐药性 ,准确、快速、高效。
- 张万江鲍朗王晓樱张会东谢勇恩陈玮于向华
- 关键词：分支杆菌结核药物耐受性
- 随机扩增多态性DNA技术对结核分支杆菌菌株鉴别及其耐药相关性分析被引量：1
- 2002年
- 用引物G1和L1扩增的 16S～ 2 3SrDNA间隔区作为模板DNA ,再用引物AP5 0进行随机扩增多态性DNA(RandomAmplifiedPolymorphicDNA ,RAPD)分析 .经AP5 0扩增出的各菌株DNA片段 ,用 1.2 %的琼脂糖凝胶电泳EB染色 ,可获得 1或 2个大小不同的DNA片段 (390～ 10 31bp) ,各株间差异明显 .结果表明 ,不同菌株有不同的DNA多态性 ,药物敏感株与耐药株之间多态性差异明显 ,耐药株中耐药谱相似或相同的菌株间其多态性也相似 ,RAPD有助于简便、快速、有效地了解菌株间的克隆相关性及耐药性传播 .
- 王晓樱鲍朗谢勇恩张万江陈玮刘益民谢益新罗涛
- 关键词：随机扩增多态性DNA技术结核分支杆菌耐药相关性
