沈阳市科学技术计划项目(1053111-3-04)
- 作品数：2 被引量：12H指数：2
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- Transwell培养体系中受损PC12细胞促进骨髓间质干细胞向神经元样细胞的转分化(英文)被引量：4
- 2007年
- 背景:药物治疗阿尔茨海默病难以达到满意效果,而多项研究表明,骨髓间质干细胞移植治疗帕金森病、脑缺血等有效,但其治疗机制尚不十分清楚。目的:采用淀粉样β1-40蛋白损伤的PC12细胞与骨髓间质干细胞共育,模拟移植环境,观察共育微环境中细胞间双向信息反馈对骨髓间质干细胞向神经细胞转分化的作用及对抗损伤的PC12凋亡的保护作用。设计:对比观察实验。单位:中国医科大学神经内科。材料:选用出生两三周的SD大鼠,雌雄不拘。PC12细胞株购自中国科学院细胞生物研究所。神经元特异性烯醇化酶(1∶50,博士德,武汉);MTT15μL(终浓度0.5g/L)。方法:实验于2004-06/07在中国医科大学实验中心完成。取1只SD大鼠双侧股骨骨髓,并培养骨髓间质干细胞,以CD44抗体用免疫荧光鉴定骨髓间质干细胞。PC12在实验中作为神经细胞的替代细胞。淀粉样β1-40蛋白刺激PC12后,用转移筛网转移PC12。实验分5组,A组:正常培养的PC12+骨髓间质干细胞共育;B组:淀粉样β1-40蛋白刺激的PC12+MSCs共育;C组:正常PC12的培养上清+骨髓间质干细胞;D组:受损PC12上清+骨髓间质干细胞;E组:普通1640培养的骨髓间质干细胞。主要观察指标:按常规进行细胞的免疫化学染色,采用荧光倒置显微镜观察神经元特异性烯醇化酶阳性细胞,随机选取10个200倍的视野,计数阳性细胞数。用四甲基偶氮唑盐代谢率(四唑盐比色试验)检测各组骨髓间质干细胞增殖情况。结果:①骨髓间质干细胞的生长:以荧光和明视野在同一视野下观察,骨髓间质干细胞生长良好,CD44免疫荧光鉴定,见95%以上细胞呈阳性表达。②神经元特异性烯醇化酶阳性细胞:以荧光和明视野在同一视野下观察,神经元特异性烯醇化酶阳性的骨髓间质干细胞呈现红色荧光,骨髓间质干细胞形态为双极形、多极形和锥形,出现类似神经元样细胞的形态,似树突样突�
- 周进罗晓光张朝东
- 关键词：骨髓间质干细胞共育PC12
- 脂肪组织源性基质细胞经侧脑室立体定向移植治疗大鼠局灶性脑缺血的实验研究被引量：8
- 2006年
- 目的探讨脂肪组织源性基质细胞(ADSCs)经侧脑室立体定向移植治疗大鼠局灶性脑缺血的机制。方法体外培养、扩增ADSCs,常规细胞免疫化学染色鉴定其种类；细胞移植前3d,加入含BrdU的培养液培养3d。缺血再灌注大鼠模型第4天经侧脑室移植ADSCs,于移植前、移植后第1、7、14、21、28天进行评分。移植后28 d,断头取脑,各组一部分脑片经红四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积,另一部分切片用原位TUNEL法检测细胞凋亡；用免疫荧光双标法检测脑源性神经营养因子(BDNF)在有BrdU活性的ADSCs的表达。结果大多数ADSCs呈CD44(间质干细胞特征性标志物)阳性,CD114抗体(单核巨嗜细胞标志物)及CD34抗体(造血干细胞标志物)呈阴性。ADSCs组和对照组神经功能损害评分于脑缺血后21d、28d呈显著性差异(P＜0．01),脑梗死体积无显著性差异(P＜0．05)：免疫荧光双标法检测显示大部分BrdU标记的ADSCs迁移到梗死周边区,ADSCs组细胞凋亡数明显低于对照组(P＜0．01)。结论经侧脑室立体定向移植的ADSCs可能是通过减少梗死周边区细胞的凋亡促进大鼠局灶性脑缺血的神经功能恢复。
- 周进田国萍朱春艳吴丽华王静娥朱峰丛雪峰徐冰胡凤杰
- 关键词：脑缺血
