江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ08077)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 相关作者：邹叶青蔡军李勇曾林山肖卫东更多>>
- 相关机构：南昌大学第一附属医院南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DNMT1和DNMT3b基因干扰对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响被引量：6
- 2012年
- 目的观察DNA甲基转移酶1（DNMT1）和DNA甲基转移酶3b（DNMT3b）基因干扰对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法利用Lipofectamine^TM2000转染DNMT1和DNMT3b小分子干扰RNA（siRNA）至胰腺癌BxPC-3细胞。实验共分5组：DNMT1干扰组（转染DNMTl．siRNA）、DNMT3b干扰组（转染DNMT3b—siRNA）、双重干扰组（转染DNMT1＋DNMT3b．siRNA）、阴性对照组（转染negative—siRNA）和空白对照组（转染脂质体）。转染48h后，应用荧光定量聚合酶链反应（PCR）法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1、DNMT3bmRNA和蛋白的表达水平；噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞体外增殖活力；流式细胞仪检测细胞凋亡。结果与空白对照组和阴性对照组比较，各干扰组的DNMT1和（或）DNMT3bmRNA及蛋白表达量均显著降低（P〈0．01）。DNMTI干扰组和双重干扰组的细胞生长抑制率分别为30．9％和28．3％，均显著高于DNMT3b干扰组的14．5％（P〈0．01），而DNMT1干扰组和双重干扰组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。空白对照组、阴性对照组、DNMT1干扰组、DNMT3b干扰组和双重干扰组的细胞凋亡率分别为3．74％、5．07％、44．46％、24．20％和39．24％，各干扰组的细胞凋亡率均比对照组显著增加（P〈0．01），DNMTl干扰组与双重干扰组的细胞凋亡率均显著高于DNMT3b干扰组（P〈0．01），而DNMTl干扰组与双重干扰组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论DNMT1和（或）DNMT3b基因表达下调后，能抑制胰腺癌BxPC-3细胞生长，并能诱导细胞凋亡。DNMT1单干扰的抑癌作用优于DNMT3b单干扰，DNMT1和DNMT3b双重干扰无明显的协同效应。
- 肖卫东李勇邹叶青李学明蔡军曾林山
- 关键词：DNA甲基转移酶脱噬作用
- 沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16,RASSF1A基因启动子甲基化的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16,RASSF1A基因启动子甲基化的影响。方法:将胰腺癌BxPC-3细胞分为5组:DNMT1干扰组(转染DNMT1-siRNA),DNMT3b干扰组(转染DNMT3b-siRNA),双重干扰组(转染DNMT1+DNMT3b-siRNA),阴性对照组(转染阴性siRNA)和空白对照组(转染脂质体)。转染48 h后,应用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1和DNMT3b的mRNA及蛋白的表达水平;甲基化特异性PCR法检测p16和RASSF1A基因启动子甲基化。结果:与空白对照组和阴性对照组比较,各干扰组目的基因的mRNA及蛋白表达量均明显降低(均P<0.01)。空白对照组与阴性对照组p16和RASSF1A基因甲基化阳性;DNMT1干扰组和双重干扰组p16基因甲基化阴性,RASSF1A基因部分甲基化;DNMT3b干扰组p16基因部分甲基化,RASSF1A基因甲基化阳性。结论:DNMT1单干扰对胰腺癌BxPC-3细胞p16和RASSF1A基因的去甲基化作用优于DNMT3b单干扰,DNMT1和DNMT3b双重干扰无明显的协同效应;提示DNMT1是胰腺癌去甲基化治疗的一个有效靶点。
- 肖卫东李勇邹叶青李学明蔡军曾林山胡伟
- 关键词：胰腺肿瘤
