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骨髓间质干细胞结合骨形态发生蛋白促进兔椎间关节融合的实验研究被引量：9: 2007年; [目的]探索应用骨髓间质干细胞结合骨形态发生蛋白进行脊柱前路融合的方法。[方法]自髂骨抽取骨髓4m,l在体外扩增出自体骨髓间质干细胞;对12只新西兰大白兔经前路腹膜外行腰椎间盘切除脊柱融合术。每只动物取3个脊柱节段随机接受4种移植方法:骨髓间质干细胞、骨形态发生蛋白和纤维蛋白胶(A组),骨髓间质干细胞和纤维蛋白胶(B组),骨形态发生蛋白和纤维蛋白胶(C组),纤维蛋白胶(D组)。实验动物在术后3个月处死,利用放射学和组织学方法观察、分析脊柱融合情况。[结果]A组的椎间隙骨痂形成明显较其他组多,组织学上有连续的骨痂形成;B组和C组显示出近似的放射学和组织学变化,有不连续骨痂生成。D组融合效果最差,为纤维肉芽组织填充椎间隙,无骨痂生成。[结论]自体骨髓基质干细胞、纤维蛋白和骨形态发生蛋白复合体在移植入体内3个月后有良好的成骨并初步获得椎体间融合。; 陈为坚李贵涛罗狄鑫陈锡然陈造宏武光勤叶伟李晶; 关键词：骨髓间质干细胞骨形态发生蛋白脊柱融合术

IL-6基因单核苷酸多态性与腰椎间盘疾病的关联研究被引量：7: 2006年; 目的:研究汉族人白细胞介素6(IL-6)基因启动子G-597-A、G-572-C和G-174-C、5号外显子T15-A和C132-T单核苷酸多态性与腰椎间盘疾病关系。方法:采用聚合酶链反应技术,扩增81例腰椎间盘疾病患者和101例正常对照者中分别包含启动子G-597-A、G-572-C、G-174-C和5号外显子T15-A、C132-T位点的片段,直接测序法检测其中的单核苷酸多态性情况,并比较两组中单核苷酸多态性与腰椎间盘疾病的关系。同时,利用MRI检测两组的椎间盘退变情况,并分析其中小于45岁者单核苷酸多态性与椎间盘退变的关系。结果:腰椎间盘疾病病例组及对照组中均未检测到启动子G-597-A和G-174-C、5号外显子T15-A和C132-T单核苷酸多态性情况,仅启动子G-572-C位点存在GG、CG和CC3种表型。但启动子G-572-C单核苷酸多态性与腰椎间盘疾病及椎间盘退变严重程度无关。结论:在汉族人中,IL-6基因仅存在G-572-C单核苷酸多态性,但G-572-C单核苷酸多态性与椎间盘病变及其发病基础椎间盘退变并无关联。; 叶伟黄东生刘尚礼丁悦彭焰胡宝山吕浩然; 关键词：白细胞介素6 腰椎间盘疾病腰椎间盘退变

汉族人维生素D受体基因TruⅠ酶切位点多态性及其对BsmⅠ酶切位点多态性测定的影响被引量：8: 2007年; 目的测定汉族人维生素D受体基因TruⅠ酶切位点多态性分布并探讨其对BsmⅠ酶切位点多态性分布测定的影响。方法收集80名健康汉族人外周静脉血标本,提取基因组DNA,用限制性片段多态性长度酶切法测定80名汉族人维生素D受体基因TruⅠ、BsmⅠ酶切位点多态性;换用常规引物再次测定上述标本BsmⅠ酶切位点多态性;分析维生素D受体基因TruⅠ、BsmⅠ酶切位点多态性及两次测定的BsmⅠ位点的一致性。结果测得TruⅠ基因型频率为TT68.7%,Tt26.3%,tt5.0%;同一PCR片段上测得BsmⅠ位点基因型频率为BB6.2%,Bb52.5%,bb41.3%,多态性分布均符合Hardy-Weinberg平衡;换用常规引物测定同批标本BsmⅠ位点多态性,基因型分布为BB20.0%,Bb26.2%,bb53.8%,不符合Hardy-Weinberg平衡（r=13.29,P〈0.01）。与第1次测定相比,有22个标本基因型由Bb型变成BB型或bb型,发生基因型丢失。结论汉族人VDR基因存在TruⅠ多态性,其多态性分布与其它种族不同;TruⅠ酶切位点多态性可引起BsmⅠ位点多态性测定时等位基因的丢失。; 陈为坚叶伟苏培强丁悦彭焰梁安靖黄东生李贵涛; 关键词：维生素D受体基因单核苷酸多态性限制性片段长度多态性

TGF-β1基因^(-509)C>T单核苷酸多态性与椎间盘疾病的关系被引量：16: 2006年; [目的]研究转化生长因子β1(TGF-β1)基因内含子861-20T>C和启动子-509C>T单核苷酸多态性与椎间盘疾病的相关关系。[方法]采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测105例椎间盘疾病患者和117例正常对照组TGF-β1基因内含子861-20T>C和启动子-509C>T单核苷酸多态性情况,并分析其与椎间盘疾病及椎间盘退变严重程度的关系。[结果]椎间盘疾病组和正常人群中不存在内含子861-20T>C单核苷酸多态性,均存在启动子-509C>T单核苷酸多态性。虽然启动子-509C>T单核苷酸多态性在椎间盘疾病组和正常人群中的分布无显著性差异(P>0.05),但启动子-509C>T单核苷酸多态性的分布差异与L4、5、L5S1的椎间盘退变严重程度有关。[结论]TGF-β1基因内含子861-20T>C位点和启动子-509C>T单核苷酸多态性与椎间盘疾病无关,但启动子-509C>T多态性可能与椎间盘疾病的发展过程有关。; 叶伟彭焰黄东生刘尚礼马若凡苏培强刘娜; 关键词：椎间盘疾病椎间盘退变转化生长因子多态性

半定量聚合酶链反应在PCR-RFLP酶切法测定基因多态性中的应用被引量：1: 2007年; 目的探索将半定量聚合酶链反应方法，应用于PCR-RFLP酶切法以提高基因多态性测定精确性和可重复性。方法PCR扩增81例人维生素D受体基因BsmI位点多态性片段，分别在酶量不同的两种酶切体系中测定基因型；PCR产物经半定量后，再次用上述两种体系酶切。考察4次测定的一致性。结果经产物半定量后用PCR-RFLP法测定VDR基因BsmI多态性，不同酶切系统测得基因多态性的一致性明显优于未经半定量的结果。结论应用半定量PCR方法可明显提高PCR-RFLP酶切法的精确性和可重复性。; 陈为坚叶伟苏培强黄东生李贵涛丁悦赵晓苗; 关键词：维生素D受体基因单核苷酸多态性限制性片段长度多态性

汉族人维生素D受体基因TruⅠ和FokⅠ多态性与腰椎间盘退变的关系被引量：13: 2007年; [目的]探讨汉族人维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)基因多态性与腰椎间盘退变(lumbar discdegeneration,LDD)的关系。[方法]收集182例汉族人静脉血标本和腰椎MRI,其中对照组101例,病例组81例。用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)法测定2组标本的VDR基因TruⅠ和FokⅠ酶切位点多态性;根据MRI显示的信号差异按Schneiderman分级法确定各个体腰椎间盘的退变程度,分无、轻、中、重4组。分析病例对照组中基因型、等位基因频率的分布规律,分析其中小于45岁(包括45岁)者基因型及基因频率分布与椎间盘退变程度的关系。[结果]对照组中FokⅠ和TruⅠ的等位基因频率分布为:F59.4%,f40.6%和T79.2%,t20.8%;病例组中FokⅠ和TruⅠ等位基因频率的分布为:F53.7%,f46.3%和T80.9%,t19.1%,二组中的分布差别无统计学意义,P>0.05;在MRI分组中VDR基因TruⅠ和FokⅠ酶切位点的基因型和等位基因频率在组中分布差异也无显著性,P>0.05。[结论]VDR基因TruⅠ和FokⅠ酶切位点多态性和汉族人LDD无关。; 陈为坚叶伟丁悦苏培强李贵涛黄东生刘尚礼; 关键词：维生素D受体基因单核苷酸多态性限制性片段长度多态性腰椎间盘退变

促炎因子与抗炎因子在突出腰椎间盘组织中的表达及其意义被引量：39: 2006年; 目的观察促炎因子白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α及抗炎因子白介素(IL)-4在退变椎间盘组织内的表达,并探讨其意义。方法收集30例单节段椎间盘突出症患者及10例经前路松解手术的特发性脊柱侧弯患者的髓核组织,术前患者临床症状严重程度均予Oswestry功能障碍指数(ODI)评定,23例行MRI检查的患者,根据Schneiderman分级评定椎间盘退变程度,术后应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定髓核组织中IL-6、TNF-α和IL-4的含量。结果退变髓核中IL-6的含量(11.2±7.5)ng/L较对照组(6.4±0.8)ng/L高(P<0.01)、TNF-α的含量(186.8±86.0)ng/L亦较对照组(122.3±23.5)ng/L高(P<0.05);IL-4的表达仅存在于TNF-α表达较高的髓核组织中;IL-6及TNF-α的同时表达与ODI评分高低正相关(IL-6:B=0.481,β=0.229,P<0.05;TNF-α:B=6.945E-2,β=0.522,P<0.01);椎间盘退变MRI分级与促炎因子和抗炎因子的高低无明显相关。结论促炎因子TNF-α与IL-6的表达增高为椎间盘退变的重要原因,亦为临床症状加重的重要原因之一;促炎因子与抗炎因子表达的不平衡亦可能为椎间盘退变进展的重要因素。; 黄东生丁悦叶伟苏培强刘尚礼梁蔚文; 关键词：促炎因子抗炎因子腰椎间盘突出基因表达酶联免疫吸附测定法

IL-1β基因单核苷酸多态性与腰椎间盘疾病的相关性被引量：10: 2007年; 为研究汉族人白细胞介素-1β(IL-1β)基因-511T>C和+3954C>T位点单核苷酸多态性与腰椎间盘疾病的关系,采用聚合酶链反应技术,扩增81例腰椎间盘疾病患者和101例正常对照者中分别包含IL-1β基因-511T>C和+3954C>T位点的片段,酶切法鉴定IL-1β基因-511T>C和+3954C>T位点单核苷酸多态性情况,比较两组中基因多态性与腰椎间盘疾病的关系。同时,利用MRI检测两组腰椎间盘退变的情况,并分析其中小于45岁者IL-1β基因多态性与腰椎间盘退变严重程度的关系。结果显示,腰椎间盘疾病病例组及对照组中均存在IL-1β基因-511T>C和+3954C>T位点单核苷酸多态性。IL-1β基因-511T>C位点TT、TC和CC基因型,T、C基因型差别与腰椎间盘疾病有关(P<0.01),与腰椎间盘退变严重程度无关(P>0.05),但IL-1β基因+3954C>T位点单核苷酸多态性与腰椎间盘退变严重程度及腰椎间盘疾病均无关(P>0.05)。表明在汉族人中,存在IL-1β基因-511T>C和+3954C>T位点单核苷酸多态性,但仅-511T>C位点单核苷酸多态性与腰椎间盘疾病有关。; 叶伟马若凡苏培强黄东生刘尚礼陈为坚王新光; 关键词：白细胞介素-1Β 单核苷酸多态性椎间盘退变椎间盘疾病

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广东省自然科学基金(5001754)

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