浙江省自然科学基金(Z2100973)
- 作品数：15 被引量：55H指数：5
- 相关作者：许爱娥周妙妮傅丽芳吴纪龙欧阳杰更多>>
- 相关机构：杭州市第三人民医院安徽医科大学浙江中医药大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金杭州市重大科技创新项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 用于黑素细胞培养的共聚改性壳聚糖交联膜的制备
- 2013年
- 生物相容性聚合物膜上培养黑素细胞可用于白癜风移植治疗。本文通过甲基丙烯酸酐酰化反应,在壳聚糖中引入双键。以2-羟基-4-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮(I2959)为光引发剂,在365nm紫外光照下进行改性壳聚糖与三乙二醇二甲基丙烯酸酯和聚乙二醇甲基丙烯酸酯的交联共聚,制备改性壳聚糖交联膜(CMMC)。研究表明CMMC具有满足伤口辅料要求的吸水率和水分蒸发透过率,其机械强度优于硫酸钠物理交联的壳聚糖膜,黑素细胞能在CMMC上生长和增殖,并保持生物学活性,满足黑素细胞移植治疗的使用要求。
- 邹洁辉王文俊王文俊李阳傅丽芳
- 关键词：壳聚糖黑素细胞交联膜丙烯酸酯共聚
- 核因子E2p45相关因子2核转位对黑素细胞生物学活性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨核因子E2p45相关因子2（Nrf2）核转位对永生化黑素细胞株B10BR细胞生物学活性的影响。方法构建电转染野生型和nls缺失型nrf2质粒载体至B10BR细胞，结合叔丁基氢醌（TBHQ）和（或）H2O2处理，Western印迹检测Nrf2，his标签蛋白表达，MTT法测定细胞活性，多巴氧化法检测酪氨酸酶活性，Transwell法测定转染细胞的迁移。结果TBHQ处理的转染组细胞核中Nrf2表达均显著高于TBHQ未处理组（P〈0．01）。转染质粒组间及其与未处理组间细胞酪氨酸酶活性差异均无统计学意义（P〉0，05），H2O2处理使2个质粒转染组酪氨酸酶活性较单独质粒转染组显著下降（pcDNA-nrf2，P〈0．05；pcDNA-nrf2△nls，P〈0．05）。相对于TBHQ未添加H2O2 处理的nrf2组，TBHQ显著增强H2O2处理的野生型nrf2质粒转染细胞酪氨酸酶活性（P〈0．05）；相对于TBHQ未添加H2O2处理的nls组，nls缺失型nrf2质粒转染组细胞酪氨酸酶活性差异无统计学意义（P〉0．05）。相对于nrf2未转染组，H2O2对野生型nrf2质粒转染组细胞活性的影响无统计学意义（P〉0．05）；相对于两组的未处理组，H2O2引起未转染组及nls缺失型质粒转染组细胞活性显著下降（未处理组，P〈0．05；pcDNA-nrf2Anls，P〈0．01）。TBHQ可以保护野生型nrf2质粒转染细胞免受H2O2引起的氧化损伤，对nls缺失型质粒转染组细胞无明显保护作用。各处理组黑素细胞迁移差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Nrf2核转位异常影响黑素细胞的抗氧化能力、黑素细胞活性及酪氨酸酶活性。TBHQ可以激活野生型Nrf2在细胞核中表达水平，增强酪氨酸酶和黑素细胞活性，进而提高细胞的抗氧化水平。
- 林福全许文周妙妮洪为松傅丽芳许爱娥关翠萍
- 关键词：黑素细胞核转位一元酚单氧酶
- 茶多酚对CD8＋T细胞杀伤白癜风患者黑素细胞的保护作用研究被引量：5
- 2013年
- 目的探讨茶多酚对CD8＋T细胞杀伤白癜风患者黑素细胞的保护作用。方法取白癜风患者白斑边缘处皮片组织，培养CD8＋淋巴细胞，细胞纯度用流式细胞仪进行鉴定，通过和黑素细胞共培养验证其针对黑素细胞的杀伤作用。将不同浓度茶多酚加入CD8＋T细胞和黑素细胞共培养的体系，用流式细胞仪检测黑素细胞的凋亡。结果取白癜风皮损边缘表皮组织中成功培养CD8＋T淋巴细胞，纯度达90％以上，高表达活化抗原CD137和CD69。CD8＋T细胞和黑素细胞共培养后，可明显诱导黑素细胞凋亡。200μg／ml和400μg／ml浓度茶多酚处理均可以降低黑素细胞的凋亡率。结论白癜风皮损边缘组织来源的CD8＋T细胞对白癜风患者黑素细胞有明显杀伤作用。茶多酚对抗CD8＋T细胞杀伤黑素细胞，从而对黑素细胞有一定的保护作用。
- 欧阳杰吴纪龙周妙妮付丽芳许爱娥
- 关键词：白癜风黑素细胞茶多酚
- 蛋白酶体抑制对黑素细胞酪氨酸酶表达及输出的影响被引量：3
- 2013年
- 目的明确蛋白酶体抑制对黑素细胞酪氨酸酶表达及输出的影响。方法Western印迹检测8例白癜风患者和4名健康对照皮肤组织26S蛋白酶体水平。蛋白酶体抑制剂（1actacystin）处理黑素细胞后，四甲基偶氮唑盐（MTr）法测定黑素细胞活性，检测蛋白酶体活性，电镜观察黑素细胞内质网形态，激光共聚焦观察酪氨酸酶与内质网标志蛋白的共定位表达，Western印迹分析26S蛋白酶体和酪氨酸酶表达水平。结果白癜风患者皮损部位26S蛋白酶体表达水平（1．05±0．40）显著低于正常表皮部位（1．82±0．88）和健康对照（1．88±0．16）（P〈0．05），但后二者间差异无统计学意义（P〉0．05）。与未处理组相比，10μmol／Llactacystin处理12h后对黑素细胞开始有显著抑制作用（细胞活性吸光度值：0．999±0．110比1．372±0．127，P〈0．05），蛋白酶体活性显著低于未处理组（0．234±0．019比1，P〈0．01）。lactacystin处理组内质网相对膨胀值显著高于未处理细胞（1．91±0．17比1．17±0．11，P〈0．01）。lactacystin处理组酪氨酸酶与内质网标志蛋白共定位于内质网，而未处理组酪氨酸酶能有效输出于内质网。与未处理组相比，lactacystin处理组酪氨酸酶表达水平显著下降（146±10比269±8，P〈0．01），且酪氨酸酶活性也显著下降（0．159±0．017比0．221±0．019，P〈0．01）。结论白癜风患者皮损处26S蛋白酶体水平显著下降，蛋白酶体抑制引起黑素细胞内质网膨胀，影响酪氨酸酶有效输出于内质网及表达。
- 许文林福全刘继锋傅丽芳洪为松周妙妮许爱娥关翠萍
- 关键词：白癜风黑素细胞一元酚单氧酶蛋白酶体
- 用于黑素细胞培养和移植的壳聚糖/明胶复合交联膜的制备与表征被引量：3
- 2012年
- 利用生物相容膜材料培养黑素细胞可用于白癜风移植治疗并提高移植成功率。本文通过物理交联方法制备了厚度约50微米的壳聚糖/明胶复合交联膜(CCGM),对CCGM的物理、机械性能及其用于黑素细胞的培养进行了研究。研究表明CCGM具有较高的吸水率和良好的水蒸气透过率,符合伤口敷料的要求。动态机械性能和拉伸实验结果显示该交联复合膜有良好的湿强度,能满足细胞培养、转移和移植的使用要求。此外,CCGM支持黑素细胞的生长和增殖,有望用于白癜风的移植治疗。
- 许思原王文俊董东傅丽芳许爱娥
- 关键词：交联壳聚糖明胶复合膜黑素细胞
- 卡泊三醇对白癜风黑素细胞和CD8＋细胞毒T细胞的影响被引量：11
- 2013年
- 目的探讨卡泊三醇对白癜风患者黑素细胞及皮损周边CD8＋细胞毒T细胞（CD8＋CTL）增殖及其细胞因子分泌的影响。方法实验分黑素细胞组、CD8＋CTL组、黑素细胞与CD8＋CTL共培养组，细胞计数法检测卡泊三醇处理前后细胞数变化情况，ELISA测定卡泊三醇处理前后分泌白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及干扰素γ（IFN-γ）的变化；细胞计数法检测卡泊三醇处理过的黑素细胞与CD8＋CTL共培养组在添加与不添加抗人IL-6抗体时，黑素细胞及CD8＋CTL数量的变化。筛选10^-8、10^-9mol／L卡泊三醇用于实验。结果在凋亡检测中发现，CD8＋CTL与黑素细胞共培养中黑素细胞有显著凋亡。加卡泊三醇后黑素细胞组的黑素细胞计数与未加药对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05），而黑素细胞与CD8＋CTL共培养组黑素细胞数明显增加（P〈0．05）；CD8＋CTL组和黑素细胞与CD8＋CTL共培养组的CD8＋CTL细胞数也明显增加（P〈0．05）。与黑素细胞和CD8＋CTL单独培养组相比，黑素细胞与CD8＋CTL共培养组分泌的IL-6、IFN-γ和TNF-α显著减少；经104mol／L卡泊三醇处理后的黑素细胞与CD8＋CTL共培养组分泌的IL-6减少更加明显，与未加药组减少率比较，差异有统计学意义（t=2．89，P〈0．05），而IFN-γ和TNF-α在加药前后无明显变化（P〉0．05）。在卡泊三醇处理过的共培养组中添加5mg／L抗IL-6抗体后，黑素细胞显著增加，而CD8＋CTL减少，其差异有统计学意义（t=3．53，P〈0．05；t=3．15，P〈0．05）。结论白癜风皮损处的CD8＋CTL对黑素细胞有一定的特异性杀伤作用，卡泊三醇可以减少炎症细胞因子IL-6的分泌，从而减少CD8＋CTL对黑素细胞的杀伤，可能是卡泊三醇治疗白癜风的机制之一。
- 邢臣径林福全吴纪龙傅丽芳王遂泉欧阳杰许爱娥
- 关键词：黑素细胞CD8阳性T淋巴细胞卡泊三醇细胞因子类
- 白介素-6／gp130信号通路在白癜风T细胞免疫中的作用
- 2013年
- 细胞因子通过对T细胞的分化影响适应性免疫应答，IL-6-开始被认为具有B细胞生长因子的特点诱导抗体的产生，最近研究表明，IL-6在T细胞免疫中产生重要的作用，IL-6通过膜结合IL-6受体或可溶性IL-6受体结合gp130形成复合体进行信号转导产生作用，可以阻止T细胞凋亡、诱导Th细胞的活化、调节Treg和，Th17细胞之间的平衡，且T细胞在白癜风中发挥重要作用，黑素细胞自身抗原的存在使自身反应性T细胞可以通过细胞毒性作用持续性杀伤黑素细胞，导致黑素细胞的毁坏和凋亡，从而引起白癜风。
- 汤慧娟许爱娥周妙妮
- 关键词：白癜风免疫T淋巴细胞白细胞介素6
- 天然药用产物治疗白癜风的研究进展被引量：1
- 2013年
- 白癜风是一种获得性的慢性色素脱失性疾病，目前无特效疗法。近些年，天然药用产物，包括：草药、维生素、矿物质治疗白癜风的临床及实验研究，有较多的文献报道。临床上草药类（主要指中药）治疗白癜风有效的报道较多，但缺少国际认可的严格随机对照的研究文献，多个文献间关于维生素和矿物质类产物的疗效结果常不一致，其中银杏叶胶囊、胡椒碱或胡椒碱类似物和多种维生素的临床有效性，值得进一步研究证实。
- 卢良君许爱娥
- 关键词：白癜风植物药用
- 白癜风动物模型的研究进展被引量：3
- 2013年
- 白癜风是一种皮肤黏膜色素脱失性疾病，其病因及发病机制尚未明确。多种常规应用模式的白癜风动物模型存在局限陛。随着现代科学技术的发展，许多新型白癜风动物模型的建立，如酪氨酸酶相关、CD8-T胞相关和热休克蛋白70相关的白癜风动物模型等，这些模型与人白癜风相类似度、重复性和专一性等方面都有一定程度的提高，成为研究白癜风发病机制，治疗靶点和治疗药物等方面研究的主要基础。
- 祝逸平许爱娥
- 关键词：白癜风动物
- 细胞因子在白癜风发病机制中的作用被引量：7
- 2014年
- 白癜风是一种由于黑色素细胞受损导致色素脱失的常见色素障碍性皮肤病,其病因复杂,发病机制尚未明确。多种细胞因子与白癜风的发病关系密切。细胞因子通过旁分泌或自分泌的方式,影响黑色素细胞的生物学特性。白细胞介素、肿瘤坏死因子等抑制黑色素细胞生长,干细胞因子、碱性成纤维细胞生长因子等促进黑色素细胞的生长、分化和增殖。该文旨在介绍各种细胞因子的作用机制以及在白癜风上的应用和展望。
- 鲍华烨许爱娥
- 关键词：白癜风黑色素细胞细胞因子
