广东省自然科学基金(S2011010003912)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：谭万龙蓝开健娄海波张哲欢王俊洁更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院南方医科大学广州市第八人民医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家教育部博士点基金广东省教育厅育苗工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源膀胱癌特异性抗体基因库被引量：2
- 2013年
- 目的构建大容量且能高效展示于哺乳动物细胞表面的全长人源膀胱癌特异性抗体基因库。方法分离膀胱癌患者的外周血单核细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,用RT-PCR方法扩增全套IgG1重链可变区(VH)和Kappa型轻链全长(LCκ)基因,经过相应的限制性内切酶酶切后分别插入pDGB-HC-TM载体,分别构建膀胱癌特异性的抗体重链基因库和轻链基因库(一级抗体库)。随机挑取20个单克隆测定抗体基因序列,并瞬时转染FCHO细胞,结合流式细胞仪检测细胞表面抗体的表达。将上述构建好的轻重链基因库通过4片段连接方法插入双表达载体pDGB4,构建二级抗体库,转染FCHO后用流式细胞仪检测细胞表面抗体表达。结果分别成功构建了膀胱癌特异性的重链基因库和轻链基因库,随机挑取的轻重链单克隆各有7个和9个含有正确的抗体基因编码序列,且能展示于哺乳动物细胞表面,理论库容量达到3.32×10^(11)[(1.7×10~6×70%)×(3.1×10~5×90%)]。成功构建了膀胱癌二级抗体库,库容量为9×10~5。结论利用哺乳动物细胞表面展示技术,我们成功构建了膀胱癌特异性的全长人源抗体基因库,一级抗体库的库容量达到3.32×10^(11),二级抗体库库容量达到9×10~5,为下一步筛选特异性、高亲和力抗膀胱癌抗体奠定了基础。
- 蓝开健张哲欢梁中锟王俊洁娄海波周元平刘叔文李长征谭万龙周辰
- 关键词：膀胱癌流式细胞仪检测
- 鱼的摄入与肾癌发病风险关系的Meta分析
- 2013年
- 目的应用meta分析的方法对各项研究进行系统分析以研究鱼的摄入与肾癌发病风险关系。方法在PubMed,Embase,CNKI,CA中检索有关鱼及其产品的摄入与肾癌关系的病例对照研究以及队列研究的文献。通过meta分析方法研究鱼的摄入与肾癌的关系。运用I^2检验各项研究的异质性,并使用漏斗图检验发表偏倚。结果共纳入17篇文献,采用随机效应模型合并分析后的结果未发现鱼的摄入与肾癌的发病风险相关(RR=0.90;95%CI,0.78～1.02)且异质性明显(P=0.003,I^2=52.3%),针对研究类型、研究地区以及发表时间进行亚组分析,同样没有明显的证据证明两者相关,但在性别亚组的分析中发现,男性增加鱼的摄入可降低肾癌的发病率,而在女性中则没有关系。结论 meta分析结果提示增加鱼的摄入未发现有预防肾癌发病的作用。
- 万沛李妍李飞马天骏蓝开健陈炜陈三三何成武谭万龙
- 关键词：肾癌META分析
- 腹腔镜与开放性保留肾单位手术的临床疗效分析被引量：1
- 2014年
- 目的评估比较开放性保留肾单位肾切除术与腹腔镜保留肾单位肾切除术治疗局限性肾细胞癌的临床效果。方法回顾性分析自2007-06/2013-10月因肾细胞癌于作者医院行保留肾单位手术治疗的131例患者的临床资料。其中86例行开放性保留肾单位肾切除术（open partial nephrectomy,OPN）治疗,45例行腹腔镜保留肾单位肾切除术（laparoscopic partial nephrectomy,LPN）治疗。对两组病例肿瘤大小、手术时间、肾脏热缺血时间、术中出血量、引流量、引流管留置时间、术后住院时间、术后并发症、术前及术后肌酐及术后复发等指标进行回顾性分析。结果 OPN组与LPN组的基本情况以及并发症发生率,无统计学差异（P〉0.05）。LPN动脉阻断时间较OPN组长（P=0.01）,但术时、出血量、输血例数、术后引流时间及住院时间均较少于后者（P〈0.05）。两组术后肌酐较术前均有升高。随访124例病人,平均随访26个月（1~76个月）,OPN组有1例术后第4年死于肾癌腹腔转移,1例术后5年死于前列腺癌,1例术后15月中下腹及肾门转移;LPN组未见复发及转移。结论 LPN较OPN相比具有创伤小、出血少、恢复快、住院时间短等优点,且能达到OPN的治疗效果。在熟练掌握腹腔镜下操作及缝合等手术技巧的前提下,腹腔镜肾部分切除术是治疗局限性肾癌的一种更好的手段。
- 陈一峰谭万龙
- 关键词：局限性肾癌
- 应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库被引量：1
- 2013年
- 目的应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库。方法采集登革确诊患者恢复期外周血,分离外周血淋巴细胞并提取其总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因,构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库;将抗体基因库转染CHO细胞、用流式细胞仪分析抗体在CHO细胞表面的表达。结果以1.2μg总RNA为模板,用6套引物扩增全长Kappa轻链和重链可变区基因,插入表达载体,轻链基因库容量为1.45×104,重链基因库容量为1.8×105;随机挑选的10个轻链克隆和10个重链克隆,经过测序鉴定,轻链有8个含有正确的阅读框架,编码8个不同的氨基酸序列,重链有7个含有正确的阅读框架,编码7个不同的氨基酸序列。流式细胞仪分析含有正确阅读框架的单克隆和抗体基因库,均检测到全长抗体在CHO细胞表面的表达,抗体库中可表达的抗体多样性达到109。结论以1.2μg总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,成功构建可表达库容量达到109的登革病毒特异性全长人抗体基因库。
- 温扬明蓝开健王俊洁余晶仪屈娅荣赵卫张复春谭万龙曹虹周辰
- 关键词：登革病毒
