国家科技重大专项(2003BA712A08-01)
- 作品数：17 被引量：180H指数：8
- 相关作者：梁国栋付士红王环宇李铭华冯云更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心云南省地方病防治所山西省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项中美新发和再发传染病合作项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 两种基因型流行性乙型脑炎病毒在上海市共同流行被引量：3
- 2012年
- 目的掌握上海市流行性乙型脑炎(乙脑)病毒基因型别特征。方法 2002-2005年在上海市奉贤县养猪场采集蚊虫标本,研磨处理后分离病毒,完成病毒细胞学、动物学、血清学及分子生物学鉴定。测定病毒全基因组序列,应用ATGC、ClustalX(1.83)、MegAlign、GeneDoc3.2和Mega5.0等生物学软件完成序列拼接、比对、核苷酸与氨基酸同源性分析、系统进化分析。结果共采集38347只蚊虫标本,主要是三带喙库蚊。分离到13株乙脑病毒。测定13株乙脑病毒全基因组序列,结合上海市其他年份分离的乙脑病毒及涵盖5个基因型别的其他乙脑病毒全基因组序列,通过系统进化分析发现,上海市2001、2003、2005和2007年分离的乙脑病毒属于基因Ⅰ型,2004年和2006年分离的乙脑病毒属于基因Ⅲ型。结论 2种基因型别乙脑病毒(Ⅰ、Ⅲ型)在上海市共同流行。
- 王环宇付士红何英闵继光潘晓玲梁国栋
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒基因型系统进化分析
- 贵州省不同地区2008年虫媒病毒调查被引量：10
- 2012年
- 目的调查贵州省不同地区虫媒病毒分布状况,对采集的蚊虫标本进行病毒分离与鉴定。方法 2008年7月在贵州省黔西、德江、榕江和从江县的4个标本采集点使用诱蚊灯采集蚊虫标本,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果采集到3属4种共计9160只蚊虫标本,从中分离到9株病毒,鉴定结果显示8株为盖塔病毒,1株为流行性乙型脑炎病毒(JEV);贵州省新分离盖塔病毒与原型株相比,核苷酸同源性为94.5%～94.9%,氨基酸同源性为97.4%～97.6%;新分离JEV与基因Ⅰ型JEV的同源性最高,系统进化分析结果显示属于基因Ⅰ型JEV。结论在贵州省分离到盖塔病毒和基因Ⅰ型JEV。盖塔病毒新分离株与我国其他省份分离株进化关系较近;JEV新分离株与四川省分离株进化关系较近。
- 李铭华付士红冯云叶绪芳赵苏晔刘淳婷梁国栋
- 关键词：虫媒病毒盖塔病毒流行性乙型脑炎病毒种系发生
- 2009年江西省新分离流行性乙型脑炎病毒株全基因组分子生物学特性研究被引量：2
- 2010年
- 目的对2009年分离自江西省蚊虫标本的流行性乙型脑炎(乙脑)病毒JX0939株进行全基因组序列测定,分析其基因组特征。方法使用针对乙脑病毒全基因组测序引物进行PCR扩增基因组片段,PCR产物直接测序,拼接后获得全基因组序列。利用生物信息学软件进行核苷酸序列及氨基酸序列分析和病毒的系统进化分析。结果新分离乙脑病毒JX0939株基因组全长10965个核苷酸,从97位到10392位,共10296个核苷酸编码一个开放阅读框,编码3432个氨基酸。与GenBank中登录的所有59株乙脑病毒全基因组序列比较发现,其核苷酸总体差异率为1%～17%,氨基酸总体差异率为0.1～5%。与目前使用的减毒活疫苗株SA-14-14-2株相比较,只有88%的核苷酸同源性,全基因组共存在1237个核苷酸差异,83个氨基酸差异。提取GenBank登录的及本实验室测定的不同省份的乙脑病毒全基因组序列,进行全基因组序列系统进化分析显示JX0939株属于基因1型乙脑病毒。结论新分离的乙脑病毒JX0939株属于基因1型,与2007年中国分离株SH17M-07进化关系最接近,与疫苗株SA-14-14-2相比关键位点氨基酸未见变异。
- 王力华李铭华付士红姜红月陈维欣唐松戴新平应彩霞詹漫华施勇梁国栋
- 关键词：乙型脑炎病毒全基因组系统进化分析
- 2007年山西省部分地区虫媒病毒调查被引量：4
- 2009年
- 目的调查山西省部分地区的虫媒病毒，在当地采集蚊虫标本进行病毒的分离与鉴定。方法2007年7月和8月在当地采集蚊虫标本，通过组织细胞培养进行病毒分离，利用分子生物学和生物信息学技术对病毒分离物进行鉴定与分析。结果分离到10株病毒分离物，鉴定结果显示分离株SX0765、SX0766、SX0767、SX0771、SX0789、SX0790、SX0793、SX0794、SX0795、SX0796均为版纳病毒；此外，分离株SX0771和SX0794还同时存在辽宁病毒基因。进一步分析显示版纳病毒新分离株与此前在北京、云南和辽宁分离到的病毒株之间存在明显差异，同源性在89．7％～94．1％之间。结论在山西省分离到10株版纳病毒和两株辽宁病毒，版纳病毒与我国其他地区分离株有明显差异，在进化上相对独立。
- 李铭华孟维珊付士红程景侠赵俊英孔祥盛代培芳梁国栋
- 关键词：虫媒病毒种系发生
- 河北省虫媒病毒分离鉴定被引量：34
- 2006年
- 目的 研究河北省蚊虫携带虫媒病毒情况。方法 在蚊虫孳生地采集标本液氯保存，按照20—30只／组经无菌处理后研磨，研磨液离心后接种C6／36细胞，连续三代观察致细胞病变情况；对细胞病变阳性的分离物，进行血清学和分子生物学鉴定。结果 在河北省涉县两个村共采集蚊虫1310只，分46组进行处理，共获得13株阳性分离物，其中两株分离物经间接免疫荧光检测提示为甲病毒属成员，用甲病毒属特异性引物RT-PCR扩增阳性，经核酸序列测定证实该序列与Getah病毒（AY702913．1）同源性最高（98％），初步鉴定为Getah病毒，其他病毒分离物尚在鉴定。结论 本研究从河北省蚊虫标本中分离到Getah病毒，这是我国内陆地区首次分离到该病毒。
- 王焕琴刘卫滨杨冬荣梁勇王俊巍张连山刘家伟陶三菊吕新军梁国栋
- 关键词：虫媒病毒
- 辽宁省乙脑病毒的分离与鉴定被引量：46
- 2006年
- 目的 对2002年辽宁省采集的蚊虫标本进行病毒分离与鉴定。方法 从辽宁省采集蚊虫标本4927只，用细胞培养的方法分离病毒，对新分离的病毒进行血清学（ELISA和IFA方法）、分子生物学鉴定。结果 本实验共研磨蚊虫标本50批，分离到2株病毒，命名为LN02-102、LN02，104。这2株病毒均可致BHK-21细胞病变（CPE）（2—3d），致Vero细胞病变（2—4d），也可致C6／36细胞病变（2—4d）。对3日龄乳鼠2—3d可致死。这2株病毒可与标准乙脑病毒抗体反应。利用病毒PrM区段（基因组456-695核苷酸）进行基因分型分析。新分离的2株病毒属于基因Ⅰ型乙脑病毒。对这2株病毒的E基因区段进行分析，它们之间核苷酸和氨基酸的同源性为100％，与疫苗株SA14-14-2相比，核苷酸差异为4．11％，氨基酸差异在0．60％。结论 在辽宁省采集的蚊虫标本中分离到2株病毒，经血清学和分子生物学鉴定为基因Ⅰ型乙脑病毒，是近年来在辽宁省首次分离到基因Ⅰ型的乙脑病毒。
- 王俊文付士红王环宇毛晓燕刘卫滨何英孙肖红蔡增林吴立平赵习芳韩瑞红景雅梁国栋
- 关键词：种系发生基因
- 江西省流行性乙型脑炎病毒的分离与鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的调查江西省的虫媒病毒分布状况,在当地采集蚊虫标本进行病毒分离与鉴定。方法 2008-2009年夏季在江西省共选择8个标本采集点,使用诱蚊灯采集蚊虫标本,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果 2008年采集到3属3种共计11916只蚊虫标本;2009年采集到4属5种共计5905只蚊虫标本;共分离到4株病毒,经鉴定均为流行性乙型脑炎(乙脑)病毒;新分离乙脑病毒与基因Ⅰ型乙脑病毒的同源性最高,系统进化结果显示,4株乙脑病毒均属于基因Ⅰ型。结论在江西省分离到基因Ⅰ型乙脑病毒,与上海市和浙江省分离株进化关系较近。
- 李铭华付士红姜红月陈维欣唐松施勇梁国栋
- 关键词：虫媒病毒流行性乙型脑炎病毒种系发生
- 云南省文山中越边境地区虫媒病毒调查被引量：6
- 2009年
- 目的 对云南省文山县、河口县等中越边境地区开展虫媒病毒调查，以期了解当地蚊虫携带虫媒病毒情况。方法2007年9月在当地5个采集点共采集蚊虫8326只，包括库蚊6091只，中华按蚊1334只，刺扰伊蚊848只，阿蚊53只，并保存于液氮。经消毒、研磨、离心等处理后进行组织培养细胞接种，分离病毒和对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定，以软件进行病毒的核苷酸序列比对和系统发生分析。结果从库蚊分离到4株对C6／36细胞致病变的病毒分离物，其他蚊种没有分离到病毒分离物。鉴定结果表明，标本WS0704-2与版纳病毒抗体反应，PCR鉴定为版纳病毒，该病毒基因组第12片段的进化关系同中国其他版纳病毒有明显差异，位于一条独立的进化枝中，在进化上相对独立。标本WS0704—1、WS0708—1、WS0708-2为浓核病毒。结论云南省文山中越边境地区存在多种蚊虫媒介并携带版纳病毒等虫媒病毒。
- 周涛张海林李铭华王静林付士红冯云梁国栋
- 关键词：虫媒病毒
- 在内蒙古蚊虫中分离到版纳病毒被引量：8
- 2009年
- 目的鉴定内蒙古通辽市分离的虫媒病毒。方法使用血清学及分子生物学方法鉴定内蒙古蚊虫标本分离的病毒，对毒株的部分核苷酸序列进行测定，应用Clustal X软件做碱基配对分析，MEGA软件完成病毒进化分析，DNAStar软件包中的MegAlign完成核苷酸和氨基酸同源性分析。结果在内蒙古通辽市采集凶小库蚊标本分离的病毒经过血清学和分子生物学实验鉴定为版纳病毒（Banna virus，BAV），与版纳病毒部分中国分离株位于同一进化分支中，病毒第12片段核苷酸同源性为89．6％～98．4％，氨基酸同源性为90．4％～98．6％。结论在内蒙古凶小库蚊标本中分离到版纳病毒。
- 曹玉玺付士红田兆丰何英王焕琴王环宇杨红梅涛波梁国栋
- 关键词：种系发生
- 我国首次分离到Kadipiro病毒
- 在云南省西北部地区进行的虫媒病毒调查中,从三带喙库蚊、中华按蚊和骚扰阿蚊中分离到5株病毒,所有病毒仅引起C6/36细胞病变对BHK21细胞不产生细胞病变;电子显微镜观察可见病毒颗粒呈球形,无包膜,表面有明显刺状突起,直径...
- 孙肖红孟维珊付士红冯云翟友刚王静林王焕琴吕新军梁国栋
