国家自然科学基金(30470807) 作品数:6 被引量:26 H指数:2 相关作者: 吴雄飞 田梅 孙岩 余荣杰 金锡御 更多>> 相关机构: 第三军医大学西南医院 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
晚期氧化蛋白产物抗体的制备和鉴定 2009年 目的制备和鉴定抗人晚期氧化蛋白产物(AOPPs)单克隆抗体(McAb)。方法用次氯酸(HOCl)和纯化的人血白蛋白(HSA)孵育获得AOPPs-HSA,取凝胶层析纯化后的第1峰免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗AOPPs-HSA的McAb,用间接ELISA、Western blot鉴定其特异性及亚类。结果成功筛选出3株稳定分泌抗AOPPs,1株既抗HSA又抗AOPP的McAb杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类3株为IgG1,1株为IgG2b,间接ELISA和Westernblot证明制备的抗体可以特异地和天然或体外制备的AOPPs结合。结论获得抗人AOPPs-HSA的McAb细胞株4株,为进一步研究AOPPs生物学活性及其相关疾病的诊断和预后奠定基础。 田梅 易维京 吴雄飞 余荣杰关键词:晚期氧化蛋白产物 单克隆抗体 新的尿毒症毒素结合蛋白-晚期氧化蛋白产物结合蛋白分离成功 被引量:2 2005年 孙岩 吴雄飞 金锡御关键词:晚期氧化蛋白产物 结合蛋白 尿毒症毒素 生物传感器 单核细胞 晚期氧化蛋白产物的研究进展 被引量:16 2010年 晚期氧化蛋白产物(AOPPs)是新近发现的一类尿毒症毒素。它能激发单核细胞呼吸爆发,刺激以肿瘤坏死因子(TNF-α)为主的大量促炎性细胞因子合成、释放,促发单核细胞的炎症反应,引起全身微炎症状态。是慢性肾衰竭(CRF)患者免疫功能紊乱、动脉粥样硬化、透析相关性淀粉样变等长期并发症的重要致病环节。本文就近年来关于AOPPs的观点作一综述。 田梅 吴雄飞关键词:晚期氧化蛋白产物 免疫学检测晚期氧化蛋白方法的建立及临床应用 2009年 田梅 吴雄飞 余荣杰 易维京关键词:晚期氧化蛋白产物 酶联免疫吸附反应 单克隆抗体 肾功能不全 晚期氧化蛋白产物诱导血管平滑肌细胞表达MCP-1及其信号转导通路的研究 被引量:6 2008年 目的研究p38有丝分裂素激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,MAPK)在晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)诱导的鼠血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1表达中的作用。方法使用200和400μmol/LAOPP分别以不同时间刺激培养的鼠血管平滑肌细胞,在阻断实验中加入特异性p38MAPK阻断剂SB203580阻断p38MAPK信号转导通路。采用免疫印迹法(Western blot)检测细胞中MCP-1和磷酸化p38MAPK的表达情况。结果用特异性p38MAPK阻断剂SB203580预处理后,400μmol/LAOPP刺激4h的鼠血管平滑肌细胞MCP-1表达(平均灰度值)从42.00±0.95降至9.35±1.35受到显著抑制(P<0.01)。结论①p38MAPK信号转导途径参与了AOPP诱导的鼠血管平滑肌细胞MCP-1的表达。②晚期氧化蛋白产物促进平滑肌细胞MCP-1 mRNA和蛋白表达可能是其致动脉粥样硬化机制之一。 彭侃夫 赵洪雯 余荣杰 孙岩 王军霞 吴亿 吴雄飞关键词:晚期氧化蛋白产物 单核细胞趋化蛋白-1 有丝分裂素激活蛋白激酶类 晚期氧化蛋白产物的分离纯化和鉴定 被引量:2 2006年 目的分离纯化以人血清白蛋白(humanserum albumin,HSA)为原料生成的晚期氧化蛋白产物(advanced ox idation protein products,AOPP),即AOPP HSA,并对其进行鉴定,以寻求一种制备高纯度且具生物活性的AOPP HSA的方法。方法采用HSA HOCl孵育法体外制备AOPP HSA粗纯品,经凝胶层析和离子交换高压液相层析(highperformance liquidchromatography,HPLC)两步层析分离纯化其中的AOPP HSA,并经紫外和荧光光谱、SDS PAGE、单核细胞TNFα分泌实验鉴定其结构特征和生物学活性。结果分离的蛋白质纯度达99.4%,分子质量为700×103,是含有双酪氨酸的蛋白交联聚合物,能够显著刺激单核细胞TNFα的分泌。结论采用上述两步层析方法能够由粗纯品中成功分离出高纯度并具生物活性的AOPP HSA,为AOPP的进一步研究奠定了基础。 孙岩 吴雄飞 金锡御关键词:晚期氧化蛋白产物 尿毒症毒素 离子交换 单核细胞