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江苏省农业科学院博士后基金(6510501)
作品数:
2
被引量:23
H指数:2
相关作者:
何孔旺
温立斌
杨汉春
倪艳秀
张雪寒
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相关机构:
中国农业大学
江苏省农业科学院
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发文基金:
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一株新的类猪圆环病毒因子的核苷酸全序列和体外感染性
被引量:3
2008年
在中国猪血清中分离到一新因子,命名为P2.P2为闭合环状基因组,全长993个核苷酸.序列分析表明其与猪圆环病毒密切相关.随后对构建的P2因子分子克隆的体外感染性进行了研究.结果表明,在转染PK-15细胞后,只有P2因子的双拷贝串联分子克隆具有感染性,表现为可在细胞的胞浆和胞核中形成包涵体,胞浆包涵体为圆形或不规则形,直径0.1~0.4gm;胞核包涵体有两种类型,一种为小而圆、直径约0.1μm的包涵体,另一种为大而呈六角性的包涵体,直径约为0.5~1.4μm.胞浆包涵体和胞核包涵体都没有外膜,相比较而言,后者有更高的电子密度.将转染后的细胞连续传代,对第5代细胞培养物抽提DNA,进行PCR,结果也只有在转染P2因子双拷贝串联分子克隆的细胞培养物中检测到P2的DNA.而转染空载体、P2因子单分子克隆和未转染的PK-15细胞微观结构未见变化,在第5代细胞培养物中也未能检测到P2的DNA.同样,只有在转染P2因子双拷贝串联分子克隆的细胞和随后传代的细胞中能检测到P2抗原.这是首次报道如此小基因组的类猪圆环病毒P2的全序列和其在体外具有感染性.
温立斌
何孔旺
杨汉春
倪艳秀
张雪寒
郭容利
潘群兴
关键词:
PK-15细胞
类猪圆环病毒因子P2分子克隆体外的感染性
在中国的猪血清中分离到一新因子,命名为P2.P2为闭合环状基因组,全长993个核苷酸。序列分析表明其与猪圆环病毒密切相关。随后对构建的P2因子分子克隆的体外感染性进行了研究。结果表明,在转染PK-15细胞后,只有P2因子...
温立斌
何孔旺
杨汉春
倪艳秀
张雪寒
郭容利
潘群兴
文献传递
P1因子分子克隆的体外感染性分析
被引量:22
2008年
利用脂质体分别将类猪圆环病毒2型的P1因子的单拷贝分子克隆和双拷贝串联分子克隆转染PK-15细胞,电镜检测可在转染P1因子双拷贝串联分子克隆的PK-15细胞的胞浆和胞核中发现包涵体。相比较而言,胞浆包涵体数量较多,基本呈圆形,直径0.1~0.3 μm;胞核包涵体有2种类型:一种为小而圆的、直径约0.1 μm的高电子密度的小体;一种是大小为0.4~0.8 μm、略呈六角形的包涵体。将转染细胞连续传代5次,通过PCR可在转染P1因子双拷贝串联分子克隆的细胞传代物中检测到P1因子的DNA。这是首次报道P1因子的分子克隆在体外具有感染性,为进一步研究P1因子在体内的生物学意义奠定了物质基础。
温立斌
何孔旺
杨汉春
关键词:
分子克隆
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