辽宁省教育厅高校重点实验室项目(20060806)
- 作品数：17 被引量：105H指数：7
- 相关作者：李玥莹陶思源陆丹牛楠徐昕更多>>
- 相关机构：沈阳师范大学沈阳市中医药学校辽宁省农业科学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高校重点实验室项目公益性行业(农业)科研专项辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- RAPD分子标记技术在甜高粱基因组研究中的应用被引量：3
- 2009年
- [目的]应用RAPD技术对甜高粱丝黑穗病基因进行分子标记研究。[方法]以抗病亲本7050B与感病亲本TX622B杂交后的F2代以及抗病甜高粱品种8113和感病甜高粱品种8101为试材,用CTAB法提取DNA,用RAPD分子标记技术对其DNA进行多态性扩增与初步分析,同时对琼脂糖凝胶电泳检测体系进行优化。[结果]CTAB法适宜提取DNA。在对抗病亲本7050B与感病亲本TX622B杂交后的F2代进行RAPD标记时,用60个引物进行筛选,其中27个引物扩增出了多态性谱带;应用20个具有多态性扩增谱带的引物对抗病甜高粱品种8113和感病甜高粱品种8101进行RAPD分析时,共有7个引物扩增出了差异谱带,分别为S56、S66S、67、S70、S72、S75S、78。[结论]该研究为甜高粱优良品种的培育提供科学基础。
- 李南珠李玥莹
- 关键词：甜高粱丝黑穗病RAPD分子标记
- 高粱基因组DNA提取方法的比较与优化被引量：9
- 2010年
- 目的:比较CTAB法和高盐低pH法提取高粱总DNA效果,进一步优化建立高盐低pH值法提取高粱基因组DNA的方法。方法:采用CTAB法、高盐低pH法对高粱叶片DNA进行提取,并从电泳结果、纯度、得率三方面进行比较研究。通过提取缓冲液中SDS浓度的优化,不同组织器官的DNA提取纯化以及不同沉淀方法的优化,比较不同方法对高粱基因组DNA提取的影响。结果:高盐低pH法DNA平均得率为689.36μg/g,略小于CTAB法的718.26μg/g,但其A260/A230平均值为1.854,比CTAB法的2.164更接近标准要求。高盐低pH法提取高粱基因组DNA的适宜条件确定如下:提取液中含有2%SDS、2%PVP、2%β-巯基乙醇;水浴时间30min;沉淀方法采用0.7体积异丙醇室温沉淀的沉淀方法。结论:综合考虑高盐低pH法是提取高粱基因组DNA的最佳方法。
- 陆丹牛楠李玥莹
- 关键词：高粱CTAB法DNA提取
- 高粱丝黑穗病菌3号生理小种抗性遗传研究及抗病基因分子标记被引量：19
- 2010年
- 【目的】筛选抗丝黑穗病菌3号生理小种基因的分子标记,从而实现实验室内对抗丝黑穗病的选择,免去在育种中对抗丝黑穗病的田间鉴定。【方法】本研究采用SSR技术,应用分离群体分组分析法,分别利用恢复系分离群体(2381R/矮四)和保持系分离群体(Tx622B/7050B),筛选抗丝黑穗病菌3号生理小种基因的分子标记。【结果】试验得出结果如下,高粱对丝黑穗病菌3号生理小种的抗性属于质量性状遗传,抗性表现为显性,只要亲本之一抗病,F1代即表现抗病;发现了2个在抗病品系中稳定出现、可作为高粱抗丝黑穗病菌3号生理小种基因标记应用的SSR标记:Xtxp13和Xtxp145。Xtxp13位于B染色体上,Xtxp145位于I染色体上,与抗病基因的重组率分别为9.6%和10.4%,距离抗病基因的遗传图距分别约为9.6cM和10.4cM。【结论】高粱对丝黑穗病菌3号生理小种的抗性可能受2对彼此独立的非等位基因控制,并且基因之间存在着互作;筛选SSR标记时发现,高粱抗丝黑穗病基因的分子标记较易在保持系群体中找到,在恢复系群体中DNA片段多态性较少,表明恢复系和保持系在抗性机制上可能存在差异。
- 邹剑秋李玥莹朱凯王艳秋
- 关键词：丝黑穗病抗病基因分子标记
- 高粱抗丝黑穗病基因的分子标记RAPD分析被引量：2
- 2009年
- 丝黑穗病是影响我国高粱生产发展的主要病害之一,在高粱产区每年都有发生,发病率有时高达70%,给生产造成很大损失,而选育抗病品种是最为有效的抗病策略。分别以高粱2 381恢复系(抗病)、矮四恢复系(感病)的叶片为试材,采用CTAB法提取高粱基因组DNA,并应用RAPD筛选技术对高粱基因进行分子标记。在最佳的RAPD反应体系中共筛选了100个RAPD随机引物,筛选出来27个适宜引物,获得了稳定的RAPD扩增结果及多态性较好的DNA谱带。其中有6个引物对DNA扩增产生了差异谱带。
- 陆水怡李南珠邹剑秋李玥莹
- 关键词：高粱
- 甜高粱含糖量的意义及其影响因素的初步探讨被引量：7
- 2010年
- 甜高粱是最有发展潜力的能源作物之一,目前,在众多生物质能源作物中,甜高粱以其独具的高含糖量、高生物产量、高乙醇转化率和高抗逆性成为符合我国国情、适合我国国土、气候条件、既产能源又产粮食的理想作物。甜高粱糖分高低是衡量甜高粱茎秆利用价值的主要指标,提高甜高粱的含糖量具有重大意义。就甜高粱的生态价值、能源价值、饲料价值和糖料价值几方面对甜高粱的利用价值进行了分析探讨,展望了甜高粱未来的应用前景;同时探讨了提高甜高粱含糖量的目的以及影响甜高粱含糖量的一些因素。
- 魏鑫李玥莹关尔鑫
- 关键词：甜高粱含糖量影响因素
- 高粱抗丝黑穗病SSR-PCR反应体系的优化
- 2010年
- 目的:找到一种可用于高粱抗丝黑穗病SSR-PCR扩增最适宜的反应体系。方法:利用单因素体系优化的方法,对SSR-PCR反应体系中Taq酶、dNTPs、MgCl2、模板DNA以及引物用量进行了优化,并且用不同引物、不同模板DNA对该优化结果进行验证。结果:实验表明,Taq酶、dNTPs、MgCl2、模板DNA以及引物的不同用量均对PCR反应结果有显著的影响。最适宜高粱抗丝黑穗病20μl SSR-PCR的反应体系为1U/μl Taq酶2.5μl,10mmol/L dNTPs 1.0μl,25mmol/L MgCl21.5μl,模版DNA2.0μl(50ng),10μmol/L引物1.5μl,10×Buffer 2.0μl。验证结果表明,该体系扩增出的条带清晰且稳定。结论:该结果为今后利用SSR-PCR标记技术研究分析高粱抗丝黑穗病奠定了基础。
- 牛楠陆丹李玥莹
- 关键词：高粱
- 甜高粱抗丝黑穗病分子标记的建立被引量：4
- 2008年
- [目的]在甜高粱丝黑穗病基因的分子标记研究上有所进展。[方法]以甜高粱抗丝黑穗病品种LTR102、甜高粱感丝黑穗病品种LTR106为试材,应用SSR技术对甜高粱丝黑穗病基因进行分子标记的初步分析。试验中采用CTAB方法提取甜高粱基因组。[结果]通过比较Taq酶用量的不同,进一步优化了Taq酶的用量。用SSR分子标记技术对其进行多态性扩增,所用的20个SSR引物中有16个引物能扩增出清晰的多态性谱带,完全可应用于甜高粱丝黑穗病抗病基因的初步定位。其中有4个引物扩增出了差异带,引物号为:Xtxp 279、Xtxp284、Xtxp36、Xtxp228。[结论]通过比较体系中各不同因素的影响,进一步优化了SSR反应体系,达到了较理想的检测效果。
- 魏鑫陆水怡庄严李玥莹
- 关键词：甜高粱SSR分子标记丝黑穗病
- 高粱抗丝黑穗病基因的RAPD初步分析被引量：7
- 2007年
- 目的:对高粱抗丝黑穗病的基因进行分析。方法:以高粱2381恢复系(抗病)、矮四恢复系(感病)、7050B保持系(抗病)、TX622B保持系(感病)为材料,采用CTAB提取DNA的方法提取高粱基因组DNA,然后应用RAPD分子标记技术对DNA进行多态性扩增。结果:初步建立了高粱丝黑穗病的RAPD反应体系;从RAPD反应中所用的48个随机引物中筛选出28个适宜引物,其余20个引物没有扩增出谱带,被淘汰;共扩增出114条谱带,其中引物OPM-05300和OPM-13450扩增出了差异谱带,分别命名为OPM-05300和OPM-13450。结论:在该反应体系下找到了高粱抗丝黑穗病抗感品种间基因组差异的两条差异谱带。
- 李玥莹彭霞李鹤陶思源徐昕
- 关键词：高粱丝黑穗病分子标记
- SSR标记技术在植物基因组研究上的应用被引量：8
- 2010年
- SSR也称作微卫星DNA,是一种广泛应用的分子标记技术。SSR具有丰富的多态性,基于这种多态性,可以对植物基因组进行分析筛选;SSR的检测方法快速、技术简便。目前,这项技术已用于多种植物的基因组研究,如基因定位及遗传图谱的建立、数量性状标记、杂种优势的利用等。在一些重要的农作物中,已定为了丰富的SSR位点。随着技术的发展,基于SSR技术的新的标记方法不断出现,如:ISSR、RAMP、REMAP。概述了SSR标记技术的原理和特点;介绍了与实验相关的技术和方法;着重整理了近年来在SSR技术上发展起来的新的标记方法;探讨了SSR在植物基因组研究中的应用。
- 陆丹牛楠李玥莹
- 关键词：SSR基因组研究植物
- RAPD分子标记技术在高粱抗丝黑穗病研究中的初步应用被引量：1
- 2008年
- 实验采用7050B(抗病)与TX622B(感病)杂交的F2感性个体的DNA及高粱丝黑穗病3073(抗病)、3049(感病)为试材.采用CTAB法提取高粱总DNA,用RAPD分子标记技术对其扩增的多态性及差异性图谱进行分析.实验结果如下:通过对电泳电压、电泳时间及点样量的筛选,建立并优化了RAPD-PCR琼脂糖凝胶检测系统;筛选了90个RAPD引物,其中30个引物扩增出清晰的多态性谱带,用这30个引物对3073(抗病)、3049(感病)2种试材进行抗丝黑穗病基因的初步分析,有11个引物扩增出多态性谱带.
- 李玥莹李南珠刘月陶思源徐昕
- 关键词：高粱丝黑穗病RAPD
