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国家自然科学基金(30873031)

作品数:3 被引量:32H指数:1
相关作者:岳文曾泉裴雪涛赵爱华陈琳更多>>
相关机构:军事医学科学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学环境科学与工程更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 1篇环境科学与工...

主题

  • 2篇增殖
  • 2篇细胞
  • 2篇细胞增殖
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇微小RNA
  • 1篇微小RNAS
  • 1篇核表达
  • 1篇PHR
  • 1篇SUPPRE...
  • 1篇APOPTO...
  • 1篇CANCER...
  • 1篇CMV
  • 1篇EGFP
  • 1篇EXPRES...
  • 1篇MIR
  • 1篇PROLIF...
  • 1篇BCL-2

机构

  • 2篇军事医学科学...

作者

  • 2篇裴雪涛
  • 2篇曾泉
  • 2篇岳文
  • 1篇周军年
  • 1篇许英晨
  • 1篇王静雪
  • 1篇袁红丰
  • 1篇谢小燕
  • 1篇陈琳
  • 1篇赵爱华

传媒

  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇军事医学科学...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2010
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
microRNA-7真核表达载体的构建及其对细胞增殖能力的影响被引量:1
2010年
目的构建miR-7真核表达载体,以研究miR-7过表达后对细胞增殖能力的影响。方法以人全血标本基因组为模板,PCR扩增miR-7序列,然后将该序列克隆入pHRS-1cla-CMV-EGFP载体中,构建pHRS-1cla-miR-7-CMV-EGFP慢病毒表达载体。将构建好的载体瞬时转染入293FT细胞中,利用RT-PCR技术对转染前后293FT细胞中miR-7的表达水平进行检测。将pHRS-1cla-miR-7-CMV-EGFP慢病毒表达载体瞬时转染入乳腺癌细胞系MCF-7中,利用CCK-8法以及BrdU增殖实验检测过表达miR-7后细胞增殖能力的变化。结果构建的pHRS-1cla-miR-7-CMV-EGFP慢病毒表达载体质粒酶切和测序鉴定结果正确,实时定量RT-PCR结果表明,与转染pHRS-1cla-CMV-EGFP对照载体细胞相比,转染pHRS-1cla-miR-7-CMV-EGFP慢病毒表达载体72 h后的293FT细胞成功地过表达miR-7达76.8倍。CCK-8法以及BrdU增殖实验检测过表达miR-7后乳腺癌细胞系MCF-7的增殖能力显著性下降(P<0.05)。结论成功构建了pHRS-1cla-miR-7-CMV-EGFP慢病毒表达载体,瞬时转染后细胞可以有效地高表达miR-7,同时证明过表达miR-7可以使细胞的增殖能力受到明显抑制。
许英晨周军年曾泉袁红丰岳文裴雪涛
关键词:微小RNAS细胞增殖
微小RNA miR-125b真核表达载体的构建及其对细胞增殖的影响被引量:1
2010年
目的:构建微小RNA125b(miR-125b)真核表达载体,研究其过表达后对细胞增殖的影响。方法:以pcDNA3.1(-)-myc-his载体为模板,PCR扩增CMV启动子,克隆入pHRS-1cla-EGFP慢病毒载体,构建pHRS-1cla-CMV-EGFP载体;以从人全血中提取的基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-125b序列,将其克隆到pHRS-1cla-CMV-EGFP载体中,构建pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP慢病毒表达载体;将pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP表达载体瞬时转染入293FT细胞,用实时定量PCR技术对miR-125b在转录水平的表达进行检测,用MTT及Brdu法检测miR-125b过表达后对293FT细胞增殖的影响。结果:构建的pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP真核表达载体经质粒酶切和测序鉴定正确,转染细胞后72h经实时定量PCR检测,成熟miR-125b表达上调约750倍(P<0.01),说明其能有效高表达,MTT及Brdu法检测显示细胞增殖受到明显抑制(P<0.01)。结论:构建了pHRS-1cla-miR-125b-CMV-EGFP慢病毒真核表达载体,转染293FT细胞后能高效表达成熟miR-125b,同时证明过表达miR-125b能使细胞的增殖受到非常明显的抑制。
曾泉谢小燕赵爱华王静雪陈琳岳文裴雪涛
关键词:微小RNA真核表达载体细胞增殖
MicroRNA-125b Induces Cancer Cell Apoptosis Through Suppression of Bcl-2 Expression被引量:30
2012年
MicroRNAs (miRNAs) are small, noncoding RNAs which can often act as an oncogene or a tumor suppressor. Several miRNAs are associated with the development of hepatoceUular carcinoma (HCC). We demonstrated that miR-125b significantly suppresses HCC cell proliferation and promotes apoptosis by inhibiting the gene expression of the anti-apoptotic protein, Bcl-2. Bioinformatic analysis indicated that the 3tUTR of Bcl-2 has binding sites for miR-I25b, Luciferase reporter assay confirmed the ability of miR-125b to dramatically suppress Bcl-2 transcription, suggesting that Bcl-2 is a target gene for miR-125b. We concluded that miR-125b acts as a tumor suppressor in hepatic tumor development by targeting Bcl-2 and inducing cancer celt apoptosis.
Aihua ZhaoQuan ZengXiaoyan XieJunnian ZhouWen YueYali LiXuetao Pei
关键词:BCL-2APOPTOSISPROLIFERATION
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