新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金(XJDX0201-2011-05)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：马纪侯晓娟王岩刘小宁李洁琼更多>>
- 相关机构：新疆大学更多>>
- 发文基金：新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 荒漠拟步甲科昆虫总RNA的有效提取及电泳图谱分析被引量：1
- 2013年
- [目的]获得高质量的总RNA是开展分子生物学研究的重要一步,由于不同生物的机体组成成分有较大差异,需要针对不同类型的物种建立各自有效的RNA提取方法。鞘翅目昆虫富含几丁质的外壳,常规方法难以获得高质量的RNA。[方法]以鞘翅目拟步甲科昆虫小胸鳖甲(Microdera punctipennis)为例,采用TRIzol试剂提取分离总RNA,方法略有改进,并对总RNA的电泳谱带特征进行鉴定。[结果]利用该方法从小胸鳖甲成虫中所获得的总RNA纯度较高完整性好,进一步实验证明提取的总RNA可满足RT-PCR等多种后续实验。琼脂糖凝胶电泳分析表明,其总RNA电泳谱带主要以18S带为主,28S则很弱。[结论]该提取方法对其他荒漠拟步甲科昆虫,尤其是含几丁质外壳的甲虫总RNA提取具有指导作用,小胸鳖甲总RAN的电泳谱带与哺乳动物肿瘤细胞的不同。
- 陆雪莹马纪
- 关键词：RNA提取TRIZOL法
- 拟步甲科昆虫不同抗冻蛋白的免疫交叉性分析被引量：2
- 2013年
- 目的利用甲虫小胸鳖甲的抗冻蛋白MpAFP698制备抗血清,分析拟步甲科不同种类昆虫抗冻蛋白的免疫同源性。方法通过DNA疫苗初次免疫-蛋白质加强的策略免疫新西兰大白兔,先以重组质粒pcDNA3-Mpafp698作为DNA疫苗免疫接种2次,再以融合蛋白His-MpAFP698进行蛋白质加强免疫2次。采用ELISA检测MpAFP698抗体的效价,Western blot法检测抗体的特异性及不同昆虫抗冻蛋白与MpAFP698抗体的免疫交叉反应。结果兔抗血清的效价可达1:40万,Western blot结果显示抗血清分别与His-MpAFP698及GST-MpAFP698蛋白有特异性结合,与小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP149、MpAFPS77以及来自不同昆虫的抗冻蛋白ApAPAFP914、OcAFP4有特异性结合。结论荒漠地区不同甲虫的抗冻蛋白具有相同的抗原表位,可以发生免疫交叉反应。
- 李洁琼侯晓娟王岩刘小宁马纪
- 关键词：拟步甲科昆虫抗冻蛋白
