南京市卫生局青年科技人才启动项目(QYK10135)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：许惠娟毕志刚陈文琦张晓荣戴洁更多>>
- 相关机构：南京医科大学江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：南京市卫生局青年科技人才启动项目国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 亚毒性剂量UVB照射和过表达p53对皮肤细胞光致癌相关基因表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨亚毒性剂量的中波紫外线(UVB)照射和过表达p53对人皮肤成纤维细胞(HSF)在光致癌相关基因表达的影响。方法以反复多次的亚毒性剂量UVB照射正常HSF细胞株和已构建成功的p53稳定过表达HSF细胞株,定制实时定量PCR芯片,检测光致癌发生相关基因的表达。结果 UVB照射和过表达p53在促进衰老基因表达方面,UVB照射的作用更为显著;过表达p53使抑凋亡基因bcl-2下调,促凋亡基因bax上调,UVB照射则可加强过表达p53的诱导凋亡作用;过表达p53可下调癌基因HIF-1α,VEGF和hdm2的表达,UVB照射可促进p53的肿瘤抑制作用。结论过表达p53可使p53依赖的细胞凋亡和抑制肿瘤作用明显增强,亚毒性剂量的UVB还可加强这种作用,从而有助于抑制皮肤肿瘤发生。在UVB作用下,过表达p53可能更倾向于诱导凋亡,而非衰老。
- 陈文琦毕志刚许惠娟
- 关键词：P53UVB人皮肤成纤维细胞
- RNA干扰p53基因表达对人皮肤成纤维细胞衰老的影响被引量：3
- 2012年
- 目的建立抑制p53基因表达的人皮肤成纤维细胞（HSF），探讨抑制p53表达对HSF衰老的影响。方法脂质体转染法将针对p53的shRNA的真核表达质粒pGCsi—p53导入HSF中，经G418筛选抗性克隆，扩大培养，建立稳定转染克隆细胞系。用RT—PCR、实时荧光定量PCR和蛋白印迹法分析目的基因及其蛋白表达。通过SA β—gal染色法检测细胞衰老，MTT法检测细胞增殖能力。结果成功建立RNA干扰抑制p53表达的HSF细胞系，转染细胞中p53基因及蛋白水平明显下调（P〈0．01）。sAB—gal染色结果显示，转染组衰老细胞百分比（13．47％±1．01％）与对照组（18．10％±0．66％）相比降低（P〈0．05），MTF检测结果显示，转染组细胞增殖能力较对照组加快（P〈0．05）。结论抑制p53表达能够延迟HSF的衰老，促进细胞增殖。
- 陈文琦许惠娟毕志刚
- 关键词：成纤维细胞细胞衰老基因P53RNA干扰
- RNA干扰p53基因对中波紫外线诱导的早衰和光致癌相关基因表达的影响
- 2014年
- 目的探讨RNA干扰p53基因对中波紫外线（UVB）诱导的人皮肤成纤维细胞（HSF）早衰和光致癌相关基因表达的影响。方法利用已构建成功的RNA干扰抑制p53表达的HSF细胞系，加以反复多次亚毒性剂量UVB照射，衰老相关的B半乳糖苷酶（SAβ-gal）染色法检测细胞衰老，定制实时定量PCR芯片，检测多种光致癌发生相关基因的表达，包括：参与细胞衰老通路的p53、p21、p19、p16、pRb，衰老相关基因纤维结合素（FN）、骨结合素（ON）、平滑肌22（SM22），p53依赖的细胞凋亡相关基因hax和bcl-2，UVB诱导的癌基因缺氧诱导因子1a（HIF-1a）、血管内皮生长因子（VEGF）以及负性调控p53的人双微球蛋白2基因（hdm2）。使用SPSS10．0软件对各组间数据进行配对t检验。结果抑制p53表达的HSF经UVB照射后SA β-gal活性（19．70％±0．85％）较照射前（12．77％±0．81％）有所增加（t=6．45，P〈0．05），但显著低于正常HSF经UVB照射后（50．48％±5．30％，t=7．86，P〈0．05），与正常HSF组（18．50％±0．45％）差异无统计学意义（t=2．57，P〉0．05）。基因检测结果表明，抑制p53表达可抑制衰老基因p21、p19、FN、ON、SM22等的表达，但p16通路并不受之影响，在UVB作用下，p16、pRb的表达显著增加，分别上调。抑制p53的表达可使抑凋亡基因bcl-2上调及促凋亡基因bax下调，癌基因HIF-1a、VEGF、hdm2表达明显增加。UVB照射对这些基因表达改变无明显影响。结论抑制p53表达能够延缓UVB诱导的早衰。UVB诱导的早衰具有p53依赖的相关肿瘤抑制作用。
- 陈文琦毕志刚戴洁张晓荣许惠娟
- 关键词：基因RNA干扰紫外线
