广东省自然科学基金(04011397)
- 作品数：10 被引量：26H指数：4
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- 培养的人癌细胞株(系)pot1基因exon12突变筛选
- 2006年
- 目的对培养的人癌细胞株(系)中pot1(protectionoftelomeres1)基因exon12进行突变筛选。方法从27株培养的人癌细胞株(系)提取染色体组DNA,用PCR方法扩增hpot1基因exon12,PCR产物纯化后直接测序,测序结果与GenBank和NCBI数据库中pot1基因的数据比较,对培养的人癌细胞株(系)中hpot1基因exon12进行突变分析。结果测序结果显示,人宫颈癌Hela细胞株和人卵巢癌细胞株(高转移)HO8910-PM等5个来源于女性生殖系统癌细胞株中的4个,在hpot1基因exon12区有相同的置换突变(G17722→C),为错义突变,对应于cDNA的G1385→C,多肽链的Leu454→Phe;而其余23个不同来源的癌细胞株(系)均无突变。结论提示hpot1基因exon12(17722碱基)是突变热点区,并且这种突变可能具有女性生殖系统肿瘤特异性。
- 侯敢黄迪南姜英华
- 关键词：人癌细胞株DNA序列分析基因突变
- 人端粒保护蛋白1(hPOT1)研究进展被引量：1
- 2006年
- 随着对端粒、端粒酶研究的深入,一类被称为端粒结合蛋白的核蛋白越来越受到重视。人端粒保护蛋白1(human protection of telomeres 1,hPOT1)及其基因在2001年被鉴定,它是一种单链端粒结合蛋白,有两大功能相关结构域:OB fold(oligonucleotide/oligosaccharide binding fold)和TRF1(TTAGGG repeatbinding factor 1)相互作用蛋白结构域。它与端粒DNA的结合具有高度特异性和对单链端粒DNA游离3′末端结合位点的优先性。hPOT1蛋白可能具有多种重要的功能。目前有关hPOT1蛋白的研究越来越多,现就hPOT1的生物学性质作一综述。
- 梁爱玲黄迪南侯敢
- 关键词：端粒结合蛋白端粒保护蛋白HPOT1端粒端粒酶
- 蛋白质组学在肿瘤研究中的应用
- 2008年
- 蛋白质组学是研究细胞、组织和器官内所有蛋白质的组成及其动态变化的科学,是在蛋白质水平上定量、动态、整体地研究生物体,并建立完整的蛋白质文库。应用蛋白质组学技术分离鉴定肿瘤细胞与常起源细胞之间的差异表达蛋白,可为寻找肿瘤的特异标志物,揭示肿瘤的发病机制,研究肿瘤转移、耐药机制及肿瘤治疗等提供更多的研究思路和理论依据。
- 周勇军侯敢黄迪南陈书勇
- 关键词：蛋白质组学肿瘤差异表达蛋白
- 一氧化氮供体硝普钠对海马神经元cpp32基因表达的影响(英文)
- 2006年
- 背景:阿尔茨海默病是一种老年神经系统退行性疾病,神经元凋亡被认为是其可能的发病原因之一,体外细胞培养是研究其凋亡机制的常用方法。目的:观察一氧化氮供体硝普钠对体外培养的海马神经元cpp32基因表达的影响。设计:随机对照动物实验。单位:广东医学院生物化学与分子生物学研究所。材料:实验在广东医学院生物化学与分子生物学研究所完成,实验动物为新生(出生24h以内)SD大鼠。方法:取大鼠海马神经元进行原代培养,采用终浓度分别为0,25,50,100,200,400μmol/L的硝普钠处理海马神经元24h,用反转录聚合酶链反应检测mRNA表达变化,Westernblot检测蛋白表达的变化;再用终浓度分别为0,25,50,100,200μmol/L的硝普钠处理海马神经元12h,用CPP32活性检测试剂盒检测CPP32酶活性。主要观察指标:cpp32mRNA表达、CPP32蛋白表达及CPP32酶活性检测。结果:随着硝普钠剂量的增加,cpp32mRNA表达无改变;但CPP32酶原被裂解活化,从硝普钠50μmol/L开始,酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100μmol/L达最大值,为对照组的3.47倍。结论:硝普钠不增加cpp32mRNA的表达,但可诱导CPP32酶原的裂解,使CPP32活化。
- 刘勇军张海风祝其锋梁爱玲
- 关键词：硝普钠海马神经元基因表达
- 人pot1基因cDNA的克隆及其在HeLa细胞中的表达
- 2005年
- 目的:克隆人端粒保护蛋白(hum an protection of telom eres 1,p ot1)基因cDNA全编码区,构建成真核表达质粒并实现在H eL a细胞中的表达。方法:RT-PCR法扩增出H eL a细胞hp ot1基因cDNA编码区全序列,定向克隆至真核表达载体pcDNA 3,阳性重组质粒经插入片段测序验证;重组的pcDNA 3-hp ot1质粒瞬时转染H eL a细胞,RT-PCR和EM SA法(电泳迁移率改变分析)检测hp ot1基因的表达水平。结果:来自H ela细胞的hp ot1基因cDNA编码区全序列构建成的真核表达质粒pcDNA 3-hp ot1,经测序分析序列和ORF正确;该重组质粒转染在H eL a细胞48h后,hp ot1基因表达水平增高。结论:真核表达载体pcDNA 3-hp ot1构建成功,并实现了hp ot1在H ela细胞中的表达。
- 姜英华黄迪南祝其锋
- 关键词：克隆
- 两种双壳贝提取物抗疲劳作用比较被引量：7
- 2006年
- 目的:通过观察扇贝提取物与翡翠贻贝提取物喂养的实验小鼠的负重游泳时间、血尿素氮水平和肝糖原含量,比较两种贝类提取物对小鼠的抗疲劳作用。方法:实验于2005-02/06在广东医学院实验动物中心和生物化学与分子生物学研究所完成。①选用SPF级昆明种雄性小鼠240只。实验用扇贝和翡翠贻贝均为市售,两种贝类经提取,过柱,浓缩及干燥得到浅黄色粉末。两种提取物经急性毒性实验证明安全无毒。②小鼠负重游泳试验:选用小鼠80只,随机分为2组:扇贝提取物组和翡翠贻贝提取物组,每组40只;每个处理组再随机分为4个亚组:10,20和40g/L扇贝提取物和翡翠贻贝提取物组(分别给予10,20和40g/L扇贝提取物和翡翠贻贝提取物水溶液自由喂养),对照组用白开水作为饮水自由喂养。喂养30d后,鼠尾根部负荷5%体质量的铅丝,置小鼠在游泳池中游泳,水温(25±1)℃。记录小鼠自游泳开始至沉入水中的时间,作为小鼠负重游泳时间。③小鼠血尿素测定:动物分组同前,处死小鼠后,采用二乙酰一肟显色法测定小鼠血尿素水平。④小鼠肝糖原测定:动物分组同前,处死小鼠后,采用氧化酶法测定小鼠肝糖原含量。⑤计量资料差异比较采用t检验,方差不齐时采用t’检验。结果:小鼠240只均进入结果分析。①扇贝提取物20和40g/L组小鼠负重游泳时间明显长于对照组(P<0.05,0.01)。翡翠贻贝提取物20和40g/L组小鼠负重游泳时间明显长于对照组(P<0.05,0.01)。扇贝提取物40g/L组小鼠负重游泳时间明显长于翡翠贻贝提取物40g/L组(P<0.05)。②扇贝提取物40g/L组和翡翠贻贝提取物20g/L组小鼠血尿素氮水平明显低于对照组(P<0.05)。扇贝提取物40g/L组小鼠血尿素氮水平明显低于翡翠贻贝提取物40g/L组(P<0.05)。③20和40g/L扇贝取物及翡翠贻贝提取物组小鼠肝糖原含量明显高于对照组(P<0.05)。同样质量浓度的扇贝提取�
- 刘勇军李江滨黄迪南侯敢
- 关键词：中药学贝类生物化学
- 亲水作用液相层析及其在蛋白质组学中的应用被引量：4
- 2009年
- 亲水作用液相层析(HILIC)是一种分离全细胞溶解产物的新型层析技术。在蛋白质组学中,利用HILIC可以降低全细胞溶解产物分离的复杂性,便于待测物的质谱(MS)技术分析鉴定。本文介绍了HILIC的原理和影响HILIC效果的因素,简要概述了HILIC在分离混合肽、磷酸化蛋白、糖基化蛋白等中的应用,并对HILIC的未来发展进行了展望。
- 姜洪宁黄迪南侯敢
- 关键词：HILIC磷酸化糖基化
