内蒙古自治区自然科学基金(200408020412)
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
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- 乳酸脱氢酶-C4基因mRNA在绵羊睾丸和附睾中的表达研究被引量:2
- 2006年
- 实验检测3乳酸脱氢酶-C4基因mRNA在绵羊睾丸和附睾中的表达情况。提取绵羊睾丸组织、附睾头、体、尾部组织总RNA,以此为模板,逆转录合成cDNA,自行设计引物,PCR扩增出347bp的目的DNA。然后,将目的片段克隆入T载体,通过菌液PCR和重组质粒酶切,鉴定重组质粒中的目的DNA。再经序列分析鉴定目的片段。同时,以β-actin为内参照物,进行RT-PCR半定量分析,比较在睾丸、附睾头、体、尾部组织中的表达量。结果表明:乳酸脱氢酶-C4在绵羊睾丸中表达量最多,尾部中表达不明显。
- 娜仁花旭日干
- 关键词:RT-PCRMRNA表达绵羊
- 绵羊精子膜蛋白PH-20 mRNA在睾丸和附睾中表达的分析被引量:1
- 2006年
- 提取绵羊睾丸总RNA,并以此为模板,采用RT-PCR技术扩增出精子表面特异性蛋白PH-20的cDNA。应用T/A克隆策略,将扩增的PH-20基因克隆入T载体,通过酶切和测序进行鉴定,结果表明,PH-20 mRNA在绵羊睾丸和附睾中均有表达。
- 娜仁花旭日干
- 关键词:精子膜蛋白PH-20绵羊
- 精子受精抗原-1(FA-1) mRNA在绵羊睾丸和附睾中的表达被引量:2
- 2006年
- 本研究通过RT-PCR检测了该基因在绵羊睾丸和附睾中的表达情况。首先,提取绵羊睾丸组织、附睾头、体、尾部组织总RNA,以此为模板,反转录合成cDNA,自行设计引物,PCR扩增出462 bp的目的DNA。然后,将目的片断克隆入T载体,通过菌液PCR和重组质粒酶切,鉴定重组质粒中的目的DNA。再经序列分析鉴定目的片断。同时,以β-actin为内参照物,进行RT-PCR半定量分析,比较精子受精抗原(FA-1)在睾丸、附睾头、体、尾组织中的表达量。结果表明,FA-1在绵羊睾丸和附睾中均表达。
- 娜仁花旭日干
- 关键词:RT-PCRMRNA表达
- 绵羊fertilin β基因编码区的钓取与结构分析被引量:4
- 2007年
- Fertilin β与精卵的结合和融合有密切关系。为探讨fertilin β蛋白在绵羊受精过程中的作用机理,采用RACE技术,首次钓取了该基因的编码区。结果绵羊fertilin β基因的编码区cDNA全长为2,217bp。同源性分析显示,绵羊的fertilin β氨基酸序列与牛、猪和人的fertilin β具有79.4%、66.7%和58.1%的同源性。系统发育分析表明,绵羊fertilin β与牛属于同一分支,并且也显示了绵羊和牛分类地位最近,这和传统的分类一致。Fertilin β蛋白结构域分析显示,绵羊fertilin β去整合素识别序列为TDE,与牛的序列相同。除了上述三肽序列外,紧随X-D/E-E的ECD保守序列,从而形成了X-D/E-ECD五肽保守序列,在绵羊fertilin β中该五肽序列为TDECE。
- 娜仁花旭日干
- 关键词:绵羊RACE技术系统发育
- 受精素β基因mRNA在绵羊睾丸组织中的表达
- 2007年
- 利用RT-PCR法和原位杂交技术,研究受精素βmRNA在睾丸和附睾中的表达特征。结果显示,受精素βmRNA只有在睾丸组织中表达,并且主要分布在精细管上皮圆形精细胞中,而附睾不同部位均无表达。上述结果表明,受精素βmRNA是睾丸特异性表达的精子膜蛋白。
- 娜仁花旭日干
- 关键词:原位杂交绵羊