黑龙江省科技计划项目(GB06B303)
- 作品数：5 被引量：50H指数：3
- 相关作者：姜静刘桂丰杨传平王玉成徐晨曦更多>>
- 相关机构：东北林业大学黑龙江农垦职业学院辽宁中医药大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技计划项目国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 二色补血草海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因的克隆及分析被引量：2
- 2008年
- 以二色补血草叶片组织为材料构建了cDNA文库,文库的初始滴度为2.0×106pfu,重组率为95%,平均插入片段为0.8 kb,扩增后文库的滴度为4.0×109pfu.mL-1。通过随机测序从文库中获得的海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(trehalose-6-phosphate phosphatase,TPP)基因的全长cDNA序列,该序列长1 986 bp,其中5’非翻译区163 bp,3’非翻译区680 bp,开放读码框长1 143 bp,编码380个氨基酸,蛋白分子质量为42KD,理论等电点为6.68。海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶在海藻糖合成过程中起关键作用,该基因的克隆为研究海藻糖在二色补血草中的合成奠定了基础。
- 马辉刘桂丰徐晨曦王玉成杨传平
- 关键词：二色补血草CDNA文库
- 柽柳泛素结合酶基因(E2s)的序列分析及功能验证被引量：23
- 2007年
- 从柽柳(Tamarix androssowii)cDNA文库中测序得到一条长度为607bp、编码146个氨基酸的全长cDNA基因序列,对该基因序列进行生物信息学分析,确定其属于泛素结合酶(Ubiquitin conjugating enzyme,E2s)蛋白家族。采用根癌农杆菌介导法对烟草进行E2s基因的遗传转化,通过分子检测证明,该基因整合到烟草基因组中,并在mRNA水平上有不同程度的表达。对各转基因及非转基因对照烟草进行干旱胁迫处理,通过调查相对电导率和相对生长量的变化,研究E2s基因抗旱方面的功能。结果表明,在非干旱胁迫条件下,各转基因株系与对照烟草的相对电导率差异不明显,各株系的相对电导率随着干旱胁迫时间的延长均呈上升趋势,且均小于对照烟草;干旱胁迫20d时,各转基因株系的相对电导率平均为9.12%,非转基因烟草的相对电导率则为12.35%,并且非转基因烟草的相对生长量仅为45.4%,而各转基因株系的相对生长量平均为141.1%,说明E2s基因的导入提高了转基因烟草的耐旱性。
- 徐晨曦姜静刘甜甜王玉成刘桂丰杨传平
- 关键词：柽柳生物信息学转基因抗旱
- 山新杨转eIF1A基因及耐盐性分析被引量：3
- 2010年
- 将从柽柳cDNA文库中分离的eIF1A基因采用农杆菌介导法进行山新杨的遗传转化。经PCR及Northern检测,证明了该基因已经整合到山新杨基因组中,并且能够在转录水平上得到表达。盐胁迫处理表明:盐胁迫处理7 d后,转基因山新杨净光合速率(Pn)、气孔导度平均值(Gs)分别为对照的1.33、1.27倍。光化学猝灭系数(qp)、PSⅡ电子传递量子产率(ΦPSⅡ)的平均值是对照株系的1.49、1.10倍。胁迫处理15 d后,转基因株系与非转基因株系相比,所受的盐害较小,而高生长均高于对照株系,其平均值是对照的1.26倍。这些指标的变化均证实eIF1A基因的表达能够提高转基因山新杨抵抗盐胁迫的能力。
- 李健王有菊姜静刘桂丰王雷杨连和
- 关键词：山新杨转基因耐盐性
- 小黑杨花药培养植株转化胆碱氧化酶基因提高耐盐性被引量：9
- 2008年
- 以小黑杨(Populus simonii×P.nigra)花药培养植株无菌苗叶片为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobac teriumtumefaciens)介导法将胆碱氧化酶基因(codA)导入小黑杨中,共获得4株转化株系,PCR扩增和Southern杂交检测结果全部呈阳性,表明codA基因已整合到小黑杨花药培养植株基因组中。荧光定量RT-PCR检测证明,codA基因在小黑杨花药培养植株中获得表达。耐盐实验结果显示,各转基因株系在0.6%的NaCl浓度下能够生长,而非转基因对照小黑杨受盐害严重,说明codA基因的导入提高了转基因植株的耐盐性。
- 姜静王雷詹立平王玉成刘桂丰杨传平
- 关键词：小黑杨耐盐性
- 抗生素对根癌农杆菌的抑菌作用及对新西伯利亚黑杨组培叶片再生的影响被引量：13
- 2009年
- 以新西伯利亚黑杨(Populus nigra×Populus pyramidalis)为试材,探讨了不同质量浓度的头孢霉素、羧苄青霉素、头孢曲松钠和头孢唑啉钠对叶片不定芽分化的影响,并利用4种不同质量浓度的抗生素对农杆菌EHA105的抑菌效果进行了分析,确立了由农杆菌介导的新西伯利亚黑杨遗传转化中最佳抑菌抗生素是头孢霉素和羧苄青霉素,抑菌的适宜质量浓度为300～400mg·mL-1。此外还研究了不同质量浓度的G418、卡那霉素和新霉素对新西伯利亚黑杨叶片不定芽分化及组培苗生根的影响,确定了各阶段筛选转化体的G418、卡那霉素和新霉素的适宜质量浓度,即叶片转化筛选培养时,G418质量浓度为3～4mg·mL-1、卡那霉素质量浓度为30～40mg·mL-1、新霉素质量浓度60～80mg·mL-1;在抗性芽生根培养时,G418质量浓度为3～4mg·mL-1、卡那霉素质量浓度为20～30mg·mL-1、新霉素质量浓度60～80mg·mL-1。
- 王成王义军李慧玉姜静
