天津市应用基础与前沿技术研究计划(08JCYBJC27100)
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
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- 相关机构：天津市第三医院天津医科大学弗吉尼亚大学更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂肪源干细胞的特性及其在骨科组织修复中的应用
- 2010年
- 黄德清冯燕茹
- 关键词：脂肪源干细胞骨科间充质干细胞成体干细胞CELLS干细胞数量
- SD大鼠脂肪源间充质干细胞分离培养特性及影响因素被引量：9
- 2011年
- 背景:脂肪源间充质干细胞因为容易大量获得、抽取后残留于供区的脂肪组织仍可扩增、供区的损伤小等优点,成为干细胞生物工程研究的理想种子细胞来源。但是,脂肪源间充质干细胞分离培养有较大困难。目的:探索脂肪源间充质干细胞的分离培养方法及其生长特性。方法:分别取4周龄和10月龄不同性别的SD大鼠腹股沟、肩部和腹腔脂肪组织,经细胞培养液洗涤、离心后接种于细胞培养瓶,放置体积分数5%CO2孵箱中培养,分别于24,48,72h后换液。待细胞密度达到约80%时,用0.25%胰酶-EDTA消化,传代培养。分析SD大鼠的年龄、性别、采集脂肪组织的部位、胶原酶Ⅰ的浓度和消化时间,以及原代细胞的首次换液时间等对脂肪源间充质干细胞培养的影响。结果与结论:原代脂肪源间充质干细胞呈梭形或多角形。随着传代和培养时间的延长,脂肪源间充质干细胞由多边形、成巢分布,逐渐连接成片,伸展为梭形或多角形。培养48h后,含脂滴的细胞数量逐渐增多,但仍有90%的脂肪源间充质干细胞始终不表现向脂肪细胞自发分化的趋势。4周龄雌性SD大鼠腹腔脂肪组织在一定条件下传代培养最佳。提示,从SD大鼠腹腔脂肪组织中分离的脂肪源间充质干细胞可在体外稳定传代,SD大鼠的年龄、性别、采集脂肪组织的部位、胶原酶Ⅰ的浓度和消化时间,以及原代细胞的首次换液时间等均影响脂肪源间充质干细胞的分离培养效果。
- 侯凯李梅杨逸昆李纯李金茹黄德清
- 关键词：脂肪源间充质干细胞细胞来源生物工程
- 活体生物发光成像追踪大鼠跟腱内移植干细胞被引量：4
- 2013年
- 背景:移植脂肪源干细胞在活体内的归巢、迁移、增殖和分化的机制仍未得到充分阐明。活体生物发光活体成像技术是近来发展起来的一种可以直接检测活细胞在动物体内生物学行为的新的技术方法。目的:探讨用活体生物发光成像技术检测大鼠跟腱内移植的经荧光基因修饰的脂肪源干细胞可行性。方法:分离培养大鼠腹腔来源的脂肪源干细胞,用浓度为3×1010L-1携带虫荧光素酶的腺病毒载体对其进行转染,观察转染对脂肪源干细胞的影响;将转染的脂肪源干细胞移植到大鼠跟腱缺损处,移植后1,4,7,14d用活体生物发光成像技术检测移植脂肪源干细胞荧光素酶的表达,移植后28d跟腱标本冰冻切片在荧光显微镜下观察。结果与结论:在体外,腺病毒转染对脂肪源干细胞的生长和增殖无明显影响(P>0.05)。细胞移植后1,4,7,14d,活体生物发光成像技术在实验侧修复段跟腱检测到的荧光表达强度分别为(1.22±0.43)×106、(1.81±0.76)×106、(1.88±0.69)×106和(0.89±0.26)×105光子/s(n=6)。而对照侧跟腱修复段未检测到荧光表达;移植后28d,实验侧跟腱冰冻切片在荧光显微镜下见到大量表达荧光的细胞。表明活体生物发光成像技术可成功追踪大鼠跟腱内移植的经荧光基因修饰的脂肪源干细胞。脂肪源干细胞有望成为肌腱组织工程的种子细胞。
- 黄德清Gary Balian
- 关键词：干细胞脂肪源干细胞细胞转染生物发光
- 体外诱导大鼠脂肪源间充质干细胞成肌腱潜能的研究被引量：6
- 2011年
- 目的体外诱导脂肪源间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,AT-MSCs)成肌腱细胞,为临床肌腱损伤的修复提供理论基础。方法从SD大鼠腹腔脂肪组织中分离出脂肪源间充质干细胞,经生长分化因子-5(growth differentiation factor 5,GDF-5)诱导,使其向肌腱细胞分化。应用形态观察和RT-PCR等方法,从形态和分子水平上对诱导分化的细胞进行鉴定。结果从SD大鼠腹腔脂肪组织中分离出的AT-MSCs呈散在分布,排列不规则,以星形和多角形细胞为主,能稳定增殖传代。经5、10 ng/mL GDF-5诱导8 d后,大部分细胞呈梭形。RT-PCR结果显示经GDF-5诱导的细胞,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达明显高于未经诱导的对照组;GDF-5诱导的细胞Bcl-2/Bax均高于对照组。结论从脂肪组织中可以获得具有多向分化能力的AT-MSCs,并能在体外稳定传代。经GDF-5诱导后,AT-MSCs有向肌腱细胞分化的倾向。GDF-5在一定时间内对细胞凋亡有抑制作用,有利于AT-MSCs向肌腱细胞的分化。AT-MSCs有可能替代骨髓间充质干细胞作为组织工程学的种子细胞,用于肌腱损伤的修复。
- 侯凯李梅李金茹杨逸昆李纯王文秀黄德清
- 关键词：脂肪源间充质干细胞肌腱细胞生长分化因子-5
- 肌腱组织工程和基因转染被引量：2
- 2009年
- 骨髓源间充质干细胞是肌腱组织工程最为常用的种子细胞。脂肪源干细胞具备相似的多分化潜能,有望成为肌腱组织工程的种子细胞。纳米纤维材料可以模拟细胞外基质的结构和功能,作为肌腱组织工程的支架有明显的优越性。基因转染技术可克服外源性细胞因子在肌腱修复处作用短暂的不足。肌腱组织工程及基因转染的前景令人鼓舞,但仍面临诸多挑战,需进一步研究。
- 黄德清冯燕茹
- 关键词：肌腱损伤间充质细胞基因治疗
- 生物支架与合成支架在肌腱和韧带修复中的应用
- 2011年
- 肌腱或韧带缺损不能直接修复时,往往需要行自体或异体移植.然而,自体移植供区有限,伴有供区并发症,异体移植存在排异反应和传播疾病的可能.为此,不少学者尝试用生物或合成支架材料修复肌腱或韧带缺损,并取得了一定的成绩[1-3].本文就各种支架材料在肌腱和韧带修复中的应用做一综述.
- 黄德清
- 关键词：指动脉
