江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(2010WSN-56)
- 作品数：11 被引量：33H指数：3
- 相关作者：顾民韩志坚陶俊王子杰黄正楷更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院南京医科大学宁波市第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省卫生厅面上基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肾移植术后抗体介导排斥反应模型的构建与鉴定
- 2019年
- 目的:构建并鉴定一种肾移植术后抗体介导排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR)的动物模型。方法:AMR动物模型采用Wistar大鼠作为供体,SD大鼠作为受体。将Wistar大鼠背部皮肤移植至SD大鼠背部,构建同种异体大鼠皮肤移植模型,分别在皮肤移植后1、3、7、10、14、21、28、35 d取大鼠血清,采用流式细胞术检测供者特异性抗体(donor specific antibodie,DSA)。在DSA最高时将供体肾脏移植至受体,构建同种异体大鼠肾移植AMR动物模型。分别于肾移植术后1～5 d收取移植肾及血清标本,行常规病理染色、C4d免疫荧光染色,以及血清DSA检测。结果:大鼠受体的血清DSA在皮肤移植术后第14天达到最高。相较于各对照组,AMR组大鼠移植肾出现显著的管周毛细血管炎和肾小球炎,免疫荧光示管周毛细血管C4d沉积显著增多,血清DSA显著升高(P <0.05),管周毛细血管炎、肾小球炎、C4d评分显著增高(P <0.05)。结论:成功构建并鉴定一种同种异体肾移植术后AMR的动物模型。该模型操作简便易行,稳定性和性价比较高,具有较高的推广价值。
- 程宏周嘉俊王子杰张恒诚郑明韩志坚陶俊居小兵王增军谭若芸顾民
- 关键词：动物模型肾移植
- 新型抗风湿病药物降低肾移植受者群体反应性抗体水平的回顾性研究
- 2020年
- 目的:观察新型抗风湿病药物艾拉莫德降低肾移植受者群体反应性抗体(PRA)水平的有效性和安全性。方法:回顾性分析35例因PRA阳性服用艾拉莫德的肾移植受者临床资料,观察治疗前后的PRA水平变化以及用药不良反应情况。结果:35例中4例因肺部感染停药未达随访时间,2例观察期间自行停药,3例失访,共纳入26例受者。服用艾拉莫德至9个月时复查PRA,207个位点中有71.5%呈下降趋势,其中107个Ⅰ类位点中有69.9%、41个Ⅱ类位点中有75.9%呈下降趋势,治疗前后肾功能及免疫指标变化差异无统计学意义。血常规、肝功能、血脂、空腹血糖等指标变化无统计学意义。无其他不良反应。结论:艾拉莫德可有效降低肾移植受者PRA水平,不良反应少,安全性高。
- 陈浩顾民黄正楷冯登元孙黎王子杰费爽陶俊谭若芸居小兵韩志坚
- 关键词：肾移植群体反应性抗体排斥反应
- 肾移植受者骨密度评估及影响因素分析被引量：1
- 2020年
- 目的:评估肾移植受者骨密度,分析影响因素,为肾移植术后骨质疏松防治提出方向。方法:回顾性分析南京医科大学第一附属医院2017年1月至2019年5月收治的254例肾移植受者,年龄(40.5±9.8)岁,男性168例、绝经期女性15例。应用双能X线吸收测定法(DEXA)检测右股骨颈及腰椎骨密度,评估骨质疏松发生率,分析影响因素。结果:254例受者骨量减少/骨质疏松在右股骨颈的发生率为20.1%和2.8%,在腰椎的发生率为26.1%和3.6%。卡方检验示术后时间较长、高龄、绝经受者右股骨颈及腰椎骨量丢失发生率更高(P<0.05)。线性回归分析示右股骨颈骨密度与身体质量指数(BMI)、胆固醇、甘油三酯、术前甲状旁腺切除术史呈正相关,与急性排斥、绝经女性呈负相关;腰椎骨密度与BMI、胆固醇、术前甲状旁腺切除术史呈正相关,与甲状旁腺激素(PTH)呈负相关(P<0.05)。结论:肾移植受者骨量丢失发生率较高。监测骨密度,控制甲状旁腺亢进、维持良好营养状态、减少糖皮质激素用量等,对防治骨量丢失有积极作用。
- 孙黎韩志坚居小兵陶俊陈浩黄正楷王子杰费爽顾民谭若芸
- 关键词：肾移植骨密度骨质疏松骨量减少
- 四联低剂量免疫抑制方案在肾移植术后早期应用研究被引量：2
- 2020年
- 目的:观察肾移植术后早期(3个月内)转换成含西罗莫司的四联低剂量免疫抑制剂维持方案的有效性及安全性。方法:回顾性分析于2013年1月至2018年12月在南京医科大学第一附属医院行肾移植术,并在术后早期由三联免疫抑制剂方案转换为含西罗莫司在内的四联免疫抑制方案61例,对换方案前后受者的肾功能、肝功能、血脂、尿蛋白及不良反应等指标进行统计分析。结果:换方案后随访1年,受者血肌酐及尿素氮水平呈进行性下降(P<0.05);血红蛋白及血小板计数较转换前升高(P<0.05);血清胆固醇、甘油三脂、丙氨酸转氨酶转氨酶、天冬氨酸转氨酶、血钾及血钙水平较转换前有差异(P<0.05),以上差异均有统计学意义;而外周血白细胞计数及血钠水平在转换前后差异无统计学意义(P>0.05);换方案前后受者尿蛋白阴性比率有变化(转换前为44.26%,转换1年后为81.97%)。此外,换方案后随访1年内受者不良反应的发生率分别为:肺部感染24.59%,BK病毒(BKV)感染4.92%,移植肾动脉狭窄3.28%,急性排斥反应6.56%。结论:在受者肾移植术后早期转换为含西罗莫司的四联低剂量免疫抑制方案可有效改善移植肾功能,且未增加不良反应的发生风险。
- 费爽王子杰陈浩孙黎陶俊韩志坚谭若芸顾民居小兵
- 关键词：肾移植免疫抑制剂低剂量
- 硼替佐米通过下调smad泛素化调节因子2拮抗TNF-α诱导的肾小管上皮细胞表型转分化被引量：2
- 2018年
- 目的 通过观察硼替佐米（Bortezomib）对人肾小管上皮细胞（HK-2）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的smad泛素化调节因子2（Smurf2）表达及肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化（EMT）的影响,探讨硼替佐米拮抗HK-2细胞EMT的分子机制.方法 以HK-2细胞为对象,将细胞分为对照组、TNF-α组、硼替佐米组及实验组（经硼替佐米和TNF-α共培养）,先在倒置显微镜下观察各组细胞的形态,然后采用实时荧光定量PCR（real-time PCR,RT-PCR）和蛋白质免疫印记（Western blot）检测各组细胞纤连蛋白（FN）、Smurf2、上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）及α平滑肌蛋白（α-SMA） 的表达.结果 与TNF-α处理组相比,加入硼替佐米干预后,细胞形态仍呈鹅卵石样;但硼替佐米单独处理组与对照组相比,细胞形态并没有发生明显变化.与对照组相比,TNF-α组细胞中FN的mRNA和蛋白表达水平明显增高,差异有统计学意义（P＜0.05）;与TNF-α组相比,加入硼替佐米共刺激可抑制TNF-d诱导的FN mRNA和蛋白水平增高（P＜0.05）;而硼替佐米单独处理组与对照组相比,FN的表达差异没有统计学意义（P＞0.05）.与对照组相比,TNF-α处理后可致HK-2细胞中E-cadherin明显降低,α-SMA明显增高（P＜0.05）;与TNF-α组相比,加入硼替佐米共刺激后,可逆转TNF-α介导的E-cadherin和α-SMA表达变化（P＜0.05）;而硼替佐米单独处理组与对照组相比,Ecadherin和α-SMA的表达没有明显变化（P＞0.05）.与对照组相比,TNF-α处理可引起Smurf2mRNA和蛋白表达水平明显增高（P＜0.05）;加入硼替佐米后则可抑制TNF-α诱导的Smurf2增高（P＜0.05）;而硼替佐米单独处理组与对照组相比,Smurf2的表达水平没有明显变化（P＞0.05）.结论 在HK-2细胞中,硼替佐米能抑制TNF-α诱导的Smurf2表达及肾小管EMT作用.
- 索传健周嘉俊顾民谭若芸
- 关键词：硼替佐米肾间质纤维化肾小管上皮细胞
- 增强磁共振与SPECT肾动态显像评估移植肾肾小球滤过率的对比分析被引量：3
- 2017年
- 目的 对比分析动态对比增强磁共振（DCE-MRI）与单光子发射计算机断层成像术（SPECT）肾动态显像测定移植肾肾小球滤过率（GFR）的准确性.方法 选取60例2015年12月至2016年7月接受肾移植手术的受者,分别采用DCE-MRI及SPECT测定其移植肾GFR,并与内生肌酐清除率（Ccr）进行对比,对两组结果行统计分析.结果 60例受者中,矫正Ccr为（60.63±24.83）ml·min-1 ·1.73 m-2,SPECT和MRI测得的矫正移植肾GFR（GFR-SPECT和GFR-MRI）分别为（65.31±17.08）和（50.44±22.78）ml·min-1·1.73 m-2.以矫正Ccr为基础值,GFR-SPECT偏倚为4.69ml·min-1 ·1.73 m-2,精度为23.76 ml·min-1 ·1.73m-2;GFR-MRI偏倚为-10.18 ml·min-1 ·1.73 m-2,精度为13.87 ml·min-1·1.73m-2.Ccr与GFR-SPECT的相关系数（r）=0.406,P＜0.01,直线回归方程为Ccr=34.169＋0.591＆#215;GFR（SPECT）;Ccr与GFR-MRI的r=0.833,P＜0.01,直线回归方程为Ccr=22.298＋0.831＆#215;GFR（MRI）;MRI所测得GFR与Ccr线性关系更为显著.GFR-SPECT和GFR-MRI的r=0.342,P＜0.01,直线回归方程为GFR（SPECT）=16.192＋0.342＆#215;GFR（MRI）,二者呈弱相关.通过Bland-Altman分析,GFR-SPECT的可信区间为95.3 ml·min-1 ·1.73 m-2,GFR-MRI的可信区间为62.3ml·min-1·1.73m-2,MRI的可信区间更窄.结论 与SPECT相比,DCE-MRI测得GFR与矫正Ccr偏倚较大,但与矫正Ccr具有更好的相关性及一致性.DCE-MRI在评估移植肾及尿路解剖结构的同时,同样能准确地评价移植肾功能.
- 周万里陶俊张玉东韩志坚武晨江陈浩孙黎黄正楷阙宏亮王增军谭若芸顾民
- 关键词：肾小球滤过率磁共振动态对比增强核素肾动态显像
- 纤维支气管镜联合肺泡灌洗术在肾移植后合并肺部感染患者中的应用被引量：13
- 2015年
- 目的探讨纤维支气管镜联合肺泡灌洗术在肾移植后肺部感染患者中早期应用的意义。方法2011年1月至2014年9月期间在南京医科大学第一附属医院收治的同种异体肾移植术后合并肺部感染的患者共43例，根据其是否行纤维支气管镜及肺泡灌洗术分为两组：治疗组22例，对照组21例。两组患者抗生素治疗方案均相同。通过对两组患者的病原学检出率、死亡比例、好转时间，以及住院期间症状、体征、各项感染指标及影像学资料等变化进行统计学分析。结果对照组术后死亡率为14．3％，治疗组22例患者均无死亡。治疗组患者中位好转时间为12d，对照组患者中位好转时间为17d，治疗组好转时间明显缩短，且治疗组的临床表现、影像学好转率高于对照组，移植肾功能更平稳，免疫抑制剂恢复应用时间也较对照组提前。治疗组在行纤维支气管镜及肺泡灌洗术治疗后24h氧合指数为（390．0±127．6）mmHg，较治疗前明显上升，白细胞计数及血清肌酐无明显增加，未发现移植肾急性排斥反应。治疗组病原体诊断阳性率为59．1％，对照组诊断阳性率为38．1％，差异无统计学意义（P=0．169）。结论纤维支气管镜联合肺泡灌洗术在肾移植后合并肺部感染患者中的早期应用安全有效，能明显降低患者死亡率，缩短好转时间，提高治疗效果。但该方法在提高病原体检出率方面的效用尚有待进一步观察。
- 黄正楷赵欣陶俊费爽韩志坚吴边杨潇刘绪忠殷长军黄茂谭若芸顾民
- 关键词：支气管镜支气管肺泡灌洗
- 小鼠BTLA基因重组慢病毒载体的构建及鉴定
- 2015年
- 目的 ：构建小鼠B、T淋巴细胞衰减子（BTLA）基因重组慢病毒载体,探讨BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞增殖及活化的影响。方法：以小鼠脾脏组织总RNA为模板,逆转录为c DNA,通过PCR技术扩增BTLA基因,构建p WPTS-m BTLA慢病毒载体,磷酸钙法感染人胚肾上皮细胞株293T细胞。RT-PCR及Western blot法检测BTLA m RNA和BTLA蛋白表达,50%组织培养感梁剂量（TCID50）法检测重组慢病毒滴度。通过感染p WPTS-m BTLA及p WPTS-GFP慢病毒载体的293T细胞与小鼠脾脏T淋巴细胞混合培养,初步研究BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞活化与增殖的影响。结果：成功构建小鼠p WPTS-m BTLA慢病毒载体,并制备高滴度病毒颗粒（1.3×108pfu/ml）。通过对比实验组与对照组小鼠脾T淋巴细胞的增殖结果 ,发现4 d及8 d T细胞的增殖效应均明显受抑制,差异具有统计学意义（P〈0.05）,且这种抑制作用在0~8 d内具有时间依赖性。结论：过表达BTLA基因的293T细胞与小鼠脾T淋巴细胞混合培养后对其增殖及活化有抑制作用,提示成功构建具有生物学效应的小鼠BTLA基因重组慢病毒载体。
- 王子杰邓忠磊杨雪健韩志坚陶俊鲁佩殷长军谭若芸顾民
- 关键词：BTLA慢病毒载体基因重组T淋巴细胞增殖
- 肿瘤坏死因子-α在慢性移植肾间质纤维化形成中的作用机制研究被引量：2
- 2016年
- 目的观察肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在慢性移植肾间质纤维化形成中的作用，及smad泛素化调节因子2（Smurf2）在此过程中的表达变化及意义。方法通过对26例正常肾组织样本和26例慢性移植肾功能丧失（CAD）患者移植肾组织样本进行HE染色、马松三色（Masson）染色及免疫组织化学染色，检测两组肾组织中B钙粘蛋白（E-cad）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及TNF-α，Smurf2等的表达和分布，初步探讨TNF-α在CAD形成中的作用。并进一步以人肾小管上皮细胞（HK2）为体外研究对象，以不同浓度（0、10、20、50、100ng／ml）TNF-α分别刺激HK2细胞48h后，应用蛋白质印迹法检测每组细胞中E-cad、α-SMA及Smurf2等指标的表达变化。结果HE及Masson染色结果显示，与正常组相比，CAD患者移植肾组织中明显出现间质纤维化表现。免疫组织化学结果显示，与正常组相比，CAD患者移植肾组织中E-cad阳性表达率减少（P〈0．01），而α-SMA、TNF-α、Smurf2阳性表达率增加（P〈0．01）。体外实验也显示，随着TNF-α浓度增加，HK2细胞中E-cad表达下调（P〈0．05），而α-SMA和Smurf2表达上调（P〈0．05）。结论TNF-α可能通过上调Smurf2表达诱导肾小管上皮细胞表型向间质细胞转分化，进而促进移植肾间质纤维化的形成。
- 赵春春索传健顾民谭若芸
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α间质纤维化肾小管上皮细胞
- 输尿管软镜联合365μm钬激光碎石术治疗肾结石的临床疗效及安全性分析被引量：9
- 2019年
- 目的:探讨输尿管软镜联合365μm钬激光碎石术治疗肾结石的临床疗效及安全性分析。方法:2017年6月—2018年6月入院的肾结石患者,按随机数字表法分为两组各60例,其中365μm组采用输尿管软镜联合365μm钬激光碎石,而200μm组采用常规输尿管软镜碎石术。比较两组围手术期间的手术指标、并发症发生率、相关指标的变化以及对器械耗材的损伤程度。结果:与200μm组相比,采用输尿管软镜联合365μm钬激光碎石术可显著缩短手术时间;两组在住院时间、术后结石清除率等指标中无显著性差异。365μm钬激光具有更好的安全性,并发症发生率以及相关指标的变化均好于200μm钬激光术。此外,365μm钬激光术对软镜和光纤的损伤更小。结论:本研究首次提出输尿管软镜联合365μm钬激光碎石术在肾结石治疗中良好的治疗效果,尤其对于直径>2 cm的结石可显著缩短手术时间,并具有比传统200μm钬激光碎石术相当的安全性和较好的经济效益。
- 鲁佩宋日进王子杰陈科梁王增军张炜顾民
- 关键词：输尿管软镜肾结石安全性
