国家自然科学基金(81041048)
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
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- 相关机构：泸州医学院附属医院西南医科大学附属医院更多>>
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- 重组慢病毒介导超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道4基因转染BMSCs的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨重组慢病毒（1entivirus，LVs）介导超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道4（hyperpo。larization．activatedcyclicnucleotide．gatedcationchannel4，HCN4）基因转染大鼠BMSCs构建生物起搏细胞的可行性。方法选取3～5周龄SD大鼠，采用改良全骨髓贴壁培养法分离培养BMSCs。以LVs作为转染载体，增强绿色荧光蛋白（enhancedgreenfluorescentprotein，EGFP）为标记，构建LVs．HCN4．EGFP病毒液。取第3代BMSCs分别转染LVs—HCN4．EGFP病毒液（实验组）和LVs．EGFP空白病毒液（对照组），荧光显微镜观察转染24、48、72h后两组绿色荧光表达情况，72h时Westernblot检测HCN4蛋白表达；电生理检测实验组转染72h后BMSCs的起搏电流。结果实验组BMSCs形态正常、生长良好；48h后荧光显微镜下可见散在的绿色荧光，转染效率约10％；72h荧光表达稍增多，转染效率为20％～25％。对照组未见绿色荧光表达。Westernblot检测示转染72h后，实验组可见与HCN4蛋白相对分子质量相同的条带表达，而对照组仅有微弱表达；实验组蛋白条带灰度值为33．75±0．41，显著高于对照组的23．39±0．33（t=17．524，P=-0．013）。实验组转染后的BMSCs检测到起搏电流，并能被CsCl完全阻断，符合起搏电流特点。结论重组LVs介导HCN4基因成功转染大鼠BMSCs，并检测到HCN4蛋白表达及起搏电流。
- 于风旭方易冰刘炫赖前成贾建博廖斌
- 关键词：BMSCS慢病毒转染起搏电流
- 冠脉旁路移植手术器械模块化处理的临床研究被引量：1
- 2018年
- 目的评价模块化处理非体外循环下冠脉旁路移植术手术器械临床应用效果。方法通过评估消毒灭菌消耗和提高各处理节点的速度,对西南医科大学附属医院使用模块化处理手术器械的方法进行评价。结果模块化处理后器械包的总件数和质量问题明显减少;器械清点时间、消毒灭菌消耗以及差错率都明显降低。医护人员满意度则明显提高。结论模块化处理冠脉旁路移植术手术器械不仅能减轻护理工作量,且可节约费用、减少器械损耗和提高医护人员满意度。
- 江涛刘长菊张代英杨晓莹丁玉辉刘洪端刘青炎曾维君谢小均
- 关键词：手术器械包模块化
- 脂质体介导hHCN_2基因转染HEK293细胞的效率研究被引量：1
- 2012年
- 目的:脂质体介导重组起搏基因pIRES2-EGFP-HCN2转染HEK293细胞,观察转染效率,探讨其构建生物起搏器的可行性。方法:对含hHCN2cDNA的PTR载体进行转化和扩增,将所得hHCN2基因定向克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,双酶切来鉴定克隆的正确性。将重组质粒用脂质体转染HEK293,荧光显微镜观察EGFP的表达并计算转染效率。结果:构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2。荧光显微镜下可见转染后的HEK293呈绿色荧光,其转染效率可达90%以上。结论:成功构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2,并用脂质体转染的方法导入HEK293细胞,为生物起搏的研究奠定实验基础。
- 贾建博方易冰卞铁荣陈枫于风旭廖斌
- 关键词：脂质体HEK293基因转染
- HCN_2与生物心脏起搏的研究现状
- 2011年
- 心脏的节律性活动依赖起搏细胞,其起搏特性是由超极化激活的阳离子流形成,这就是目前称为超极化激活环化核苷酸门控通道（hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gatedcation channel,HCN）电流[1],也称之为起搏电流（funny current,If）。HCN2作为HCN基因家族亚型。
- 贾建博廖斌
- 关键词：HCN2
- 体外循环再灌注血培养诱导肾小管细胞凋亡及乌司他丁的保护作用研究被引量：3
- 2012年
- 目的探索乌司他丁对体外循环血清致人肾小管上皮细胞损伤的保护作用。方法以人近曲肾小管上皮细胞HK-2为研究对象,根据是否应用体外循环血清将细胞分为空白组:不含人血清的培养基;对照组:含正常人血清的培养基;试验组:含体外循环血清的培养基,进行缺氧复氧培养,通过流式细胞仪检测肾小管细胞凋亡情况,免疫组化检测caspase-3蛋白表达;乌司他丁组:以改良的缺血再灌注方式处理肾小管上皮细胞的过程中,施加乌司他丁干预。结果流式细胞仪检测结果显示,体外循环血清处理后,4组肾小管上皮细胞HK-2凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中试验组较空白组、对照组、乌司他丁组均明显升高,差异有统计学意义(P=0.00)。4组caspase-3蛋白积分分光光度值(IOD)值比较差异有统计学意义(P<0.05);其中试验组较空白组、对照组、乌司他丁组均明显升高,差异有统计学意义(P=0.00)。结论乌司他丁可通过抑制caspase-3激活,减轻体外循环缺血再灌注血清对HK-2损伤作用。
- 邓永花赖前成万居易伍长学王波廖斌
- 关键词：乌司他丁体外循环细胞凋亡CASPASE-3
