福建省科技厅青年人才基金(2007F3029)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 坐骨神经慢性结扎损伤模型大鼠脊髓细胞因子表达的变化被引量：3
- 2011年
- 目的研究大鼠坐骨神经慢性结扎损伤(CCI)后脊髓部分细胞因子mRNA表达的变化。方法大鼠随机分为三组:正常组8只作为对照;损伤组32只,结扎左侧坐骨神经制作CCI模型,再按损伤后的第1、3、7、14天四个时点随机均分大鼠,测定痛觉及收集脊髓标本;假损伤组32只,仅暴露左侧坐骨神经不结扎,并同样按四个时点均分大鼠测定痛觉及收集脊髓标本。测定各组脊髓肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10 mRNA表达情况。结果损伤组大鼠在神经损伤后出现痛觉异常,损伤后第7天最为明显(P<0.05);损伤后第1、3天损伤组TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA的表达均显著高于正常组和假损伤组(P<0.05),损伤后第7、14天IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA的表达仍明显高于正常组和假损伤组(P<0.05)。结论在大鼠坐骨神经慢性结扎损伤的神经病理痛模型中,脊髓细胞因子的变化可能对病理性疼痛的持续状态起重要的作用。
- 林献忠林健清高友光杨庆
- 关键词：脊髓肿瘤坏死因子Α白细胞介素
- 构建携带EGFP标志人白细胞介素10基因的重组腺病毒载体
- 2009年
- 目的构建携带EGFP标志人白细胞介素10(hIL-10)基因腺病毒载体。方法以pSNAV2.0-hIL-10重组质粒为模板,PCR扩增hIL-10基因,获得hIL-10cDNA片段,并酶切连接到带有含强绿色荧光蛋白基因(EGFP)标记的pDC316-IRES-EGFP-lacZalpha载体质粒上,PmeI线性化重组质粒pDC316-hIL-10-IRES-EGFP,与腺病毒包装系统AdMax转染293包装细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒,经反复感染293细胞扩增病毒后,进行离子交换法纯化病毒,并测定病毒颗粒数、滴度。结果经PCR鉴定、限制性酶切分析及序列测定,证明已正确构建重组穿梭质粒pDC316-hIL-10-IRES-EGFP和重组腺病毒质粒Ad-hIL-10-IRES-EGFP。扩增纯化后,测得重组腺病毒颗粒数为3.2×1011VP/ml,OD260/OD280值约为2.0,滴度为1.1×1010TCID50/ml。结论成功构建了重组腺病毒质粒Ad-hIL-10-IRES-EGFP,为进一步研究hIL-10基因奠定实验基础。
- 林健清林献忠张志坚
- 关键词：白细胞介素10腺病毒载体
