国家自然科学基金(30860118)
- 作品数：11 被引量：19H指数：3
- 相关作者：石小玉李文林赵林熊丽霞陈厚文更多>>
- 相关机构：南昌大学江西省医学科学研究所九江市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目国家大学生创新性实验计划更多>>
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- 溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原合成的影响
- 2010年
- 目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对人肺成纤维细胞(HFL-1)Ⅰ型胶原(procollagen typeⅠ,PCOLⅠ)合成的影响。方法将HFL-1培养后置于6孔板中,随机分为6组:对照组,LPAⅠ、Ⅱ、Ⅲ组(用1μmol.L-1的LPA刺激6、12、24h后收集细胞),IL-13组(用100μg.L-1的IL-13作用48h后收集细胞),LPA+IL-13组(用1μmol.L-1的LPA刺激12h、100μg.L-1的IL-13刺激48h后收集细胞),每组3孔。用RT-PCR方法检测PCOLⅠmRNA的表达;用免疫组化方法检测PCOLⅠ蛋白的表达。结果免疫组化与RT-PCR方法均显示LPA刺激后,PCOLⅠ的表达降低,IL-13刺激后,PCOLⅠ的表达增高,且LPA+IL-13组PCOLⅠ表达比LPA组较高,比IL-13组较低。结论LPA可以下调HFL-1PCOLⅠ的合成。
- 夏小春李文林石小玉何晓璐陈雄林赵林
- 关键词：溶血磷脂酸人肺成纤维细胞白介素13
- 白细胞介素-13与骨髓增生异常综合征被引量：1
- 2012年
- 白细胞介素-13(IL-13)是由活化T细胞分泌产生的一种细胞因子,它能抑制单核细胞释放炎性细胞因子和化学因子,诱导B细胞增殖和分化,促进IgE合成,引起变态反应,促进肺的纤维化,IL-13还参与造血调控,对原始造血前体细胞增殖和分化起一定作用,对巨核细胞生长有促进作用;骨髓增生异常综合征(MDS)是一组源于骨髓造血干/祖细胞的恶性克隆增殖性疾病,目前研究认为MDS的发病机制复杂,涉及凋亡、增殖以及免疫低监视性,IL-13在其发生发展中可能起到一定作用。
- 谢福源石小玉
- 关键词：白细胞介素-13骨髓增生异常综合征T淋巴细胞
- IL-13和乙醇对人肺成纤维细胞增殖的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究乙醇和(或)IL-13对人肺成纤维细胞(HFL-1)的促增殖作用。方法培养HFL-1,通过MTT法检测乙醇和(或)IL-13对HFL-1增殖的影响,并对结果进行分析。结果①25、50、100、200 mmol.L-1乙醇对HFL-1的增殖无影响(P>0.05)。②10、20、50μg.L-1的IL-13对乙醇有促增殖作用,且有浓度依赖性(P<0.05)。③不同浓度的乙醇(25、50、100、200 mmol.L-1)和10μg.L-1IL-13共同刺激HFL-1后增殖效果与10μg.L-1IL-13单独刺激的效果差异无统计学意义(P>0.05);除50 mmol.L-1外,其余浓度的乙醇(25、100和200 mmol.L-1)和20μg.L-1IL-13共同刺激HFL-1后增殖效果高于20μg.L-1IL-13单独刺激的效果(P<0.05);不同浓度的乙醇(25、50、100和200 mmol.L-1)和50μg.L-1IL-13共同刺激HFL-1后增殖效果明显高于50μg.L-1IL-13单独刺激的效果(P<0.05),且具有浓度依赖性。结论单独低浓度乙醇(25、50、100和200 mmol.L-1)不会影响HFL-1的增殖,但与一定浓度IL-13共同作用下将对HFL-1的增殖有显著影响。
- 熊莺孙午熊丽霞石小玉赵林李文林
- 关键词：乙醇MTTIL-13人肺成纤维细胞
- IL-13促进肝星状细胞增殖和胶原蛋白表达被引量：5
- 2011年
- 肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝纤维化发展过程中过量细胞外基质的主要来源。该研究首先利用MTT法检测IL-13实验剂量和时间条件下肝星状细胞增殖情况;然后运用RT-PCR技术检测IL-13对人肝星状细胞LX-2细胞系IL-13Rα1、IL-4Rα、TGF-β和Ⅰ型胶原蛋白转录水平的影响;最后通过羟脯氨酸法定量分析各组细胞培养上清液中的胶原蛋白含量。结果发现:IL-13能促进肝星状细胞的增殖;在不改变IL-13Rα1和IL-4Rα转录水平的同时,对TGF-β和Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达以及细胞总胶原蛋白含量的上调作用均呈现出较为明显的剂量和时间依赖性。
- 陈厚文吴超李香龙郭梦舟熊志勇范杰朱孟博石小玉
- 关键词：IL-13肝星状细胞LX-2胶原蛋白
- 可溶型白细胞介素-13受体α2对成纤维细胞胶原蛋白合成的抑制作用
- 2012年
- 目的应用可溶型IL-13受体α2(sIL-13Rα2)抑制成纤维细胞胶原合成,探索生物治疗纤维化的新途径。方法构建pMSCV/sIL-13Rα2载体和表达sIL-13Rα2的细胞模型,分子量(0.2×106)滤膜离心浓缩培养液,Ni2亲和层析,SDS-PAGE分析sIL-13Rα2,Western blot检测sIL-13Rα2,RT-PCR和羟脯氨酸法显示成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果构建的重组体pMSCV/sIL-13Rα2成功转染入HEK293细胞,并表达sIL-13Rα2。50μg.L-1 IL-13促进人瘢痕成纤维细胞系CRL-1762生成Ⅰ型胶原蛋白,50μmol.L-1 sIL-13Rα2能有效抑制IL-13刺激CRL-1762细胞合成Ⅰ型胶原蛋白。结论 sIL-13Rα2靶向IL-13抑制成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的合成。
- 石小玉熊丽霞周莹蔡伟赵林章克萍李文林
- 关键词：成纤维细胞
- TNF-α和IL-13对人肺成纤维细胞胶原蛋白生成的影响被引量：7
- 2011年
- 以胶原蛋白过量沉积为主要特征的纤维化是临床肺部疾患常见的病理现象。该研究利用RT-PCR技术检测不同剂量TNF-α和IL-13对人肺成纤维细胞IL-13Rα1、IL-13Rα2和Ⅰ型胶原蛋白转录水平的影响;ELISA检测细胞培养上清sIL-13Rα2分泌量;羟脯氨酸法定量分析各组肺成纤维细胞胶原蛋白生成情况。结果发现:在实验剂量条件下,TNF-α和IL-13对人肺成纤维细胞IL-13Rα1的表达无显著影响;两者均能不同程度地上调IL-13Rα2的表达;与对照组相比,TNF-α对胶原蛋白的表达有下调作用,IL-13则无显著影响。
- 陈厚文郭梦舟陈琦吴超李香龙范杰熊志勇朱孟博石小玉
- 关键词：TNF-ΑIL-13肺成纤维细胞胶原蛋白
- IL-13对成纤维细胞IL-13受体和IL-4受体表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究IL-13对人肺成纤维细胞株HFL-1和人肝星状细胞株LX-2 IL-13受体和IL-4受体表达的调节作用。方法 RT-PCR法检测HFL-1细胞株和LX-2细胞株IL-13Rα1、IL-4R和IL-13Rα2 mRNA的表达;凝胶电泳定量软件Image Tool2.0对RT-PCR电泳条带进行光密度分析;ELISA法检测HFL-1细胞株和LX-2细胞株分泌可溶型IL-13Rα2以及检测细胞裂解液总IL-13Rα1、IL-4R和IL-13Rα2含量。结果 IL-13(5～100 ng/ml)对HFL-1细胞株和LX-2细胞株表达IL-13Rα1和IL-4R无影响;IL-13为5、10、20 ng/ml时能诱导HFL-1细胞株表达IL-13Rα2并呈现剂量依赖,当IL-13为50 ng/ml时,对HFL-1细胞株IL-13Rα2表达的诱导作用明显减弱,IL-13 100 ng/ml组没有检测到HFL-1细胞株IL-13Rα2的表达;LX-2细胞株IL-13Rα2表达缺失且IL-13不能诱导LX-2细胞株表达IL-13Rα2。结论 IL-13不能上调人肺成纤维细胞株HFL-1和人肝星状细胞株LX-2表达功能型受体IL-13Rα1和IL-4R,表明IL-13不能通过上调IL-13Rα1和IL-4R表达量来放大自身作用;一定浓度的IL-13能诱导人肺成纤维细胞株HFL-1表达抑制型受体IL-13Rα2,表明IL-13的自身负调控。
- 石小玉陈厚文熊慧玲王志刚赵林李文林
- 关键词：IL-13成纤维细胞
- IL-13诱导 STAT6磷酸化及促进人肝星状细胞的纤维化作用
- 2014年
- 目的：探索白细胞介素-13（ IL-13）对人肝星状细胞（ hepatic stellate cell ）纤维化作用的影响及其分子机制。方法采用MTT方法观察IL-13对人肝星状细胞株LX-2增殖的影响；RT-PCR技术检测LX-2细胞Ⅰ型胶原蛋白（ collagen typeⅠ， COLⅠ） mRNA表达；ELISA和羟脯氨酸实验定量检测IL-13对LX-2细胞分泌COLⅠ的影响；Western blot技术分析IL-13对LX-2细胞的信号转导子和转录激活子6（ STAT6）磷酸化的影响。结果 IL-1310 ng／ml组、20 ng／ml组和50 ng／ml组LX-2细胞增殖显著高于空白对照组（P＜0．05），并呈现剂量依赖关系；加入IL-1350 ng／ml显著上调了LX-2细胞COLⅠmRNA和蛋白的表达（P＜0．05），低浓度IL-13（5 ng／ml、10 ng／ml、20 ng／ml）对LX-2细胞COLⅠmRNA和蛋白的表达无显著影响（P＞0．05）；IL-13（50 ng／ml）作用LX-2细胞，60 min组和120 min组磷酸化STAT6蛋白表达显著增强（P＜0．05）。结论 IL-13促进人肝星状细胞增殖并上调COLⅠmRNA和蛋白表达，IL-13促进人肝星状细胞的纤维化作用的可能机制是激活STAT6磷酸化。
- 李文林熊丽霞熊慧玲王志刚赵林石小玉
- 关键词：IL-13STAT6肝星状细胞纤维化IL-13STAT6
- IL-13和乙醇促进人肺成纤维细胞胶原的表达被引量：1
- 2011年
- 目的:研究乙醇和/或白细胞介素13(IL-13)对人肺成纤维细胞(HFL-1)Ⅰ、Ⅲ型胶原α1链基因(COL1A1、COL3A1)以及Ⅰ型胶原蛋白(CoⅠ)表达的影响,探讨肺纤维化的机制。方法:培养HFL-1,通过实时定量荧光RT-PCR检测乙醇和/或IL-13对HFL-1细胞IL-13受体(IL-13Rα1、IL-13Rα2、IL-4Rα)mRNA、COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA表达的影响,ELISA的方法检测乙醇和/或IL-13对HFL-1分泌CoⅠ的影响。结果:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)作用HFL-1后,与对照组相比IL-13Rα1 mRNA与IL-4Rα mRNA水平比对照组显著增高(P<0.05),而IL-13Rα2 mRNA水平比对照组显著降低(P<0.05)。单独低浓度乙醇(25、50、100、200 mmol/L)对HFL-1的COL1A1 mR-NA和COL3A1 mRNA表达无影响(P>0.05)。IL-13(10、20、50μg/L)可以促进HFL-1的COL1A1 mRNA和COL3A1 mR-NA的表达(P<0.05),且存在浓度依赖性。乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同作用刺激HFL-1促进COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA的表达比IL-13(10、20、50μg/L)单独作用强(P<0.05)。IL-13组(10、20、50μg/L)和乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同刺激组HFL-1均有CoⅠ的分泌,但共同刺激组HFL-1分泌CoⅠ量显著增加(P<0.05)。结论:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)不影响HFL-1细胞的COL1A1和COL3A1表达,但可以影响HFL-1细胞IL-4Rα、IL-13Rα1和IL-13Rα2的表达,而乙醇与IL-13共同刺激与单独IL-13刺激相比对HFL-1的COL1A1和COL3A1以及CoⅠ的表达有显著的促进作用。
- 熊莺孙午李文林熊丽霞石小玉赵林王志刚
- 关键词：IL-13IL-13RΑ2COL1A1乙醇
- 溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响被引量：4
- 2009年
- 背景:白细胞介素13受体α2与白细胞介素13结合后,不介导白细胞介素13功能,对白细胞介素13起负调控作用。有研究表明,溶血磷脂酸能增加人支气管上皮细胞白细胞介素13受体α2的表达,从而抑制白细胞介素13的作用。目的:验证溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的诱导作用。设计、时间及地点:mRNA水平的观察对照实验,于2007-07/2008-11在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。材料:人肺成纤维细胞HFL-1购于中科院上海生化和细胞生物研究所。方法:培养HFL-1细胞,行时间依赖和剂量依赖实验。时间依赖实验采用1μmol/L溶血磷脂酸刺激细胞,分别于0,6,12,24h收集细胞。剂量依赖实验分别用0,0.1,1,10μmol/L的溶血磷脂酸刺激细胞,12h收集细胞。主要观察指标:显微镜下观察溶血磷脂酸对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用反转录-聚合酶链反应及图像分析法检测溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响。结果:溶血磷脂酸不影响HFL-1细胞生长。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达增高,并呈时间依赖性。随着溶血磷脂酸浓度的增加,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达明显增加。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达可达高峰。溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α1的表达无影响。结论:溶血磷脂酸能促进人肺成纤维细胞HFL-1白细胞介素13受体α2 mRNA的表达。
- 何晓璐石小玉赵林夏小春李文林
- 关键词：溶血磷脂酸人肺成纤维细胞
