国家重点基础研究发展计划(2005CB522604)
- 作品数：77 被引量：548H指数：12
- 相关作者：姜保国张殿英陈林付中国苏楠更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院北京大学复旦大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 不同来源干细胞移植治疗创伤性脊髓损伤的免疫反应被引量：5
- 2015年
- 目的观察不同来源干细胞移植治疗大鼠创伤性脊髓损伤后的免疫反应差异。方法SD大鼠68只随机分成四组:羊膜上皮细胞(HAECs)移植组(20只),脐带间充质干细胞(HUCMSCs)移植组(20只),骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植组(20只),PBS对照组(8只)。测定血清中IL-2及IL-10,检测移植局部CD3+细胞浸润的情况。结果在移植后1周和1、2、3个月时,检测到移植组大鼠各个时间点静脉血中IL-2水平较对照组升高,而IL-10水平较对照组下降(P<0.05)。BMSCs组大鼠在移植后各时间点静脉血中IL-2水平较HUCMSCs组和HAECs组升高,IL-10水平下降(P<0.05)。四组在急性期(细胞移植后1周)移植局部均有大量CD3+细胞浸润;而在移植的慢性期(细胞移植后3个月)BMSCs组CD3+细胞浸润仍高于其他三组(P<0.05)。结论异体干细胞移植后可发生急、慢性免疫排斥反应。胚胎源性干细胞较大鼠BMSCs有更低的免疫源性。
- 孙海伟陆士奇陈庆梅刘一韡惠国桢
- 关键词：脊髓损伤干细胞移植免疫排斥
- IGF-1对受损血管内皮细胞存活和增殖的影响及其机制被引量：6
- 2011年
- 目的观察胰岛素样生长因子(IGF-1)对受损血管内皮细胞(VEC)增殖的影响。方法利用不同浓度(10、40、80、160 ng/ml)的IGF-1作用于血管内皮细胞48 h后,通过MTT法检测细胞的生长情况;采用划痕实验观察IGF-1对受损内皮细胞增殖的影响,并用PI染色观察细胞的情况,ELISA法测定VEGF含量。结果 10 ng/ml、20 ng/ml、40 ng/ml、80 ng/ml的IGF-1对血管内皮细胞的增殖都有不同程度的促进作用,IGF-1浓度为40 ng/ml、80 ng/ml的实验组与未加入IGF-1的对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),160 ng/ml的IGF-1对细胞增殖作用下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。取40 ng/ml IGF-1作用于受损血管内皮细胞48 h后,细胞增殖速度较对照组明显加快,PI染色显示实验组死亡细胞明显减少,实验组培养液上清VEGF含量较对照组高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 IGF-1对受损血管内皮细胞的增殖有促进作用,同时可减少其细胞凋亡,促进受损内皮细胞的修复,其机制可能与IGF-1促进细胞分泌VEGF有关。
- 陈瑶伍亚民伍亚民龙在云刘媛王莉曾琳王继红
- 关键词：IGF-1内皮细胞存活增殖
- 213例肱骨近端骨折的Neer分型被引量：13
- 2011年
- 目的探讨Neer分型的临床应用。方法对自2003年3月至2010年7月我科收治的213例肱骨近端骨折患者的资料进行分析。根据术前x线片进行Neer分型，并与原始诊断对比，有疑问的病例通过讨论得到统一结论。结果213例骨折中，有65例（30．5％）两部分外科颈骨折（含骨折脱位），51例（23．9％）两部分大结节骨折（含骨折脱位），1例（0．5％）两部分解剖颈骨折，40例（18．8％）三部分外科颈大结节骨折（含骨折脱位），33例（15．5％）典型四部分骨折（含骨折脱位），16例（7．5％）外展嵌插型四部分骨折，5例（2．3％）头劈裂骨折和2例（0．9％）头压缩骨折。前后诊断对比发现：对于两部分骨折的诊断，此次阅片与入院时较一致；对于三部分及以上骨折，前后两次阅片差别较大。结论严格按照Neer分型的定义，并借助特殊影像学方法，绝大多数骨折可以很好地进行Neer分型。
- 邓磊白露张培训杨明姜保国张殿英付中国
- 利用寡核苷酸基因芯片筛选人脑创伤的差异表达基因被引量：2
- 2006年
- 目的检测人创伤脑组织与正常脑组织凋亡相关基因表达谱的差异,筛选差异表达基因。方法利用含325个人凋亡相关类基因的寡核苷酸基因芯片,分别检测6例创伤脑组织与正常脑组织的差异表达基因。结果6例创伤脑组织共同差异表达的凋亡相关类基因数为5个,均表达上调。结论基因芯片筛选出在以前的脑创伤文献中未曾报道过的凋亡相关类基因2个,对其干预有望成为脑创伤防治的新的分子生物学策略。
- 雷平杨树源张建宁杨新宇朱涛雪亮刘辉
- 关键词：基因芯片创伤脱噬作用
- 不同活化状态的巨噬细胞对雪旺细胞增殖、分泌神经生长因子功能的影响
- 2008年
- 目的观察不同活化状态的巨噬细胞对雪旺细胞（SCs）生理功能的影响。方法分离、培养成年SD大鼠巨噬细胞，利用髓鞘组织（20μg／weⅡ）使其激活；从新生1dSD大鼠坐骨神经内分离SCs（1×10^5个／ml）并培养于Transwell下室。共培养组：激活状态的巨噬细胞加入到Transwell上室；对照组1：Transwell上室内加入未激活的巨噬细胞；对照组2：Transwell上室内加入不含细胞的培养基。通过细胞计数、^3H—TdR掺入法检测SCs增殖情况，Western blot检测SCs表达神经生长因子（NGF）水平。结果共培养组从新生大鼠内获取4．16×10^6个SCs，明显高于对照组1（3．83×10^6）和对照组2（3．19×10^6）（P〈0.05）；3H—TdR结果显示细胞增殖水平（0.2766±0．0079）明显强于对照组1（0．2268±0．0084）和对照组2（0．1929±0．0031）（P〈0．05）；WB结果显示NGF表达水平明显高于对照组（P〈0．05）。结论巨噬细胞对SCs的影响受其活化状态的影响，激活状态的巨噬细胞可以明显促进SCs增殖，增强其表达NGF的能力。
- 陈建梅崔晓萍陈菁王建民许川李兵仓
- 关键词：巨噬细胞雪旺细胞增殖髓鞘
- 自锁空心加压防旋转刀片的有限元分析被引量：1
- 2009年
- 运用医学仿真软件Mimics 10.0对股骨的CT图像进行处理,完成了股骨曲面初步的三维重建,并运用Geomagic Studio工程逆向软件进行了股骨NURBS曲面重构,建立几何模型。模拟自锁空心加压防旋刀片固定股骨颈骨折并单腿站立时,利用有限元分析软件ANSYS 10.0进行接触分析,计算自锁空心加压防旋转刀片的应力分布和股骨的位移分布。自锁空心加压防旋刀片的最大MISES应力分布为133.179～182.417 MPa,股骨的最大位移为0.367～0.864mm。提示自锁空心加压防旋刀片固定股骨颈骨折,具有良好的稳定性。
- 杨明王维胡岩王奇志陈建海张殿英傅中国姜保国
- 关键词：股骨颈骨折骨折内固定有限元分析
- 尺骨鹰嘴截骨与肱三头肌两侧入路内固定治疗肱骨髁间骨折的疗效比较被引量：38
- 2009年
- 目的比较尺骨鹰嘴截骨与肱三头肌两侧入路内固定治疗肱骨髁间骨折的疗效。方法对1980年1月至2008年3月国内外发表的尺骨鹰嘴截骨与肱三头肌两侧入路内固定治疗肱骨髁间骨折的文献进行检索。采用Coehrane协作网提供的系统评价方法对纳入文献进行数据抽取、汇总及系统评价。结果共检索到364篇原始文献，经筛选及评价，最后收集到已发表的33篇文献符合纳入标准。随访资料完整的患者876例，其中尺骨鹰嘴截骨入路509例，肱三头肌两侧入路367例。分析显示：肱骨髁间骨折C2及C3型患者尺骨鹰嘴截骨人路内固定的术后肘关节功能评分的优良率（82．32％与79．38％）均高于肱三头肌两侧入路术后肘关节功能评分的优良率（70．59％与64．71％）；C1型患者两种入路的术后肘关节功能评分的优良率差异无统计学意义。14篇文献报道了术后并发症。尺骨鹰嘴截骨入路术后并发症的发生率为4．72％（95％可信区间4．70％-4．74％），肱三头肌两侧入路为8．17％（95％可信区间8．13％-8．21％）。结论尺骨鹰嘴截骨较肱三头肌两侧入路内固定治疗肱骨髁间骨折的疗效佳。
- 王静姜保国张培训
- 关键词：肱骨骨折循证医学
- 人工肘关节置换术治疗复杂肱骨远端骨折被引量：5
- 2010年
- 目的探讨人工肘关节置换术治疗复杂肱骨远端骨折的意义。方法2005年5月至2008年10月对12例新鲜肱骨远端骨折接受肘关节置换术的患者进行临床随访。患者平均年龄60岁，平均随访时间12个月。骨折按照AO分型，C2型3例，C3型9例。关节假体均为半限制型Coonrad-Morrey假体。随访内容包括疼痛评估，关节活动度、稳定性检查和肌力检查，并发症检查，Mayo肘关节评分，上肢失能评分（DASH评分），放射学评估，有无假体松动和异位骨化。结果2例患者有轻度疼痛。平均屈曲98．3°，平均伸直受限17．9°，平均旋前82．9°，平均旋后70．8°。12例患者肘关节检查均为稳定的关节。患者对治疗结果均满意。1例伤口不愈合，2例有尺神经症状。1例肘关节屈伸肌力Ⅳ级。未发现异位骨化和假体松动。Mayo肘关节评分优3例，良9例。DASH评分平均41．3分（25～75分）。结论对于严重骨质疏松、骨折粉碎严重而内固定不能获得稳定固定、关节面严重破坏（骨折或者关节炎病变）预计会发展为创伤性或炎症性关节炎的病例进行肘关节置换可以获得良好功能。
- 姜保国陈建海张培训张殿英付中国
- 关键词：骨折肱骨远端
- 原代培养小鼠关节软骨细胞的分化与诱导被引量：3
- 2009年
- 背景:传统培养方法体外培养的软骨细胞经长时间传代培养后往往去分化为成纤维细胞,导致细胞数量及活性下降。如何避免培养过程中的去分化问题,是模拟体内软骨内成骨软骨发育过程的关键。目的:课题创新性提出以Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶结合消化法体外培养扩增C57BL/6小鼠关节软骨细胞并诱导其向更成熟肥大软骨细胞或终末分化软骨细胞分化。设计、时间及地点:细胞学体外观察实验,于2008-09/12在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。材料:C57BL/6品系新生小鼠9只。方法:采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶结合消化法分离培养C57BL/6新生小鼠关节软骨细胞,细胞计数法绘制细胞生长曲线,RT-PCR检测Ⅱ型胶原进行鉴定。当细胞90%融合时以含5.5mg/L人转铁蛋白,3×10-8mol/L亚硒酸钠,10mg/L牛胰岛素的ITS诱导培养基进行分化诱导。主要观察指标:诱导0,7d,阿利新蓝染色检测软骨细胞分泌基质中的葡萄糖胺聚糖,vonKossa染色检测软骨细胞钙化结节形成情况,实时定量PCR检测Ⅱ型胶原、X型胶原及基质金属蛋白酶13的表达进行鉴定。结果:原代培养细胞24h贴壁,呈三角或多角形,培养4～6d进入快速增殖期,RT-PCR检测到Ⅱ型胶原的表达,证实获得大量高纯度、高活性的软骨细胞。诱导0d,细胞单层铺满培养皿底面,无聚集现象;诱导7d明显可见由软骨细胞聚集形成的软骨小结。与诱导0d时相比,诱导7d阿利新蓝染色示软骨细胞分泌基质中的葡萄糖胺聚糖染色呈阳性,可见明显的软骨小结,Ⅱ型胶原及基质金属蛋白酶13表达明显增高,且钙化结节明显增多。结论:采用胰蛋白酶和胶原酶结合消化法获得大量高纯度、高活性的软骨细胞。ITS诱导体系有效地促进了软骨细胞成熟及终末分化,较成功模拟了软骨内成骨的软骨发育过程。
- 金旻谢杨丽黄炜杜晓兰李灿何启芬陈林
- 关键词：软骨细胞细胞培养关节软骨分化小鼠
- 成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体功能获得型点突变影响小鼠颅底软骨发育被引量：1
- 2007年
- 目的:对比野生型小鼠和成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体(fibroblast growth factor receptor2,fgfr2)基因S252W突变型小鼠颅底软骨的生长发育情况,探讨fgfr2功能持续增强对小鼠颅底软骨发育的影响。方法:实验于2004-03/2005-04在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤中心实验室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。①fgfr2+小鼠和C57BL/6J小鼠交配后取F1代,利用聚合酶链反应方法进行fgfr2突变型小鼠基因型的鉴定,得到野生型和fgfr2受体功能获得型点突变型两组小鼠。②标本取材及处理:分别在两组实验动物中,取胚胎期16d(E16)、胚胎期17d(E17)、新生2d(P2)、新生8d(P8)的小鼠的颅底作为标本。一部分体积分数为0.75的乙醇溶液固定。另一部分标本行40g/L多聚甲醛固定,150g/L乙二胺四乙酸溶液脱钙,常规石蜡包埋、切片。③阿尔辛-茜素红骨架染色显示颅底整体骨骼的发育情况。软骨组织染为蓝色,骨组织染为红色。④脱钙骨切片后进行苏木精-伊红染色。未脱钙骨切片后进行Calcein染色,荧光显微镜下观察钙化组织的情况。⑤使用地高辛RNA标记试剂盒按照产品说明制备Col 10(Collagen 10)地高辛标记的互补RNA探针,对颅底软骨联结进行检测软骨分化标志基因表达情况的原位杂交。⑥组织切片染色结果使用SPOT Advanced软件进行数码拍摄。结果:①实验小鼠颅底发育的大体情况:fgfr2受体功能获得型点突变小鼠从胚胎后期开始就表现出短颅现象。②阿尔辛蓝-茜素红骨架染色、Calcein染色和苏木精-伊红染色显示,fgfr2受体功能获得型点突变小鼠出生后颅底软骨联结没有出现提前融合的现象,但是颅底软骨生长发育差,软骨细胞增生区、肥大区缩短。突变小鼠的颅底软骨发育障碍导致颅底骨组织的生长发育也出现障碍。③原位杂交:Col10在野生型和突变型小鼠颅底软骨的表达部位未�
- 尹良军杜晓兰刘志君苏楠张宜华杨京金琝赵玲陈林
- 关键词：成纤维细胞生长因子受体软骨细胞
