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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及rhEGF对其增殖的影响: 2010年; 目的分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),并探讨人重组表皮生长因子(rhEGF)对其体外增殖的影响。方法用贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,传代扩增,将生长良好的传代细胞分为rhEGF组和空白对照组,rhEGF组加20 ngrhEGF和含20%新生牛血清(FBS)的DMEM培养基,对照组只加含20%FBS的DMEM培养基,连续观察细胞形态及生长特性,绘制生长曲线。结果 2、4、6代细胞生长曲线基本相同,细胞倍增时间约34 h,方差分析P>0.05,三代细胞间无统计学差异。rhEGF组与空白对照组的数值,分别做重复测量方差分析,P<0.01,差异有统计学意义。结论骨髓MSCs体外稳定扩增,有很强的增殖能力,且rhEGF能促进其增殖。; 王宇魏书艳史小琴王燕张明艳许文杰; 关键词：间充质干细胞表皮生长因子

三磷酸胞苷二钠诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究被引量：5: 2011年; 目的探讨三磷酸胞苷二钠(CTP)诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的作用。方法取成年SD大鼠,用贴壁培养法分离纯化骨髓间充质干细胞(BMSCs),传代扩增,连续观察细胞形态及生长特性。用不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.40和0.80mg/mL)CTP对BMSCs进行诱导;诱导后用免疫组织化学检测细胞神经微丝蛋白(NF)、胶质原性纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元烯醇化酶(NSE)的表达。计算阳性细胞比例,进行统计学分析,选出合适的诱导剂量。结果随CTP浓度增高,经免疫组织化学检测NF、GFAP和NSE阳性细胞比例也呈现逐步增高趋势,到一定浓度后又有所下降,统计学分析,CTP浓度为0.2mg/mL时,能够诱导NF、GFAP和NSE阳性细胞比例为(32.73±0.63)%、(62.77±2.45)%和(30.41±0.65)%,显著高于对照组(P<0.01)。结论 CTP是一种很好的体外诱导剂,可以诱导MSCs向神经细胞分化,以0.2mg/mLCTP作诱导剂,能够获得较明显的诱导MSCs向神经细胞和神经胶质细胞分化的结果。; 王宇魏书艳史小琴王燕张明艳陈玉敏; 关键词：骨髓间充质干细胞三磷酸胞苷二钠分化神经元样细胞

大鼠骨髓基质细胞的体外培养和定向诱导被引量：1: 2011年; 目的探讨大鼠骨髓基质细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外培养生物学特性及其定向诱导分化能力。方法从大鼠双侧股骨中分离获取MSCs,体外培养扩增纯化后传代于塑料培养皿中,相差显微镜观察其形态学特点,MTT法测定绘制传代骨髓间充质干细胞生长曲线,经成骨诱导液,20%新生牛血清(fetal bovineserum,FBS),10mmol/L β-甘油磷酸钠,8～10mmol/L地塞米松,50mg/L维生素C,神经细胞诱导液,0.06mg/L神经生长因子(nerve growth factor,NGF),20%FBS。对传至3～5代的细胞进行体外诱导分化,采用免疫细胞化学法对诱导后的细胞进行鉴定。结果大鼠MSCs在体外培养中具有增殖、分化潜能,可分化为软骨细胞、神经细胞等。结论 MSCs可在体外大量扩增,具有较强的自我更新及多向分化能力,在适宜的诱导分化条件下,可诱导为神经干细胞。; 魏书艳李育臣王宇张唯王佩贾战斗; 关键词：骨髓细胞细胞培养技术

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠模型学习记忆及PSD-95表达的影响被引量：9: 2012年; 目的观察银杏叶提取物对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和海马组织PSD-95蛋白的影响。方法将大鼠随机分为模型组,银杏叶提取物干预组,假手术组和正常组,造模14 d后用水迷宫测定各组大鼠的学习、记忆功能,将大鼠断头取脑后,用TUNEL法检测海马组织神经元情况,并用蛋白印迹方法观察大鼠海马PSD-95蛋白表达。结果模型组大鼠存在记忆障碍,而银杏叶提取物干预组大鼠学习记忆能力明显改善,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠海马组织有大量凋亡神经元,与假手术组及正常组相比有明显统计学意义(P<0.01),与银杏叶提取物干预组相比也有显著差异(P<0.05)。银杏叶提取物干预组海马CA1及CA3区PSD-95蛋白明显增加,与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。结论银杏叶提取物明显促进VD大鼠海马组织PSD-95蛋白表达,抑制海马神经元凋亡,改善VD大鼠学习记忆能力,对VD大鼠有显著的治疗作用。; 王宇张明艳王燕王波赵永才; 关键词：血管性痴呆海马银杏叶提取物

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河北省卫生厅科研基金(20090175)