国家自然科学基金(31170058)
- 作品数：9 被引量：16H指数：2
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- 人肠道产柚苷酶菌株分离、鉴定及其对柚皮苷的转化特性被引量：3
- 2014年
- 【目的】从健康人肠道微生物菌群中分离能将柚皮苷高效转化为柚皮素的特定细菌菌株,对分离得到的菌株进行菌种鉴定并研究菌株对柚皮苷转化特性,目的是为柚皮素的高效生物合成提供新细菌资源。【方法】取健康人新鲜粪样,在厌氧工作站内培养24 h后进行梯度稀释并涂板,从板上挑取单菌落与底物柚皮苷进行厌氧培养,用高效液相色谱检测底物被转化情况。根据16S rDNA序列及相关生理生化特性分析,对所分离的柚皮苷转化菌进行菌种鉴定,并测定转化菌株对底物柚皮苷的转化动态和转化能力。【结果】从人肠道菌群中分离得到4株能将柚皮苷转化为柚皮素的细菌菌株,分别命名为AUH-JLD3、AUH-JLD7、AUHJLD104和AUH-JLD109。根据16S rDNA序列分析,结合形态学及相关生理生化特性等,将其分别鉴定为布劳特氏菌(Blautia sp.AUH-JLD3)、肠球菌(Enterococcus sp.AUH-JLD7)、拟杆菌(Bacteroides sp.AUHJLD104)和巴氏链球菌(Streptococcus pasteurianus subsp.AUH-JLD109)。转化动态研究结果表明,所分离的4株细菌菌株均能在12 h内将0.2 mmol/L底物柚皮苷转化为柚皮素;转化能力测定结果显示,菌株AUHJLD3、AUH-JLD7、AUH-JLD104及AUH-JLD109能够高效转化底物柚皮苷的最大浓度分别为0.2 mmol/L(平均转化率66.67%)、0.8 mmol/L(平均转化率86.49%)、0.2 mmol/L(平均转化率73.68%)以及1.6 mmol/L(平均转化率93.20%)。【结论】本研究首次从人肠道菌群中分离得到4株能将柚皮苷转化为柚皮素的细菌菌株,其中巴氏链球菌AUH-JLD109对底物柚皮苷转化能力最强。
- 陈静孟建青王烨王秀伶
- 关键词：柚皮苷柚皮素微生物转化
- 牛瘤胃耐氧细菌菌株Aeroto-Niu-O16对中药甘草主要活性成分甘草素的开环转化被引量：1
- 2012年
- 菌株Aeroto-Niu-O16是经耐氧驯化后能在有氧条件下将大豆异黄酮黄豆苷元和染料木素分别加氢还原为二氢黄豆苷元和二氢染料木素的耐氧细菌菌株。通过本研究发现,该菌株在有空气氧条件下能将中药甘草主要活性成分甘草素(liquiritigenin)进行开环转化。中药甘草的乙醇粗提物直接酸水解即得底物甘草素。根据产物的最大紫外吸收图谱、质谱以及核磁共振氢谱和碳谱等测定结果,将菌株转化甘草素所生成的产物鉴定为达维荚蒾苷元(davidigenin)。菌株Aeroto-Niu-O16对底物甘草素的最大转化浓度为0.8 mmol.L1,平均转化率为71.7%;当向培养基中添加0.1%(m/v)的L-半胱氨酸或硫代硫酸钠时,底物甘草素的平均转化率可由原来的71.7%分别提高到78.3%和77.2%。检测浓度在0.2 mmol.L1到1.6 mmol.L1范围内,相同浓度下的产物达维荚蒾苷元对二苯代苦味酰基自由基(DPPH)的体外清除能力均显著或极显著高于底物甘草素。利用微生物生物转化法将甘草素转化为具有更高更广生理活性的达维荚蒾苷元尚属国内外首次报道。
- 王铭赵慧王秀伶张红蕾郝庆红
- 关键词：甘草素
- 左旋-5-羟基-雌马酚对秀丽隐杆线虫寿命及抗性的影响(英文)
- 2014年
- 以秀丽隐杆线虫模式生物为研究对象,研究大豆异黄酮染料木素微生物代谢产物左旋-5-羟基-雌马酚对线虫寿命、生殖能力以及抗热应激和抗氧化应激能力的影响。研究结果表明,浓度为0.1 mmol/L和0.2 mmol/L的左旋-5-羟基-雌马酚不仅能够显著延长线虫寿命,同时还能显著增强线虫耐热和抗氧化应激能力,而在相同浓度下线虫生殖能力则无明显不良影响。通过进一步对比分析转录物水平以及喂食相应线虫突变体daf-16(mu86)和daf-2(e1370),确定左旋-5-羟基-雌马酚延长线虫寿命与DAF-2/DAF-16 Insulin/IGF-1信号转导通路相关。有关左旋-5-羟基-雌马酚显著延长线虫寿命和增强线虫抗性为国内外首次报道。
- 张聪慧王秀伶梁晓琳张红蕾郝庆红
- 关键词：雌马酚秀丽隐杆线虫热应激生殖能力INSULIN
- 大豆异黄酮转化菌株的分离及相关转化酶基因克隆研究进展
- 2012年
- 大量流行病学研究表明,大豆异黄酮具有明显的抗癌、抗氧化、抗炎、防护心脑血管以及预防骨质疏松等多种生理功能。被人和其他哺乳动物摄入体内的大豆异黄酮在胃肠道菌群作用下可被降解为二氢黄豆苷原、二氢染料木素、去氧甲基安哥拉紫檀素、雌马酚等不同代谢产物。体内及体外研究结果均表明,大豆异黄酮代谢产物具有比大豆异黄酮更高、更广的生物学活性。迄今,已有大量大豆异黄酮代谢产物产生菌从不同动物胃肠道微生物菌群中被分离出来。目前,人们正专注于从已分离的大豆异黄酮转化菌株中克隆相关转化酶基因。本文将对大豆异黄酮转化菌株分离及相关转化酶基因克隆现状作一综述。
- 张红蕾于秀梅王秀伶
- 关键词：大豆异黄酮微生物转化菌株分离基因克隆
- 兔肠道大豆异黄酮还原菌株的分离鉴定及其转化特性被引量：2
- 2014年
- 【目的】从兔新鲜粪样中分离对大豆异黄酮黄豆苷原和染料木素具有转化作用的特定细菌菌株。【方法】在厌氧工作站内对獭兔新鲜粪样进行梯度稀释后涂板,挑取单菌落与底物黄豆苷原和染料木素分别厌氧混合培养,用高效液相色谱检测底物被转化情况。【结果】分离得到一株对大豆异黄酮黄豆苷原和染料木素均具有转化作用的革兰氏阳性严格厌氧细菌菌株AUH-JLR41(KJ188150)。根据产物的高效液相保留时间、紫外吸收图谱和质谱分析结果,将菌株AUH-JLR41代谢底物黄豆苷原和染料木素生成的产物分别鉴定为二氢黄豆苷原和二氢染料木素。经手性高效液相系统检测,产物二氢黄豆苷原和二氢染料木素均呈现两个等面积物质峰,表明这两个产物的对映体过量率均为0。通过转化动态研究发现,菌株AUH-JLR41分别在底物黄豆苷原和染料木素加入48 h和72 h后将底物全部转化为产物,该菌株能转化底物黄豆苷原和染料木素的最大浓度均为0.6 mmol/L。经BLAST比对,菌株AUH-JLR41的16S r RNA基因序列与斯奈克氏菌属菌株Slackia equolifaciens DZE(EU377663)的相似性高达99.6%。【结论】兔肠道分离的斯奈克氏菌属菌株Slackia sp.AUH-JLR41在厌氧条件下能将大豆异黄酮黄豆苷原和染料木素分别还原为二氢黄豆苷原和二氢染料木素。
- 周博孟建青王秀伶
- 关键词：染料木素菌株分离微生物转化
- 耐氧突变株对中药射干中鸢尾黄素的生物转化被引量：1
- 2014年
- 中药射干的甲醇提取物直接酸水解即得底物鸢尾黄素。通过本研究发现，耐氧突变株Sharpeasp．strainAeroto．Niu-O16在有氧条件下能将底物鸢尾黄素（tectorigenin）进行转化。根据产物的质谱及核磁共振氢谱和碳谱等测定结果，将菌株转化鸢尾黄索所生成的产物鉴定为二氢鸢尾黄素（dihydrotectorigenin）。耐氧突变株Aer-oto．Niu．016对底物鸢尾黄素粗品的最佳转化时间为36—48h，对底物鸢尾黄素粗品的最大转化浓度为0．8mmol／L，平均转化率为41．2％；当向培养基中添加0．15％（m／v）的￡．半胱氨酸时，底物鸢尾黄素的平均转化率可由原来的41．2％提高到50．7％。利用微生物转化法合成二氢鸢尾黄素尚属国内外首次报道，本研究为日后生物合成二氢鸢尾黄素提供了可能。
- 郭常亮王秀伶刘明月陈静
- 关键词：射干鸢尾黄素微生物转化
- 大豆异黄酮微生物转化研究进展被引量：8
- 2020年
- 大豆异黄酮是大豆在其生长过程中形成的一类次生代谢产物,具有抗氧化、抗癌、减少骨质流失、降低心脑血管发病率等多种生理功能。目前已知,被摄人机体的大豆异黄酮将被肠道微生物菌群转化为具有更高、更广生物学活性的不同产物。因此,大豆异黄酮对人体的有益调节作用强弱并不简单取决于摄人机体的净含量的多少,更在于被摄人机体的大豆异黄酮将如何被肠道菌群转化。本文从大豆异黄酮的组成与功能、大豆异黄酮体内吸收、代谢及微生物转化、转化产物的活性以及高效合成等方面进行了系统综述,对大豆异黄酮微生物生物转化研究现状和存在问题进行分析总结,并对今后发展趋势进行展望,旨在推动高活性大豆异黄酮微生物转化产物的研究与开发。
- 赵晓佳李易聪王秀伶
- 关键词：大豆异黄酮微生物转化生物活性生物合成
- 一株新分离鸡肠道厌氧细菌将染料木素转化为左旋-5-羟基-雌马酚（英文）被引量：1
- 2015年
- 本研究从鸡新鲜粪样中分离得到一株能在厌氧条件下将大豆异黄酮染料木素转化为5-羟基-雌马酚的棒状严格厌氧细菌,我们将其命名为AUH-JLC257。通过ESI质谱、核磁共振氢谱和碳谱等对产物5-羟基-雌马酚进行了结构鉴定。通过手性高效液相色谱检测和旋光测定发现生成的5-羟基-雌马酚仅为左旋-5-羟基-雌马酚。菌株AUH-JLC257能高效转化底物染料木素的最大浓度为0.6 mmol/L,平均转化率为83.1%。通过本研究首次发现生成的5-羟基-雌马酚在3.3μmol/L浓度下仍表现出对二苯代苦味酰基自由基(DPPH)的清除能力。通过16S rR NA基因序列比对,菌株AUH-JLC257与菌株Slackia equolifaciens strain DZE相似性最高,相似性为99.27%。
- 谢雁景刘子光高雅宁王秀伶郝庆红于秀梅
- 关键词：染料木素细菌分离
- 对黄豆苷原具转化作用的耐氧突变株Aeroto-AUH-JLC140未知代谢产物分离、鉴定及抗氧化活性测定被引量：1
- 2016年
- 【目的】与原出发菌株AUH-JLC140相比,耐氧突变株Aeroto-AUH-JLC140在其生长过程中产生一种未知物质,且该未知物质的产生与添加底物黄豆苷原无关。对该未知物质进行分离纯化和结构鉴定,并测定其产生动态及抗氧化活性。【方法】利用高效液相色谱对未知物质进行分离,经紫外吸收图谱、质谱、核磁共振氢谱和碳谱等分析,对未知物质进行结构鉴定;通过1,1-二苯基-2-苦味酰基自由基(DPPH)清除试验测定其抗氧化活性。【结果】Aeroto-AUH-JLC140产生的未知物质被鉴定为吲哚,接种后15 h菌株产吲哚最高,所产吲哚量为19.89 mg/L。浓度为0.2 mmol/L(即23.40 mg/L)的吲哚除对DPPH自由基具有明显清除作用外,还能有效降低脑心浸液(BHI)液体培养基的氧化-还原电位。【结论】耐氧突变株Aeroto-AUH-JLC140产生的未知代谢产物为吲哚,菌株通过产生吲哚降低培养基氧化-还原电位,进而为该菌株的生长提供适宜的低氧微环境。
- 张晨李晓蕾李梦王秀伶郝庆红于秀梅
- 关键词：吲哚DPPH自由基
