河南省高校科技创新团队支持计划(13HASTIT025) 作品数:12 被引量:37 H指数:4 相关作者: 李三强 韩红梅 马曌 卢华杰 胡景峰 更多>> 相关机构: 河南科技大学 河南科技大学第一附属医院 河南中医药大学 更多>> 发文基金: 河南省高校科技创新团队支持计划 国家自然科学基金 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
二乙基亚硝胺诱导小鼠原发性肝细胞癌过程中肝糖原的表达分析 被引量:2 2015年 目的探讨在原发性肝癌发展的不同阶段肝糖原的变化规律。方法清洁健康BALB/c雄性小鼠40只,分为正常组(n=3)与模型组(n=37)。将正常组3只小鼠处死,取肝;模型组小鼠每日饲以二乙基亚硝胺(DEN)溶液30μg·m L-1为饮用水,于诱癌4,8,12,16,20,24周,各取3只小鼠进行肝取材(n=21)。将各组肝组织进行糖原过碘酸雪夫氏(PAS)染色。并对样本进行平均光密度分析,用ANOVA显著分析和Student-Newman-Keuls检验。结果正常组和8,12周模型组的糖原含量依次显著降低,16周模型组糖原含量达最低;随后20,24周模型组肝糖原含量依次显著增加。结论 DEN诱导小鼠发生肝癌的过程中,肝糖原的变化规律为先减少后增加。 吴秦川 李三强 胡景峰 付指挥 马曌 韩红梅 杨博 丁康熙 杨省柯关键词:二乙基亚硝胺 肝癌 肝糖原 二乙基亚硝胺诱导肝癌小鼠肝组织胶原纤维的变化 被引量:2 2015年 目的观察胶原纤维在肝癌发生发展过程中的变化及其与癌变的关系。方法饲养清洁健康BALB/c小鼠40只,以30 mg/ml二乙基亚硝胺(DEN)溶液作为饮用水,建立肝癌模型。在开始喂养后的0 w、4 w、8 w、12w、16 w、20 w和24 w,各处死3只动物,对所取肝脏组织行石蜡包埋切片,采用天狼新红染色,对胶原纤维进行检查。通过Image-Pro Plus 6.0对采集的样本进行光密度积分(IOD)定量,应用SPSS 16.0软件对测得的数据进行ANOVA显著性分析和Student-Newman-Keuls检验。结果小鼠在诱癌剂作用20 w后肝组织发生癌变;在4 w末,小鼠肝组织胶原纤维IOD为(97.610±18.640),明显低于8 w末胶原纤维IOD水平[(377.054±63.668),P<0.05];在8 w末,胶原纤维IOD为(377.054±63.668),明显低于12 w末胶原纤维IOD[(625.875±110.846),P<0.05];在16 w末,胶原纤维IOD为(847.289±53.473),显著低于20 w末胶原纤维IOD[(1671.301±292.593),P<0.01];在20 w末,胶原纤维IOD为(1671.301±292.593),显著低于24 w末胶原纤维IOD[(3968.450±138.949),P<0.01]。结论胶原纤维在癌变的整个过程中沉积量逐渐增加,变化明显,可能与肝组织的损伤修复和癌变的扩散密切相关。 胡景峰 李三强 吴秦川 付指挥 马曌 韩红梅 杨博 丁康熙 杨省柯 卢华杰关键词:肝癌 二乙基亚硝胺 胶原纤维 小鼠 对乙酰氨基酚诱导小鼠药物性肝损伤中PCNA的表达 被引量:2 2014年 目的研究对乙酰氨基酚(Acetaminophen,AAP)诱导的小鼠药物性肝损伤过程中增殖细胞核抗原(PCNA)表达的动态变化,进一步阐明PCNA在药物性肝损伤中的重要作用。方法利用AAP溶液(550 mg/kg)腹腔注射诱导小鼠药物性肝损伤。取正常对照小鼠和注射AAP后6、24、48、72 h的小鼠肝脏制备匀浆液,利用蛋白印迹的方法检测小鼠肝损伤过程中PCNA的表达变化;同时检测各时间点小鼠血清中AST和ALT酶活变化。结果小鼠注射对乙酰氨基酚后,血清中AST和ALT酶活逐渐升高,24 h达到高峰后逐渐降低,72 h恢复到接近正常水平。PCNA在注射对乙酰氨基酚后6 h,其表达量显著下降,在24 h表达量达到最低值,随着损伤后的修复,PCNA的表达量逐渐增高,72 h逐渐恢复接近正常水平。结论 PCNA在AAP诱导的小鼠药物性肝损伤过程中表达出现显著变化,AAP诱导的药物性肝损伤过程存在一个损伤与修复逐渐变化的过程。 赵琼 符晓楠 李三强关键词:PCNA 对乙酰氨基酚 药物性肝损伤 解整合素-金属蛋白酶9在对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤中的表达分析 被引量:9 2015年 目的研究解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)在对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤过程中的表达变化规律。方法 50只小鼠随机分为2组,正常组10只,实验组40只。实验组小鼠腹腔注射对乙酰氨基酚溶液550 mg·kg-1,6,24,42和72 h后分别摘除小鼠眼球采血、分离血清,同时分离正常组小鼠血清,检测谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性;用蛋白印迹和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法检测正常组小鼠和注射对乙酰氨基酚后不同时间点小鼠肝中ADAM9在蛋白和核酸水平的表达变化。结果对乙酰氨基酚注射小鼠后6 h,ADAM9的蛋白和核酸表达量显著下降(P<0.05),随着时间的延长,ADAM9的蛋白和核酸表达量继续下降,24 h达到最低值(P<0.05),然后随着肝损伤后的修复,ADAM9的表达量逐渐增加,在注射对乙酰氨基酚42 h后,ADAM9的蛋白和核酸表达量增加显著(P<0.05),72 h恢复到接近正常水平。结论 ADAM9在对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤过程中表达呈显著变化,ADAM9可能起到促进肝损伤后修复的重要作用。 李三强 韩红梅 卢华杰 席守民关键词:对乙酰氨基酚 急性肝损伤 小鼠酒精性肝损伤过程中肝糖原的表达变化 被引量:4 2016年 目的研究肝糖原在小鼠酒精性肝损伤过程中的动态变化及意义。方法 60只雄性小鼠随机分为2组:正常组(n=10),模型组(n=50)。正常组小鼠直接处死取肝;模型组小鼠每天给予56度红星二锅头(15 m L·kg^(-1)),连续灌胃5周,建立酒精性肝损伤模型。于建模第1,2,3,4,5周,各处死10只,取肝组织。用糖原过碘酸雪夫氏(PAS)染色,检测各组肝组织切片中肝糖原的表达情况即平均光密度值(MOD)。结果与正常组的MOD值(0.22±0.04)相比,模型组第1周(0.19±0.06 vs 0.22±0.04,P<0.01),第2周(0.17±0.05 vs0.22±0.04,P<0.01),第3周(0.14±0.02 vs 0.22±0.04,P<0.01),可见肝糖原含量依次下降,至第3周(0.14±0.02)肝糖原含量最低;而模型组第4周(0.17±0.07 vs 0.14±0.02,P<0.01),第5周(0.19±0.03 vs 0.17±0.07,P<0.05)肝糖原含量呈上升趋势。结论小鼠酒精性肝损伤过程中,肝糖原的变化规律为先减少后增加。 尚付梅 李三强 卢华杰 姜雅坤 乔新杰 白淼水 霍续磊 李小苹 李思源 李英娇关键词:酒精性肝损伤 肝糖原 对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤过程中IL-6跨信号途径对PCNA表达的影响 被引量:4 2016年 目的研究IL-6跨信号途径在对乙酰氨基酚(acetaminophen,AAP)诱导的小鼠急性肝损伤过程中对增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法健康BALB/c雄性小鼠24只,随机分为4组(A组、B组、C组、D组),A组小鼠腹腔注射0.1 ml的PBS,B、C、D组小鼠均按500 mg/kg腹腔注射AAP溶液0.1 ml,C组小鼠提前1 h腹腔注射0.1 ml浓度为10μg/ml的IL-6跨信号途径的抑制剂sgp130Fc,D组小鼠提前1 h腹腔注射0.1 ml浓度为0.5μg/ml的IL-6跨信号途径的激动剂Hyper-IL-6。48 h后处死小鼠取肝脏,HE染色观察各组小鼠肝脏损伤情况,免疫组化法检测各组小鼠肝脏中PCNA的表达情况。结果与B组比较,C组小鼠肝脏损伤加重,D组小鼠肝脏损伤减轻。B、C、D组PCNA表达量明显高于A组(P<0.01),C组PCNA表达量低于B组(P<0.01),D组PCNA表达量明显高于B组(P<0.01)。结论 IL-6跨信号途径在AAP诱导的小鼠急性肝损伤过程中促进PCNA的表达,它可能有减轻肝脏损伤、保护肝脏的作用。 韩红梅 李三强 卢华杰 张勇勇 王秀秀 马曌关键词:对乙酰氨基酚 急性肝损伤 解整合素-金属蛋白酶9在阿奇霉素诱导的小鼠急性肝损伤过程中的表达分析 被引量:2 2013年 目的研究解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)在阿奇霉素诱导的小鼠急性肝损伤过程中表达的动态变化及作用。方法 50只小鼠随机分为2组:正常组10只,实验组40只。实验组小鼠腹腔注射40 mg·mL-1阿奇霉素溶液6,24,42和72 h,分别摘除小鼠眼球采血,分离2组血清,检测谷丙转氨酸(AST)和谷草转氨酸(ALT)活性;用免疫组化和RT-PCR等方法检测2组不同时间点小鼠肝脏中ADAM9在蛋白和核酸水平的表达变化。结果阿奇霉素注射小鼠后6h,ADAM9的表达量显著下降(P<0.05),表明肝细胞受到损伤;24 h肝脏损伤达到最大程度时,ADAM9的表达量仍然维持在较低水平(P<0.05);24~48 h随着肝脏进行修复和再生,ADAM9的表达逐渐增加,在注射阿奇霉素后42 h达到最大值(P<0.05),然后逐渐恢复到接近正常水平。结论 ADAM9在药物性肝脏损伤和修复过程中可能起到重要的作用。 李三强 王培智 舒友菊关键词:阿奇霉素 急性肝损伤 免疫组化法 解整合素-金属蛋白酶8在小鼠药物性肝损伤中的表达 被引量:2 2014年 目的研究对乙酰氨基酚(AAP)诱导的小鼠药物性肝损伤过程中解整合素-金属蛋白酶8(ADAM8)表达的动态变化。方法健康雄性小鼠分别腹腔注射550 mg·kg-1AAP溶液,制备小鼠药物性肝损伤模型,在注射后6,24,42,72 h,分别眼球采血,分离血清;同时分离正常组小鼠血清,检测2组血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;用蛋白印迹法和RTPCR法检测正常组小鼠和不同时间点的模型小鼠肝中ADAM8的表达变化。结果小鼠注射AAP后,血清中AST和ALT酶活呈先上升后下降的趋势。注射AAP6 h后,ADAM8的表达量显著上升(P<0.05),24 h达到最高峰(P<0.05),然后逐渐降低;至72 h又恢复到接近正常水平。结论 ADAM8在AAP诱导的小鼠药物性肝损伤过程中表达呈显著变化,可能起到促进肝损伤的重要作用。 李三强 崔旭红 杨兰泽 马曌 韩红梅关键词:对乙酰氨基酚 药物性肝损伤 蛋白表达 解整合素-金属蛋白酶9对急性酒精性肝损伤小鼠中肝细胞增殖的影响 被引量:3 2018年 目的研究解整合素-金属蛋白酶9对急性酒精性肝损伤小鼠中肝细胞增殖的影响。方法将小鼠随机分为3组,每组12只:正常组、模型组和实验组。正常组小鼠不做任何处理,实验组小鼠尾静脉注射筛选出的活性质粒,模型组小鼠尾静脉注射等量生理盐水;将模型组与实验组小鼠常规喂养3 d,通过一次经口灌胃56度红星二锅头24 m L·kg^(-1)来诱导小鼠急性肝损伤。在24 h末,对所有试验小鼠进行眼球取血,分离血清测定谷草转氨酶的活性;颈椎脱臼处死小鼠,取小鼠肝进行免疫组化法检测增殖细胞核抗原阳性细胞数量。结果正常组、模型组和实验组的小鼠血液中转氨酶活性分别为(95. 14±12. 28),(910. 36±20. 12)和(395. 42±23. 36) U·L^(-1);小鼠肝组织中每平方毫米PCNA阳性细胞数量分别为(45. 60±2. 42),(9. 84±1. 14)和(25. 26±1. 86)cell·mm^(-2),差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论解整合素-金属蛋白酶9可抑制急性酒精性肝损伤小鼠中肝细胞的增殖。 孙海宽 李三强 宋影 张勇勇 董冉杰 田张钰 王苑曦 邹锋 张炎 雷林子关键词:急性酒精性肝损伤 免疫组化法 增殖细胞核抗原在小鼠肝细胞癌发生中表达的变化及意义 2015年 目的研究增殖细胞核抗原(PCNA)在二乙基亚硝胺(DEN)诱导的小鼠肝细胞癌中表达的变化及意义。方法小鼠用含DEN的饮水连续诱癌24周。在诱癌后不同时间点,处死小鼠,分别用蛋白印迹法和逆转录聚合酶链反应检测小鼠肝PCNA蛋白与核酸的表达。结果 DEN诱癌后,小鼠肝组织中PCNA蛋白与核酸的表达逐渐增高,在第24周达高峰,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在DEN诱导的小鼠肝细胞癌过程中,PCNA的表达出现显著的动态变化,说明它可能在肝细胞癌的发生发展过程中起到重要作用。 马曌 李三强 徐正顺 吴秦川 胡景峰 付指辉 韩红梅 卢华杰关键词:肝细胞癌 增殖细胞核抗原 二乙基亚硝胺