国家自然科学基金(30973689)
- 作品数：12 被引量：90H指数：6
- 相关作者：王彩霞于漫周昕欣贾连群马巍更多>>
- 相关机构：辽宁中医药大学辽宁省中医研究院辽宁中医药大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞侵袭和MMP2、MMP9表达的影响被引量：11
- 2013年
- 目的:研究加味四君子汤含药血清对恶性黑色素瘤细胞B16侵袭及其相关机制的研究。方法:实验分为空白对照组、血清对照组、加味四君子汤4.61 g/kg、9.22 g/kg、18.44g/kg和顺铂5μg/ml组。分别应用MTT法确定药物最佳作用时间;Tran-swell实验检测B-16细胞侵袭能力,应用Western Blot方法检测基质金属蛋白酶(metalloprotease,MMP)2和9蛋白的表达。结果:加味四君子汤以剂量依赖方式抑制B16恶性黑色素细胞增殖,作用24h为最佳作用时间;与空白对照组和血清对照组相比,9.22 g/kg中药组、18.44g/kg中药组、5μg/ml顺铂组分别使B16细胞的侵袭能力显著降低,分别显著降低MMP2和MMP9蛋白表达水平,且两者呈现剂量依赖式降低,但5μg/ml顺铂组侵袭能力和MMP2和MMP9蛋白表达低于9.22 g/kg中药组,高于18.44g/kg中药组。结论:加味四君子汤含药血清能显著降低B16恶性黑色素瘤细胞侵袭,并且能够显著降低与B16恶性黑色素瘤细胞侵袭相关的蛋白MMP2和MMP9表达,提示加味四君子汤可能在抑制肿瘤侵袭转移中起着重要作用。
- 周昕欣王彩霞
- 关键词：加味四君子汤血清药理学MMP
- 脾阳虚证大鼠回肠水通道蛋白4表达变化研究被引量：7
- 2013年
- 目的:通过对脾阳虚大鼠回肠水通道蛋白4(AQP4)表达的检测,探讨脾阳虚证状态下大鼠水液代谢的影响。方法:对正常组、脾阳虚模型组、中药反证组分别行免疫组织化学、RT-PCR及Western blot的方法检测AQP4在回肠的表达及分布情况。结果:①脾阳虚状态下,大鼠回肠上皮细胞细胞膜的AQP4分布量显著减少,经温补脾阳中药治疗后,其分布量有所回升,但仍低于正常组。②脾阳虚模型组AQP4 mRNA及蛋白表达量均明显低于正常组(P<0.05)。中药反证组AQP4 mRNA表达量均明显高于模型组(P<0.05),蛋白表达虽然有所提高,但却没有统计学意义(P>0.05)。结论:脾阳虚证状态下大鼠回肠AQP4表达下调,导致回肠对水分的吸收出现障碍,提示可能与脾阳虚证的病理机制有关。
- 于漫王彩霞马巍
- 关键词：水通道蛋白4脾阳虚证WESTERNBLOT
- 脾阳虚证模型大鼠回肠的比较蛋白质组学探析被引量：12
- 2013年
- 目的基于蛋白质组学技术筛选与脾阳虚证相关的差异蛋白质,为进一步从分子水平上探讨脾阳虚证的本质提供有力的实验依据。方法 SPF级SD大鼠36只,随机分为正常对照组(16只)和脾阳虚证组(20只)。采用饮食不节、劳倦过度及苦寒伤阳药联合应用的方法,塑造脾阳虚证模型大鼠。分离、提取脾阳虚证组与正常对照组大鼠回肠的总蛋白,行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技术,应用DelyderTM2D6.5图像分析软件识别差异蛋白点,应用MALDI串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)技术获得相应肽质量指纹图,Mascot搜库鉴定差异蛋白质。结果经过统计学和模糊数学判定,脾阳虚大鼠模型造模成功。蛋白质组学初步鉴定,得到涉及细胞骨架、能量代谢及信号传导等多方面的差异表达的蛋白质8个,其中4个表达上调的蛋白分别是:结蛋白(desmin)、角蛋白8(cytokeratin 8,CK8)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)、埃兹蛋白(ezrin);4个表达下调的蛋白分别是:甘油醛三磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)、角蛋白1(cytokeratin 1,CK1)、肌动蛋白(actin)。结论脾阳虚证状态下机体能量代谢速率减慢,能量生成减少,回肠绒毛蛋白结构变化,吸收消化功能减弱,这可能是脾阳虚证的病理机制。
- 于漫吕凌王彩霞贾连群
- 关键词：脾阳虚证比较蛋白质组学回肠
- 补中益气汤治疗脾气虚证大鼠肌无力的机制研究被引量：11
- 2015年
- 目的：研究脾气虚证大鼠体重、肛温、耐寒冷存活百分率、游泳时间和骨骼肌磷酸化肌球蛋白轻链表达变化,明确补中益气汤治疗脾气虚证大鼠肌无力的可能机制。方法：清洁级Wistar大鼠,采用饮食不节和劳倦过度结合法建立脾气虚证模型,单日喂食甘蓝15-20 g/只,双日胃饲猪油脂3 m L/只,共15 d10造模成功后,实验分为正常组、脾气虚组和补中益气汤组（高、中、低3个剂量组,剂量分别为7.10,3.55,1.78 g·kg^-1）,灌胃给药10 d10分别检测大鼠体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间,Western blot检测骨骼肌中磷酸化肌球蛋白轻链的表达,比较实验结束前后数值变化。结果：与正常组相比,脾气虚组大鼠的体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间及磷酸化肌球蛋白轻链表达均显著下降（P〈0.05）;与脾气虚组相比,中、高剂量补中益气汤组的体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间及磷酸化肌球蛋白轻链表达均显著上升（P〈0.05）。结论：补中益气汤使磷酸化肌球蛋白轻链均表达升高可能是其治疗脾气虚大鼠肌无力的一个重要机制。
- 周昕欣王彩霞
- 关键词：补中益气汤脾气虚肌无力
- 初探李东垣脾胃学说理论被引量：6
- 2011年
- 李东垣,金元四大家之一,其创立的脾胃学说对后世影响很大。李东垣脾胃学说的理论基础,来自于《内经》,而张仲景、张元素的学术思想对李东垣影响也较深,尤以张元素的直接经验对李东垣医学理论体系的形成影响尤为深刻。李氏认为"脾胃为生化之源",人以胃气为本,人身机理活动的生理基础依赖于脾运胃纳。文章从该学说形成的时代背景、典籍和师承的启示及理论依据3方面对李东垣脾胃学说理论作以初探。
- 马巍王彩霞
- 关键词：脾胃学说理论渊源
- 脾气虚证大鼠回肠组织蛋白质差异性表达的实验研究被引量：6
- 2012年
- 目的采用蛋白质组学技术研究脾气虚证大鼠回肠组织蛋白的差异性表达。方法 37只大鼠随机分成3组,即正常对照组、脾气虚证模型组和利血平组。分别采用劳倦过度结合饮食不节和利血平注射液(1mg/mL)腹腔注射的方法建立脾气虚证动物模型,通过模糊数学方法鉴定后分离回肠组织,后采用双向电泳法分离差异表达的蛋白,凝胶银染后经选点、酶切和质谱分析,用MASCOT软件在蛋白质数据库中搜索肽质量指纹谱数据并确定蛋白质。结果脾气虚证模型组回肠组织蛋白质图谱中有3个蛋白点表达异常(P<0.05),利血平组回肠组织蛋白质图谱中有9个蛋白点表达异常(P<0.05)。结论脾气虚证的发生与白蛋白表达下调、胰蛋白酶和葡萄糖调节蛋白78表达上调有密切关系。
- 吕凌贾连群马巍宋雪娇崔永霞王彩霞
- 关键词：脾气虚证回肠蛋白质组
- 理脾阴正方对脾阴虚大鼠回肠水通道蛋白4表达及分布的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:通过对脾阴虚大鼠回肠水通道蛋白4(AQP4)表达分布的检测,探讨理脾阴正方对脾阴虚证大鼠水液代谢的影响。方法:对正常组、脾阴虚模型组、治疗组分别行免疫组织化学、RT-PCR及Western Blot的方法检测AQP4在回肠的表达及分布情况。结果:治疗组AQP4 mRNA及蛋白表达量均明显高于脾阴虚模型组(P<0.05);脾阴虚模型组AQP4 mRNA及蛋白表达量均明显低于正常组(P<0.05);脾阴虚模型组大鼠回肠上皮细胞细胞膜的AQP4分布量显著减少,治疗组其分布量有所回升,但仍低于正常组。结论:理脾阴正方可以在转录和翻译水平上调脾阴虚大鼠回肠AQP4表达,可能是其治疗脾阴虚证的作用机制之一。
- 于漫王彩霞宋雪娇
- 关键词：水通道蛋白4脾阴虚证
- 脾阴虚模型大鼠回肠的蛋白质组学差异性研究被引量：6
- 2014年
- 目的:探讨基于蛋白质组学技术的脾阴虚模型大鼠回肠组织的差异性蛋白表达。方法:SPF级SD大鼠23只,随机分为健康对照组和脾阴虚实验组。采用饮食不节加劳倦过度结合耗伤阴液的方法塑造脾阴虚证大鼠模型。经模糊数学评价方式判定后,分离出回肠组织,应用蛋白质组学技术,鉴定健康对照组与实验组回肠组织蛋白表达差异,经MASCOT搜库鉴定差异蛋白质。结果:脾阴虚实验组回肠组织发现6个差异表达蛋白点(P<0.05)。结论:脾阴虚证的发生与热休克蛋白90表达下调密切相关。
- 宋雪娇王彩霞
- 关键词：脾阴虚证蛋白质组学回肠
- 加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响被引量：22
- 2013年
- 目的:研究加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:应用血清药理学方法给药,37℃5%CO2的恒温培养箱中培养B16恶性黑色素瘤细胞,收集对数期细胞,终浓度10%的小鼠含药血清,分别作用12,24,48 h。实验分为空白对照组、血清对照组、加味四君子汤含药血清组(高、中、低3个剂量组)、顺铂组,每组含5个样本数。分别应用MTT法、流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果:加味四君子汤含药血清作用12,24,48 h,与同时间段空白对照组和血清对照组相比,以剂量依赖方式抑制B16恶性黑色素细胞增殖,中剂量加味四君子汤含药血清组24,48 h抑制率为50.22%,53.81%,且48 h与24 h相比没有显著性变化;与空白对照组和血清对照组相比,中、高剂量加味四君子汤含药血清组、顺铂组的凋亡率分别为(19.70±0.98)%,(25.21±1.03)%,(21.31±1.00)%,显著促进B16恶性黑色素瘤细胞的凋亡(P<0.05),但顺铂组凋亡率高于中剂量中药组,低于高剂量中药组。结论:加味四君子汤含药血清抑制B16恶性黑色素瘤细胞增殖;促进B16恶性黑色素瘤细胞的凋亡,这可能是加味四君子汤抗恶性黑色素瘤的机制之一。
- 周昕欣王彩霞
- 关键词：加味四君子汤血清药理学细胞增殖凋亡
- 从水通道蛋白4的表达探讨脾气虚证的机理被引量：4
- 2013年
- 目的:通过对脾气虚大鼠回肠水通道蛋白4(AQP4)表达的检测,探讨脾气虚证状态下大鼠水液代谢的影响。方法:对正常组、脾气虚模型组、中药反证组分别行免疫组织化学、RT-PCR及Western blot的方法检测AQP4在回肠的表达及分布情况。结果:①脾气虚状态下,大鼠回肠上皮细胞细胞膜的AQP4分布量显著减少,经补中益气汤治疗后,其分布量有所回升,但仍低于正常组。②脾气虚模型组AQP4 mRNA及蛋白表达量均明显低于正常组(P<0.05)。中药反证组AQP4 mRNA表达量均明显高于模型组(P<0.05),蛋白表达虽然有所提高,但却没有统计学意义(P>0.05)。结论:脾气虚证状态下大鼠回肠AQP4表达下调,导致回肠对水分的吸收出现障碍,提示可能与脾气虚证的病理机制有关。
- 于漫王彩霞崔永霞
- 关键词：水通道蛋白4脾气虚证免疫组化WESTERNBLOT
