国家自然科学基金(30660128)
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 相关作者：曹贵方杜晨光吕东媛赵鹏伟宋艳华更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学内蒙古医学院内蒙古大学更多>>
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- Ghrelin在绵羊卵母细胞体外成熟过程中对BCL-2、BAX的mRNA表达的影响被引量：1
- 2012年
- 为了探讨Ghrelin在绵羊卵母细胞体外成熟过程中与BCL-2、BAX的相关性及Ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中可能的作用机理,试验在绵羊卵母细胞成熟液中添加500 ng/mL Ghrelin,采用实时荧光定量PCR分别在0,8,16,24小时时检测卵母细胞BCL-2、BAX的表达量。结果表明:试验组添加Ghrelin后8,16小时时卵母细胞BCL-2 mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),但成熟后16,24小时时较8小时时有下降趋势;下降到24小时时,其表达量与0小时时没有显著变化(P>0.05);8,16小时时试验组与对照组比较差异显著(P<0.05),0,24小时时差异不显著(P>0.05)。试验组添加Ghrelin后8,16,24小时卵母细胞BAX mRNA相对表达量较0小时时下降,且差异显著(P<0.05),但成熟后16,24小时时与8小时时比较有上升趋势;在8,16小时时试验组较对照组BAX mRNA相对表达量均有所下降,且差异有显著性(P<0.05),而在0,24小时时差异不显著(P>0.05)。说明Ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中与BCL-2和BAX的表达存在相关性,推测Ghrelin在卵母细胞成熟过程中存在积极调控作用。
- 白瑞霞曹贵方米焱塔娜
- 关键词：GHRELIN卵母细胞卵丘细胞体外成熟实时定量PCRBAX
- 绵羊卵泡内Ghrelin的免疫组化定位被引量：5
- 2008年
- 为探索Ghrelin在绵羊各级卵泡的存在和分布,采用免疫组织化学技术研究了Ghrelin多肽在绵羊卵泡中的分布情况。结果表明,初级卵泡、早期生长卵泡和晚期生长卵泡均有Ghrelin表达,卵母细胞呈阳性信号,而在各级卵泡中颗粒细胞Ghrelin呈弱阳性信号。各级卵泡内Ghrelin的表达,提示Ghrelin在卵泡发育过程中可能具有一定作用。
- 杜晨光曹贵方
- 关键词：GHRELIN绵羊卵泡
- Ghrelin在绵羊体内卵母细胞和早期胚胎的表达被引量：5
- 2008年
- 为了明确ghrelin是否参与了卵母细胞成熟及胚胎早期发育进程,本研究利用免疫荧光技术和实时定量RT-PCR技术检测了绵羊卵母细胞和体内早期胚胎中ghrelin蛋白的表达定位和ghrelin mRNA水平相对表达变化规律。免疫荧光染色结果表明,ghrelin蛋白主要分布于卵母细胞胞质内;实时定量RT-PCR结果揭示绵羊卵母细胞和早期胚胎ghrelin mRNA的相对表达量依据发育阶段的不同而呈现一定变化规律,即在成熟卵母细胞,2细胞胚胎期和8细胞胚胎期显著高于未成熟卵母细胞和4细胞胚胎期(P<0.05),囊胚期表达量最高。卵母细胞和早期胚胎中ghrelin蛋白的表达及ghrelin mRNA特定的表达模式,揭示这一新型分子在绵羊卵母细胞成熟以及胚胎早期发育过程中具有潜在的调控作用。
- 杜晨光杨燕燕李海军鲍庆江郭宏儒曹贵方
- 关键词：GHRELIN绵羊卵母细胞胚胎实时定量RT-PCR免疫荧光染色
- 蒙古绵羊卵丘细胞ghrelin部分序列的鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了研究生长激素释放多肽(ghrelin)mRNA是否在蒙古绵羊卵丘细胞中表达,试验根据Gen-Bank中报道的绵羊ghrelin序列设计1对特异性引物,以蒙古绵羊卵丘细胞中的RNA为模板,采用实时定量RT-PCR技术扩增蒙古绵羊ghrelin的cDNA,并进行测序分析。结果表明:扩增得到的蒙古绵羊ghrelin cDNA为ghrelin的部分序列,将测序结果与已发表的绵羊ghrelin序列进行比对发现,233个碱基中有1个碱基的差异,该差异不影响翻译后多肽的序列;该cDNA片段包含长度为231 bp的开放读码框(ORF),编码77个氨基酸的绵羊ghrelin前原肽。
- 宋艳华杨井坤金璐娟王丽艳曹贵方杜晨光
- 关键词：CDNA克隆
- p90rsk-1在绵羊卵母细胞体外成熟过程中的表达
- 2011年
- 采用Western blotting检测p90rsk-1在绵羊卵母细胞体外成熟过程中的表达.实验分别在0h、8h、16h、24h检测绵羊卵母细胞p90rsk-1的表达量的变化,并进行统计学分析.结果p90rsk-1在绵羊卵母细胞体外成熟过程中均为阳性表达.随着成熟时间的延长,卵母细胞p90rsk-1在16h的相对表达量显著升高(P<0.05),但在24h又下降.因此推测Rsk在绵羊卵母细胞体外成熟过程中起一定的作用.
- 白瑞霞曹贵方赵鹏伟
- 关键词：绵羊卵母细胞体外成熟WESTERNBLOTTING
- 绵羊生殖道中ghrelin基因的克隆及其表达被引量：4
- 2008年
- 从雌性绵羊输卵管、子宫体、子宫颈、阴道组织中提取总RNA,根据已获得的绵羊ghrelin基因cDNA序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增出了绵羊ghrelin基因;将扩增产物克隆于pMD19-T载体后进行测序。以β-肌动蛋白(β-actin)基因作为内参,采用半定量RT-PCR法扩增ghrelin基因,经琼脂糖凝胶电泳后,应用凝胶成像分析系统计算雌性绵羊不同生殖道组织中ghrelin基因的表达量。结果显示,从雌性绵羊生殖道各组织均扩增出了233 bp的ghrelin基因片段;ghrelin基因在子宫体的表达量最高,输卵管内次之,子宫颈和阴道内最低。表明,ghrelin对雌性绵羊生殖系统的调节及生殖激素的分泌等具有重要作用。
- 吕东媛曹贵方李淑凤赵鹏伟
- 关键词：GHRELIN绵羊Β-肌动蛋白
- 蒙古绵羊大卵泡内颗粒细胞ghrelin mRNA的表达
- 2013年
- 为了探索ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中的潜在作用，试验采用实时荧光定量PCR（RT—PCR）技术对大卵泡（3乙箩咖）的壁层颗粒细胞和卵丘颗粒细胞ghrelinmRNA相对表达量进行分析。结果表明：壁层颗粒细胞和卵丘颗粒细胞ghrelinmRNA表达水平差异不显著（P〉0．05），ghrelin mRNA的相对表达量在排卵前无明显变化。
- 宋艳华刘剑郁曹贵方
- 关键词：蒙古绵羊卵母细胞颗粒细胞GHRELIN
- 绵羊卵母细胞和卵丘细胞体外成熟过程中ghrelin mRNA的表达被引量：3
- 2008年
- 运用实时定量RT-PCR技术检测了不同成熟培养时间绵羊卵母细胞和卵丘细胞ghrelin mRNA的相对表达量。结果表明,卵母细胞ghrelin mRNA相对表达量在16、24h呈现显著升高,而卵丘细胞ghrelin mRNA则随着成熟时间的延长表现显著降低。绵羊卵母细胞和卵丘细胞ghrelin mRNA的持续表达以及动力学变化提示这一新型分子在生殖功能上有潜在调控作用。
- 杜晨光曹贵方吕东媛宋艳华唐博火焱
- 关键词：GHRELIN卵母细胞卵丘细胞体外成熟实时定量PCR
