国家重点基础研究发展计划(07971002)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 相关机构：北京林业大学中国科学院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 拟南芥AtCBL9蛋白的原核表达纯化及其晶体生长研究
- 2011年
- 将拟南芥AtCBL9基因构建入原核表达载体pET-22b(+),在大肠杆菌中得到大量表达,用亲和层析和分子筛排阻层析2种方法对表达蛋白进行纯化。SDS-PAGE和动态光散射分析结果显示,AtCBL9蛋白在体外主要以单体和二体形式存在,单体和二体为同一蛋白,并具有较高的纯度。从单体蛋白中筛选出了微晶,为AtCBL9晶体生长优化及其最终结果解析和功能阐明奠定了基础。
- 赵子华赵田欣丁志强尚桂军聂荣鑫李娜
- 关键词：蛋白表达蛋白纯化晶体生长
- 福氏志贺痢疾杆菌硫胺素单磷酸激酶(ThiL)表达纯化及晶体生长研究被引量：1
- 2010年
- 硫胺素单磷酸激酶(ThiL)在ATP存在下催化硫胺素单磷酸(TMP)形成硫胺素焦磷酸(TPP)和ADP,硫胺素焦磷酸就是维生素B1的活性形式。硫胺素单磷酸激酶属于一个小的ATP结合蛋白超家族成员。将来源于福氏志贺痢疾杆菌2a(301株)ThiL基因构建入pET-22b(+)表达载体,在大肠杆菌中得到高效表达,经过两步纯化,得到高纯度蛋白,用于晶体生长,经过对其晶体生长条件进行摸索和优化,得到了能用于X-射线衍射的单晶,为其结构解析、催化机理研究和药物设计提供了基础。
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