国家自然科技资源平台项目(2005DKA21203)
- 作品数：6 被引量：40H指数：3
- 相关作者：张怡轩赵文倩王艳吴秀丽张磊磊更多>>
- 相关机构：沈阳药科大学北华大学四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科技资源平台项目“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一株转化井冈霉素产生井冈霉胺细菌的筛选与鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的筛选以井冈霉素为底物,转化产生井冈霉胺的菌株。方法通过以井冈霉素为碳源,富集培养能够利用井冈霉素的菌株,划线分离出单菌落。各种菌株转化井冈霉素后的产物经衍生化反应后以H PLC法分析。结果经过对225株细菌、真菌和放线菌的筛选,最终得到一株以井冈霉素为底物裂解产生井冈霉胺的菌株Y07B-0134。结论经形态学、生理生化鉴定和16S rDNA基因序列对比分析,确定该菌株为多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivorum)。
- 董至恒孙东阳高焕张怡轩
- 关键词：井冈霉素生物转化
- 人细胞内Ⅰ型血小板激活因子乙酰水解酶重组蛋白的构建、纯化及酶活性研究
- 2009年
- 目的构建人细胞内Ⅰ型血小板激活因子乙酰水解酶(PAF-AH)重组蛋白并加以纯化,利用不同底物研究酶活性。方法细胞内Ⅰ型PAF-AHβ亚基基因进行PCR扩增,目的基因经纯化、连接载体转化大肠杆菌DH5α感受态细胞构建重组蛋白,提取质粒行琼脂糖凝胶电泳、NdeⅠ和HindⅢ双酶切及测序鉴定。鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞诱导蛋白表达和纯化,15%SDS-PAGE和Western blotting鉴定。分别以乙酸苯酯、l-O-hexadecyl-2-deoxy-2-thioacetyl-sn-glycero-3-phosphocholine(2-Thio PAF)和1-myristoyl-2-(4-nitrophenylsuccinyl)phosphatidylcholine为底物(后两者为血浆型PAF-AH的商业化底物),应用分光光度法检测纯化后重组蛋白的酶活性,以血浆型PAF-AH作为阳性对照。结果人细胞内PAF-AHⅠ型β亚基重组蛋白构建正确,纯化后在大肠杆菌感受态细胞中诱导表达。与阳性对照血浆型PAF-AH比较,纯化后的重组蛋白同样能够水解乙酸苯酯,具有芳香酯酶活性;能快速水解2-Thio PAF,但不能水解1-myristoyl-2-(4-nitrophenylsuccinyl)phosphatidyl-choline。结论成功构建人细胞内Ⅰ型PAF-AH重组蛋白,其对血浆型PAF-AH的两个商业化底物具有完全不同的水解能力,以此可快速区分细胞内和血浆型PAF-AH。
- 陈晓莹徐静杨军伟张怡轩
- 关键词：重组蛋白纯化酶活性底物
- 一种真菌对人参皂苷Rg_3的转化被引量：25
- 2008年
- 【目的】筛选长白山人参土壤中的活性微生物,转化人参总皂苷及单体人参皂苷产生稀有抗肿瘤成份。【方法】从长白山人参根际土壤中分离各类菌株,对人参总皂苷及单体人参皂苷进行微生物转化,并通过硅胶柱层析等方法对转化产物进行分离纯化,采用波谱解析及理化常数对其进行结构鉴定;结合菌落形态、产孢结构、孢子形态特征以及菌株ITS rDNA核酸序列分析,对活性菌株进行鉴定。【结果】从长白山人参根际土壤中分离各类真菌菌株68株,有12株菌株对人参总皂苷有转化活性,其中菌株SYP2353对二醇组人参皂苷Rg3具有较强的转化活性。【结论】阳性菌株SYP2353被鉴定为疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria),能将人参皂苷Rg3转化为稀有人参皂苷Rh2及二醇组人参皂苷苷元PPD,为稀有人参皂苷Rh2的制备提供了新的方法。
- 吴秀丽王艳赵文倩张怡轩
- 关键词：人参皂苷RG3人参皂苷RH2生物转化
- 两株具有将人参皂苷Rg1转化为人参皂苷F1活性的真菌鉴定被引量：9
- 2010年
- 目的对两株具有将人参皂苷Rg1转化为人参皂苷F1的真菌进行菌种鉴定。方法通过菌落形态、产孢结构的观察及ITS-5.8S rRNA序列与Genbank中的rRNA序列进行同源比对,初步确定该两株菌的种属。结果与结论根据形态学特征及同源序列的比对确定菌株2246为菌核青霉(Penicillium sclerotiorum);菌株2367为Penicillium dipodomyicola。
- 张琪武玉久张磊磊沈小静赵文倩张怡轩
- 关键词：菌种鉴定真菌青霉RRNA
- 烟曲霉对伊曲康唑耐药机制的研究现况被引量：1
- 2009年
- 随着伊曲康唑等唑类抗真菌药的广泛使用,烟曲霉对其敏感度逐步降低,耐药性增强。对唑类抗真菌药作用机制的了解、体外敏感检验方法的标准化以及基因测序、RT-PCR等分子生物学方法的完善促进了对烟曲霉耐药机制的研究。烟曲霉耐药机制非常复杂,其中还有不少疑点尚待解决。本文主要针对烟曲霉对伊曲康唑的耐药机制进行综述。
- 景兰陈代杰
- 关键词：烟曲霉伊曲康唑耐药机制
- 抗结核新药SQ109、PA-824、OPC-67683与R207910研究进展被引量：7
- 2010年
- 近10余年来，由于HIV／AIDS的流行、移民、多种耐药结核菌的增多，以及不少国家和地区对结核病控制的忽视等因素，全球结核病形势急剧恶化，无论发达国家或发展中国家，结核病病人数都在增加。据世界卫生组织估算，全球已有近20亿人口受结核菌的感染，有2000万结核病人，每年新发生的结核病病人数为800～1000万人。结核病是一个全球性的严重公共卫生问题，现已引起国际社会的极大关注。
- 谭金哲董景涛
- 关键词：抗结核药物
