国家自然科学基金(30460095)
- 作品数：21 被引量：217H指数：9
- 相关作者：侯先志王海荣吕莉华王贞贞卢德勋更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学黑龙江八一农垦大学内蒙古农牧业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 分子生物学方法在瘤胃微生物研究中的应用被引量：6
- 2006年
- 文章综述了以16S rRNA序列分析技术为主的分子生物学技术在反刍动物瘤胃微生态研究中的应用现状,主要包括:序列分析技术、DGGE指纹技术、寡核苷酸探针杂交分析法以及定量PCR等分子生物学方法和技术。今后的发展趋势是加强这些方法间及其与传统方法的有机结合,并发展新的方法,促进瘤胃微生态研究的深入开展。
- 王海荣侯先志
- 关键词：瘤胃微生物DGGE定量PCR
- 体内驱除厌氧真菌对绵羊瘤胃微生物种群及发酵参数的影响被引量：1
- 2008年
- 选用6只体况良好、体重35 kg左右,年龄1.5岁左右的蒙古绵羊,研究体内驱除厌氧真菌对瘤胃微生物和发酵参数的影响。结果表明,驱除真菌导致绵羊瘤胃细菌总数和纤维分解细菌数量显著升高(P<0.05),毛口目原虫数量和原虫总数也明显增加(P<0.05),而内毛目原虫的数量没有变化。瘤胃内羧甲基纤维素酶的活力随厌氧真菌的消失而显著降低(P<0.05),但滤纸酶、木聚糖酶和果胶酶的活力并不受影响。驱除厌氧真菌后,瘤胃pH值和NH3-N浓度没有显著的变化(P>0.05);乙酸、丁酸和TVFA的浓度均出现下降,其中,乙酸浓度降低极为显著(P<0.01),其余两者表现为显著降低(P<0.05);丙酸浓度并没有受到驱除真菌的影响(P>0.05)。对乙酸与丙酸摩尔比例的比较显示,驱除厌氧真菌显著降低了乙酸/丙酸的值(P<0.05),说明驱除厌氧真菌改变了瘤胃内的发酵模式,使之更趋向于乙酸减少的方向进行。
- 高爱武侯先志杨金丽付琦
- 关键词：厌氧真菌瘤胃微生物瘤胃发酵
- 一株分解纤维素的肠球菌的分离鉴定被引量：9
- 2008年
- 从绵羊瘤胃内容物中分离出一株高效纤维素降解细菌.经形态学、生理生化反应和基因型的鉴定,鉴定为肠球菌属的一个种,其16S rDNA序列(1480 bp)在NCBI中的登录号为EU106047,并将所测得的序列用Clustal W软件按Neighbor-Joining方法构建了16S rDNA系统发育树.
- 刘占英侯先志刘玉承刘小刚杨帆赵子夫
- 关键词：纤维素降解细菌
- 绵羊瘤胃微生物基因组DNA提取方法的探讨被引量：8
- 2008年
- 本研究针对瘤胃内容物成分复杂、微生物种类繁多,且难于培养和分离这一特点,本着为采用免培养技术研究瘤胃微生物提供前期样本这一目的,对现在常用的五种基因组DNA提取方法进行了比较。试验结果得出应用珠磨-SDS/CTAB/PVP法所提瘤胃微生物基因组DNA质量及纯度较好,总DNA长度大于20kb,OD260/OD280在1.7以上。同时对所提的DNA应用PCR方法进行了检测,可以成功扩增出瘤胃中的古细菌、真细菌和真菌16/18SrDNA片断,进一步证明了此方法的优越性及可行性,为后续一些分子生物学试验提供质量较高的DNA模板。
- 吕莉华侯先志王海荣王贞贞高爱武
- 关键词：瘤胃微生物基因组DNA
- 定量检测瘤胃纤维降解细菌的RT-PCR法被引量：4
- 2008年
- 【目的】建立一种适用于瘤胃主要纤维降解细菌的RT-PCR定量检测方法,通过培养技术监测瘤胃纤维降解细菌在不同环境下的数量变化,为深入研究反刍动物瘤胃发酵机理以及对纤维素资源的有效利用提供技术支持。【方法】分别以Fibrobacter succinogenes、Ruminococcus flavefaciens与Ruminococcus albus的16SrDNA为靶序列设计相应的引物,建立SYBRGreenⅠRT-PCR定量体系。【结果】本研究所采用的引物及相应的PCR反应体系具有较高的特异性和灵敏度,检测极限可达50拷贝。采用RT-PCR方法检测瘤胃纤维降解细菌的定量结果与传统计数结果具有一致的变化趋势,相关性较高(r2=0.9591,P<0.05),表明RT-PCR定量检测方法可以较为准确、迅速的检测绵羊瘤胃纤维降解菌群的数量随环境变化的情况。【结论】本研究所建立的RT-PCR检测方法能够较准确反映瘤胃纤维降解细菌数量的变化。
- 吕莉华侯先志王海荣王贞贞高爱武
- 关键词：RT-PCR
- 瘤胃内3种主要纤维分解菌的研究进展被引量：5
- 2008年
- 作者阐述了瘤胃内主要纤维分解菌的生物学特性、对纤维物质的降解能力,并介绍了近几年国内外对这几种主要纤维分解菌的研究进展。
- 张迪刘大程卢德勋高明
- 关键词：瘤胃纤维分解菌
- 不同品质粗饲料日粮及添加酵母培养物对绵羊瘤胃内主要纤维素酶及纤维物质降解的影响被引量：22
- 2008年
- 研究不同品质粗饲料混合日粮及添加酵母培养物对瘤胃内几种主要纤维素酶酶活及纤维物质降解的影响。试验将带有永久瘤胃瘘管的9只绵羊随机分成3组,以粗饲料分级指数GI为指标对粗饲料品质进行划分,在精粗比为2:8条件下配制3种混合日粮,形成含高GI粗饲料日粮组(H组,粗料GI值=2.89)、含中GI粗饲料日粮组(M组,粗料GI值=1.73)和含低GI粗饲料日粮组(L组,粗料GI值=0.65)。利用DNS法研究瘤胃内几种主要纤维素酶酶活的变化以及对纤维物质降解的影响。试验结果表明:3个试验组木聚糖酶的活性在饲后2h内下降,以后逐渐升高,到8h时达到最高并保持平稳;滤纸酶活和果胶酶活与粗饲料品质之间没有明显的规律性;添加酵母培养物(YC)后能够增加木聚糖酶活和果胶酶活,而M组和L组滤纸酶活有减少的趋势,但差异均不显著(P>0.05)。由本研究可知:3个试验组随着粗饲料品质的升高,木聚糖酶活有增加的趋势;果胶酶活和滤纸酶活未表现出一定的规律性。添加酵母培养物后有提高木聚糖酶活和果胶酶活的趋势,3个试验组的DM、NDF、ADF有效降解率都有不同程度的增加。
- 冯伟业刘大程卢德勋侯先志高民
- 关键词：酵母培养物粗饲料品质
- 妊娠后期限饲母羊血液理化指标变化对其胎儿生长发育的影响被引量：14
- 2007年
- 选择经同期发情且同期受孕,在妊娠90天的健康蒙古绵羊100只,分为0.175MJME·kgw-0.75·d-1(限饲1组:restricted group 1,RG1),0.33MJME·kgw-0.75·d-1(限饲2组:restricted group 2,RG2)以及自由采食组(control group,CG)3个营养水平处理组,研究妊娠后期限饲母羊血液理化指标变化对其胎儿生长发育的影响.结果表明:妊娠后期随着摄入外源能量的降低,RG1和RG2组母羊体重、母体净失重均显著低于对照组(P<0.01).血中类胰岛素生长因子-1(IGF-1)、胰岛素(insulin,INS)浓度RG2和RG1组都不同程度的降低(P>0.05),而生长激素(growth hormone,GH)浓度都不同程度的升高,且在妊娠120天时,RG1组显著高于CG(P<0.05).母羊整个限制期RG2,RG1组血糖(glucose,GLU)浓度都低于CG组,其中妊娠120天时,RG1组与CG组差异显著(P<0.05).另外,RG2组母羊血中非酯化脂肪酸(nonesterified fatty acid,NEFA)及总氨基酸(total amino acid,TAA)浓度表现出高于CG组的趋势(P>0.05),而RG1组母羊血中NEFA和TAA浓度先降低而后又逐步升高超过对照组水平(P>0.05),表现出不同的变化趋势.本实验中,随着营养水平的降低,母体各项血液理化指标受影响程度逐步加深,这导致RG2(P<0.05),RG1(P<0.01)组羔羊平均初生重和胎儿平均日增重显著低于CG组.
- 高峰侯先志刘迎春
- 关键词：妊娠后期血液理化指标胎儿生长发育
- 利用定量杂交法检测绵羊瘤胃纤维细菌的研究被引量：4
- 2006年
- 实验利用通用细菌探针和3株纤维分解菌的特异性探针,初步建立起对瘤胃细菌进行检测的16S rRNA定量杂交的方法。试验将提取的总RNA按浓度系列稀释后与通用细菌探针进行杂交,检测结果所做的回归分析表明,杂交信号与尼龙膜上的所点RNA的量具有明显线性关系。同时对几份瘤胃样品进行3种纤维分解菌的初步定量检测,结果显示3种纤维分解菌的相对丰度与前人报道相似,表明该方法能够对瘤胃细菌进行定量分析,可在后续相关研究中使用。
- 王海荣侯先志高爱武吕莉华郭媛
- 关键词：RRNA寡核苷酸探针瘤胃细菌
- 不同氮源对绵羊瘤胃内固液相纤维素酶活的影响被引量：9
- 2008年
- 本论文旨在研究不同氮源对绵羊瘤胃内固、液相纤维素酶活的影响。选择体况良好,体重50kg左右的苏尼特绵羊9只,随机分成3组,分别饲喂以鱼粉、棉粕和豆粕为主要氮源的日粮。试验分别用瘤胃内容物(液体部分)和瘤胃内容物经两层纱布过滤后的残渣(固相部分)制取酶液,采用DNS(3,5-二硝基水杨酸)还原糖法测定酶活。在39℃,pH6.8,反应1h,煮沸5min,冷却5min条件下,于530nm处比色测定瘤胃内CMC(羧甲基纤维素酶)、滤纸酶、果胶酶、葡萄糖苷酶和木聚糖酶的活性。结果表明:氮源对绵羊瘤胃固相纤维素酶活影响显著,Ⅱ组(棉粕)的滤纸酶、果胶酶、葡萄糖苷酶和木聚糖酶的活性显著高于Ⅰ组(鱼粉)(p<0.05)。固、液相部分来源的纤维素酶活差异很大,固相部分的纤维素酶活数值大概是液相部分的10倍。
- 王贞贞侯先志王海荣吕莉华
- 关键词：羧甲基纤维素酶果胶酶糖苷酶木聚糖酶
