国家自然科学基金(30973563)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
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- 基于Tet-On Advanced的肺癌细胞15-脂氧化酶-2基因表达载体的构建与表达
- 2013年
- 目的:构建肺癌细胞15-脂氧化酶-2(15-Lox-2)的可诱导性真核表达载体pTRE-Tight-15-Lox-2,并在肺癌细胞中检测其是否可受强力霉素(DOX)诱导表达。方法:pcDNA3-15-LOX-2载体经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切线性化,回收15-LOX-2 cDNA片段,将其克隆入pTRE-Tight载体的EcoRⅠ和XbaⅠ位点;采用脂质体法将pTet-On-Advanced与构建的pTRE-Tight-15-Lox-2共转染肺腺癌A549细胞,DOX诱导表达后,Western印迹检测15-Lox-2的表达水平。结果:构建了pTRE-Tight-15-Lox-2诱导表达载体;Western印迹检测表明,该载体能在肺癌细胞内表达,且其表达受DOX调控。结论:Tet-On Advanced系统能严密高效地调控15-LOX-2在肺癌细胞中的表达,为进一步研究15-LOX-2在肺癌中的作用奠定了基础。
- 杨玉花魏晓莉郑建全
- 关键词：TET-ON肺癌A549细胞
- 脂氧合酶代谢与肺癌研究进展被引量：2
- 2012年
- 脂氧合酶(LOX)是非血红素铁双加氧酶,能催化底物生成各种类花生酸物质,在肺癌预防和治疗中发挥重要作用,有望成为新的抗肺癌药物作用靶点。根据氧分子插入底物的位点不同,人类LOX主要分为5-LOX、12-LOX和15-LOX,5-LOX和12-LOX具有促进肺癌细胞生长和肿瘤转移的作用,而15-LOX的两种亚型15-LOX-1和15-LOX-2主要具有抗肺癌的作用。本文主要综述了各种LOX代谢通路在肺癌发生发展中的作用特点。此外,还介绍了LOX依赖氧化应激、过氧化物酶体增殖物活化受体和P53的抗肺癌机制及其作为肺癌药物作用靶点的研究进展。
- 杨玉花魏晓莉郑建全
- 关键词：脂氧合酶肺癌
- 多硫代二酮哌嗪类化合物C87体外对肿瘤细胞生长的抑制作用及对活性氧产生的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究多硫代二酮哌嗪类化合物C87对肿瘤细胞生长的影响及其可能机制。方法用磺酰罗丹明B法观察C87 0.05~1μmol·L-1与A549,HCT116,He La和SMMC7721作用24,48和72 h对肿瘤细胞存活率的影响,并计算50%生长抑制浓度（GI50）;用流式细胞术检测C87 0.1~2.5μmol·L-1作用HCT116和He La细胞6 h,C87 2.5μmol·L-1作用0~6 h活性氧（ROS）的生成量;用流式细胞术检测C872.5μmol·L-1伴随给予抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）作用HCT116和He La细胞6 h ROS的生成量;用SRB法观察C87 0.05~1μmol·L-1伴随给予NAC作用24和48 h对HCT116细胞存活率的影响。结果C87 0.05~1μmol·L-1作用24,48和72 h,可明显抑制A549,HCT116,He La和SMMC7721细胞存活（P〈0.05）,且具有浓度依赖性（72 h,r2=0.946,0.989,0.973和0.984,P〈0.05）;C87 1μmol·L-1与上述4种肿瘤细胞作用24,48和72 h能时间依赖性地抑制细胞存活（r2=0.983,0.956,0.951和0.873,P〈0.05）。C87 0.25~2.5μmol·L-1与He La细胞和HCT116细胞作用6 h,可诱发细胞内ROS产生,且呈浓度依赖性（r2=0.760,P=0.045;r2=0.987,P=0.001）;C87 2.5μmol·L-1作用0.5~6 h,诱导ROS的产生呈时间依赖性（r2=0.886,P=0.017;r2=0.994,P=0.000）。给予抗氧化剂NAC后能明显抑制C87引起的He La细胞和HCT116细胞ROS生成（P〈0.05）,NAC 5和10 mmol·L-1可明显逆转C87引起的HCT116细胞死亡,GI50值明显增大,作用24 h时GI50为1.446和1.134μmol·L-1（C87处理组为0.513μmol·L-1）;处理48 h时GI50为0.882和1.166μmol·L-1（C87处理组为0.333μmol·L-1）。结论化合物C87对A549,HCT116,He La和SMMC7721肿瘤细胞的生长具有抑制作用,其机制可能与其诱导细胞内氧化应激有关。
- 高艺洋魏晓莉杨晓雯任凤霞郑建全郑志兵苏瑞斌
- 关键词：活性氧
- hERG钾通道在肿瘤发生、发展及靶向治疗中的作用研究进展被引量：2
- 2013年
- herg基因是进化保守的电压门控外向整流钾离子通道的Ether—a-go-go（eag）家族成员之一，其编码的hERG钾通道是一种特殊类型的钾通道，具有内向整流特性。大量研究表明，hERG钾通道选择性表达于多种组织来源的肿瘤细胞，而在相应来源的正常组织细胞中不表达，参与调节肿瘤细胞的发生、发展，现将hERG钾通道在肿瘤发生、发展中的作用及设计靶向性hERG钾通道肿瘤治疗的策略进行综述。
- 孙洪良马芸张宝和王吉胡瑞兰魏晓莉郑建全
- 关键词：HERG钾通道肿瘤靶向治疗
