江苏省自然科学基金(BK2007244)
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：江苏省人民医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰素调节因子的抑制肿瘤作用被引量：4
- 2007年
- 干扰素(interferon,IFN)具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,是机体防御系统的重要组成部分。目前,基因工程生产的干扰素已广泛应用于临床治疗多种肿瘤。干扰素调节因子(IRF)家族在IFN的诱导表达中起着重要的调节作用。已发现了9个IRF成员,其中IRF-1和IRF-2的表达水平与宫颈癌、乳腺癌等有关;IRF-3与食管癌、宫颈癌等密切相关;IRF-5可以抑制B细胞淋巴瘤;IRF-7与乳腺癌相关;IRF-8和IRF-4参与慢性髓细胞性白血病的发病机制。
- 任伟周国平
- 关键词：干扰素调节因子干扰素肿瘤
- 人干扰素调节因子3基因启动子的初步鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的克隆并鉴定人干扰素调节因子3（IRF3）基因启动子，为进一步研究其转录调控机制奠定基础。方法用BLAST分析软件进行序列比较和同源分析不同种系IRF3启动子序列，以人类基因组DNA为模板，通过PCR定向克隆和酶切亚克隆策略，构建了覆盖IRF3基因5’侧翼区转录起始位点上游1kb区域的一系列IRF3启动子虫荧光素酶报告基因重组体并瞬时转染宫颈癌HeLa细胞，用虫荧光素酶检测报告基因启动子的活性。结果在人、小鼠的IRF3推断的启动子区域进行同源比较发现，推断的E2F和GATA-1高度进化保守；启动子活性分析表明，IRF3启动子区域定位于主要转录起始位点区域前111～167bp的区域内。采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明，该区域内存在E2F转录因子结合位点。结论-167～111bp区存在IRF3启动子的核心调控元件，转录因子E2F可能参与IRF3的转录调控。
- 徐华国任伟陆超周国平
- 关键词：转录调控
- E2F1基因真核表达载体的构建及其对CD2AP启动子的影响
- 2011年
- 目的构建E2F1基因真核表达质粒,并初步探讨E2F1对CD2相关蛋白(CD2AP)启动子的作用。方法 RT-PCR扩增E2F1基因,构建含E2F1基因的重组真核表达质粒,重组质粒转染人胚肾HEK-293细胞。Western blot检测E2F1蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测E2F1过表达后人CD2AP启动子的活性。结果核酸序列分析及Western blot结果证实,成功构建含E2F1基因的重组真核表达质粒;过表达E2F1能增强CD2AP启动子的活性。结论 E2F1编码基因在HEK-293细胞中获得正确表达,且E2F1蛋白可促进人CD2AP启动子的转录活性。
- 邹黎金蕊任伟王怡朱亮华李悦周国平
- 关键词：E2F1CD2相关蛋白肾小球硬化
- 干扰素调节因子3第二内含子中新启动子在人胚肾AD-293细胞中的功能特征
- 2011年
- 目的构建包含人干扰素调节因子3(IRF-3)基因第二内含子中新启动子的质粒,研究其功能特征。方法以人类基因组DNA为模板,PCR定向克隆和酶切亚克隆构建IRF-3基因第二内含子内新转录起始位点上游的新启动子基因重组体,并瞬时转染人胚肾AD-293细胞。荧光素酶检测报告基因启动子的活性,计算相对活性单位(RLU)。结果成功构建含有新启动子区的质粒,与pGL3-Basic组相比,新启动子活性明显增强,并定位于新转录起始位点前-317～-110bp,且该区域内存在环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)和GATA等转录因子结合位点。结论 IRF-3第二内含子内新转录起始位点上游具启动子活性;在-317～-110bp区域存在必需调控元件,并且CREB和GATA等转录因子可能参与其转录调控。
- 王怡任伟金蕊徐华国邹黎周国平
- 关键词：干扰素调节因子3启动子转录调控
- ORMDL3基因第一内含子中新启动子区的鉴定
- 2012年
- 目的构建表达血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因第一内含子中新启动子区的质粒,并研究其功能特征。方法以人基因组DNA为模板,PCR扩增ORMDL3基因第一内含子内新转录起始位点上下游776bp启动子区片段,酶切并连接此片段至pGL3-basic载体,构建含有ORMDL3基因第一内含子中新启动子区的基因重组体,并转染人胚肾293细胞。荧光素酶检测报告基因启动子的活性,计算相对活性单位。生物信息学方法分析转录因子结合位点。结果成功构建含有新启动子的重组质粒。与pGL3-basic空载体相比,新启动子活性明显增强,并定位于转录起始位点-363bp至-63bp之间,且该区域存在Sp1、GATA-1等转录因子的结合位点。结论 ORMDL3基因第一内含子中新转录起始位点上游具有启动子活性,在-363bp至-63bp区域存在转录调控元件,且Sp1、GATA-1等转录因子可能参与其转录调控。
- 袁文霄金蕊庄丽丽徐华国任伟周国平
- 关键词：哮喘
- 干扰素调节因子-3启动子区序列分离、鉴定及在人类胚胎肾-293细胞中启动活性分析
- 2009年
- 目的构建表达干扰素调节因子-3(IRF-3)基因转录起始位点上游启动子的表达质粒,转染人类胚胎肾(human embryonic kidney,HEK)-293细胞,评价其启动子活性。方法以人全血细胞总DNA为模板,PCR扩增IRF-3转录起始位点上游1 000 bp的启动子区片段。亚克隆此片段至无启动子活性的pGL-3基本载体荧光素酶报告基因上游的多克隆位点,构建含IRF-3启动子的重组报告质粒。转染HEK-293细胞,行荧光素酶活性检测,计算相对活性单位(RLU)。生物信息学分析转录因子结合位点。结果酶切,测序鉴定证实成功构建含有IRF-3基因转录起始位点上游1 000 bp的启动区的表达质粒。IRF-3的启动子与正常的pGL-3基本质粒比较,其RLU增加了42.2倍。其上游启动子区序列中含多个转录因子结合序列如GATA-1、Sp1和E2F等。结论IRF-3转录起始位点上游序列在HEK-293细胞中具有较强的启动活性。
- 任伟徐华国陆超周国平
- 关键词：启动子
- 儿童急性白血病发病机制的研究进展被引量：2
- 2010年
- 急性白血病是儿童最常见的恶性肿瘤之一,其病因及发病机制仍未完全明确.目前已证明大部分急性白血病有克隆性染色体异常,TEL/AML1、BCR/ABL、PML/RAR-α等是常见的融合基因,通过对其检测可指导疾病诊疗和预后判断.近期的研究发现基因多态性也与白血病的易患性相关,如叶酸代谢相关基因、细胞色素P450和谷胱甘肽s-转移酶、苯醌氧化还原酶-1等.此外,酒精、烟草、肿瘤坏死因子α、干扰素均是致白血病发生的潜在危险因素,而干扰素调节因子-3和婴幼儿早期感染则也许能减少白血病的发生.
- 邹黎周国平
- 关键词：白血病融合基因基因多态性细胞因子
- 干扰素调节因子3的激活被引量：1
- 2010年
- 干扰素调节因子3(interferon regulatory factor-3,IRF-3)是调节Ⅰ型干扰素基因表达的关键转录因子,它的活化将影响IFN基因的表达。IRF-3的磷酸化受多条信号转导通路及相关分子的调控。在有关的调控中,RIG-I/MDA-5-MAVS与IRF-3的活化关系较为密切,RIG-I/MDA-5识别病原相关分子模式(PAMP),经中间蛋白质MAVS激活下游激酶复合体TBK1/IKKε,通过不同机制活化转录因子IRF-3。在此通路中,有TRAF3、NEMO、TRADD等分子参与,最近有研究发现,TRAF5、STING、WDR5亦参与调控,在调节IRF-3的活化过程中发挥重要作用。通过对IRF-3激活的研究,将有助于阐明病毒诱导机体产生先天性免疫和特异性免疫的分子机制。
- 王怡周国平
- 关键词：干扰素调节因子3信号通路
