国家高技术研究发展计划(2007AA100505)
- 作品数:42 被引量:130H指数:5
- 相关作者:石德顺王晓丽董雅娟柏学进廖玉才更多>>
- 相关机构:广西大学华中农业大学青岛农业大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划广西青年科学基金山东省科技攻关计划重大科技专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 轮状病毒VP7-U基因在胡萝卜中表达的免疫原性分析被引量:3
- 2012年
- 轮状病毒是一种危害人类健康的腹泻病毒,缺乏可控性药物。将优化部分密码子的轮状病毒VP7基因(VP7-U基因)整合到胡萝卜(Daucus carota)植株中,并利用PCR、Western blot、ELISA等方法检测转VP7-U基因胡萝卜的蛋白表达情况。然后利用不同浓度的阳性VP7-U胡萝卜蛋白灌服小鼠,以灌服正常胡萝卜植株蛋白的小鼠为阴性对照,以灌服阳性细菌蛋白的小鼠为阳性对照,灌服4次后利用ELISA方法检测小鼠体内的IgG含量。结果表明,转VP7-U基因的胡萝卜植株在蛋白水平上有目的抗原的表达并且其表达含量有一定的增加。灌服阳性胡萝卜蛋白的小鼠IgG含量高于灌服阴性胡萝卜蛋白的小鼠,但低于灌服阳性细菌蛋白的小鼠。然而统计分析表明,阳性小鼠同阴性小鼠体内的IgG含量差异不显著。转基因胡萝卜口服疫苗的发展还有很多困难,需进一步深入研究。
- 刘满杏李霞刘荣堂杨慧赵丽李鹏
- 关键词:转基因胡萝卜口服疫苗
- 广西三黄鸡胸腺、法氏囊中肥大细胞的异质性被引量:2
- 2011年
- 应用常规甲苯胺蓝(RTB)、改良甲苯胺蓝(MTB)、醛品红-阿利新蓝(AF-AB)、阿利新蓝-高碘酸雪夫氏反应(AB-PAS)等组化染色法证实,在广西三黄鸡胸腺、腔上囊的实质中存在大量的肥大细胞,不同器官中的肥大细胞各有其分布特点,并且在形态大小、异染性、颗粒的黏多糖成分、染色特性等方面具有异质性,表明鸡胸腺和法氏囊中的肥大细胞可能存在不同的亚型。
- 王晓丽李波黎江周石琼魏晓瑞潘红平石德顺
- 影响水牛胎儿成纤维细胞转染效率的因素被引量:4
- 2008年
- 实验对电穿孔法和阳离子脂质体法转染水牛胎儿成纤维细胞的条件进行了系统摸索,获得了较好的DNA转染参数。电穿孔法转染时脉冲时间为15ms,电场强度为40~50V/m时,细胞的死亡率处于20%~50%之间,比较适合外源DNA转入水牛胎儿成纤维细胞。将脂质体与DNA的比例控制在8μL:2μg,可获得较高的转染率。相同培养条件下,脂质体法比电穿孔能获得更多的转基因抗性细胞集落,转染DNA的纯度和细胞的状态也明显影响脂质体法的转染效率。
- 崔奎青刘庆友汤刚彬谢体三石德顺
- 关键词:转基因细胞转染电穿孔法脂质体法
- 不同成熟时间水牛卵母细胞成熟与凋亡的比较
- 2010年
- 为了解卵母细胞体外成熟与凋亡过程,进而提高卵母细胞体外成熟率,本试验研究了不同成熟时间水牛卵母细胞体外核、质成熟与凋亡的情况。结果表明:培养24 h,卵母细胞核、质成熟率分别达到61.4%和59.8%,与其他各时间组对比差异显著(P<0.05),凋亡率也呈增加趋势,但差异不显著(P>0.05)。
- 王晓丽黎江周石琼孟凡丽潘红平陆凤花石德顺
- 关键词:卵母细胞凋亡
- 禽流感病毒表面抗原HA基因转化小麦的初步研究
- 2011年
- 为了建立利用小麦生产禽流感口服疫苗的方法,选择禽流感病毒H5N1亚型表面抗原HA基因,与谷类作物启动子构建小麦表达载体,经基因枪法转入我国小麦栽培品种郑9023幼胚,在含5 mg/L草铵膦愈伤诱导培养基和分化培养基及含4 mg/L草铵膦生根培养基上筛选后,PCR鉴定获得转HA基因植株,Southern杂交分析转基因T1代植株证实,外源HA基因确已整合到小麦基因组中。
- 常向博廖玉才李和平
- 关键词:禽流感病毒基因枪转化小麦植物生物反应器
- 利用微卫星标记对4个肉牛品种进行遗传多样性分析被引量:6
- 2010年
- 本研究利用10个微卫星标记分析了鲁西黄牛、布莱凯特肉牛、渤海黑牛和日本和牛4个品种185个个体的品种内遗传变异情况及各品种间的亲缘关系,共检测到58个等位基因,每个位点平均观察等位基因数为5.8个,从4(BM1818)到8个(ETH225和TGLA53)不等;有效等位基因数为2.5417~3.5849个;观察杂合度、期望杂合度和多态信息含量变异范围分别为0.2270~0.5459、0.6082~0.7230和0.5482~0.6791,均属高度多态性位点。群体间遗传分化明显,有34.49%的遗传分化来自群体间的变异。以Nei氏遗传距离(DA)构建UPGMA系统进化树,聚类结果表明,渤海黑牛与鲁西黄牛首先聚为一类,布莱凯特肉牛和日本和牛聚为一类。布莱凯特肉牛的3个微卫星座位10个克隆的PCR扩增片段测序获得的序列已提交GenBank,登录号分别为:GQ368896、GQ368897、GQ368898、GQ368899、GQ368900、GQ368901、GQ368902、GQ368903、GQ368904、GQ368905。10对微卫星座位可作为有效的遗传标记用于4个肉牛品种的遗传多样性和系统发生关系分析。
- 董懿为董雅娟柏学进李兴芳封纪武肖超柱
- 关键词:微卫星标记克隆
- 甘蓝型油菜叶片组织培养体系的优化被引量:2
- 2014年
- 以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)叶片为材料,分析了影响油菜叶片离体培养的关键因素———基因型、基本培养基、激素配比及外植体取材时间,优化了油菜叶片组织培养体系。结果表明,最佳分化培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,分化率达75.2%,成苗率达28.1%;生根培养基为1/2 MS+1 mg/L IBA,生根率达100%。同一品系不同苗龄的外植体不定芽分化率和成苗率均存在显著差异,F4品系苗龄为22 d的叶片可以作为组织培养体系的最佳外植体。
- 申静静廖玉才李和平
- 关键词:NAPUS叶片
- 不同供体核对牛核移植胚胎发育的影响
- 为进一步提高核移植效率,寻求一种更高效的核移植供体细胞。分别以荷斯坦奶牛胎牛的骨髓间充质干细胞(MSCs),肌肉细胞(MCs),乳腺上皮细胞(MECs)为供体核进行核移植,记录分析核移植重构胚的卵裂率、桑葚胚率、囊胚率。...
- 王文明董雅娟柏学进村上正夫刘玮张守宝董懿为
- 关键词:骨髓间充质干细胞肌肉细胞乳腺上皮细胞核移植
- 文献传递
- GMP玻璃化冷冻对水牛MⅡ期卵母细胞冷冻损伤和体外发育能力的影响被引量:4
- 2009年
- 将体外成熟(IVM)24h的水牛卵母细胞随机分成对照组、冷冻剂毒性试验组、GMP玻璃化冷冻组,研究玻璃微细管法(GMP)冷冻对水牛MⅡ期卵母细胞冷冻损伤和体外受精后发育能力的影响。结果表明:冷冻剂毒性试验组的存活率显著高于GMP玻璃化冷冻组;在透明带消化时间上,冷冻剂毒性试验组和GMP玻璃化冷冻组显著高于对照组。在单精入卵率上,冷冻剂毒性试验组和GMP玻璃化冷冻组显著低于对照组;在无精子入卵率上,冷冻剂毒性试验组和GMP玻璃化冷冻组与对照组差异显著;而多精入卵率3组间差异不显著。卵母细胞冷冻后进行体外受精,3组之间的2-细胞率,8-细胞率和桑椹胚率差异均极显著。表明冷冻剂和GMP玻璃化冷冻均会引起水牛MⅡ期卵母细胞透明带硬化,降低精子穿透率和其体外受精的发育能力。
- 杨素芳陈华海蒋建荣冯贵学陈焕华陈玉卞桂华石德顺
- 关键词:水牛GMP
- 促卵泡素分泌细胞在广西摩拉水牛脑垂体中的分布与定位
- 2011年
- 采用免疫组织化学SABC法并结合DAB显色技术对广西摩拉水牛脑垂体结构和促卵泡素分泌细胞进行了研究和定位。结果发现,广西摩拉水牛的垂体前叶由远侧部、结节部和中间部构成,远侧部占据了腺垂体的大部分。垂体促卵泡素免疫阳性细胞分布广泛,以垂体前叶远侧部分布较多,从而表明广西摩拉水牛整个垂体都有促卵泡素分泌,主要分泌部位在垂体前叶的远侧部。
- 王晓丽黎江蒋建荣周石琼潘红平石德顺
- 关键词:促卵泡素垂体免疫组化