国家自然科学基金(30340019)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：朱汝南钱渊邓洁赵林清王芳更多>>
- 相关机构：首都儿科研究所首都儿科研究所附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 北京地区部分儿童严重急性呼吸综合征的血清学研究被引量：1
- 2006年
- 目的 确定临床诊断为严重急性呼吸综合征（SAILS）患儿感染的病原是否为SAILS相关冠状病毒（SAILS-CoV）；同时探讨儿童sARS患者的传播能力。方法2003年6-8月收集到的SAILS患者及其接触者血清标本177例，同时期的来源于非疫区择期手术儿童血清标本49例，以及无SAILS接触史的北京健康儿童血清标本93例，SAILS流行前儿童血清标本90例，总计409例。应用不同方法（包括酶联免疫吸附实验、间接免疫荧光、Western-blot等）、不同单位生产的试剂盒测定抗SAILS-CoV抗体。结果不同检测方法中，SAILS．CoV特异性IgG抗体阳性率在SAILS患儿中为39．1％-43．5％。成人SAILS患者中为57．1％-71．4％；与SAILS患儿接触的儿童中均为阴性。与SAILS患儿接触的成人中为6．0％-9．0％；与成人SAILS接触的儿童中为0-9．7％；与成人SAILS接触的成人中为4．4％-7．1％；同时期的正常儿童与非疫区择期手术儿童以及SAILS流行前的正常儿童血清标本用不同方法和试剂检测结果不尽相同。结论临床诊断为SAILS的患儿SAILS-CoV特异性IgG抗体阳性率（40％左右）明显低于临床诊断为SAILS的成人患者。提示在流行期间有相当一部分儿童sARS实际上是由其他的呼吸道病毒感染所致。与成人sARS接触的儿童和成人中，有一部分SAILS抗体为阳性，提示可能存在SAILS-CoV的隐性感染。目前已推广使用的SAILS诊断试剂对于儿童SAILS诊断的正确性还需要进一步的验证。
- 赵林清钱渊朱汝南邓洁王芳陈慧中曹力王天有张霆
- 关键词：严重急性呼吸综合征儿童试剂盒免疫球蛋白G
- 基因检测在儿童严重急性呼吸综合征疑似病例诊断中的应用被引量：4
- 2003年
- 目的 通过病原学检测鉴别诊断严重急性呼吸综合征 (SARS)。方法 对 1例没有明确SARS接触史 ,入院时临床诊断疑为“支原体肺炎”的患儿进行病原学鉴别诊断。 (1)对患儿的咽拭子标本进行常见呼吸道病毒 (包括呼吸道合胞病毒、甲、乙型流感病毒、腺病毒和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型副流感病毒 )的抗原检测。 (2 )用RT PCR进行人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒的检测。 (3)采用巢式RT PCR方法 ,进行SARS病毒基因检测。根据WHO在网上公布的SARS冠状病毒复制酶基因 1b区合成3对引物 ,其中 1对为所有冠状病毒所保守的 ,用来进行第一次PCR ,另 2对为SARS冠状病毒所特异的 ,分别用于第二次PCR ,这 2对引物可分别扩增 36 8和 348bp的基因片段。结果 患儿咽拭子标本 7种常见呼吸道病毒和人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒的检测结果均为阴性 ,而用不同引物对检测 ,SARS冠状病毒基因均为阳性。经测序显示 ,该基因片段与GenBank已公布的 17株SARS冠状病毒的序列同源性为 10 0 % ,而与人冠状病毒的标准株有很低的同源性。同时该患儿的恢复期血清SARS冠状病毒特异性IgM和IgG均为阳性。结论 从患儿标本中未检测到常见的 7种呼吸道病毒、人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒 ,而检测到了SARS冠状病毒。经病原学检测 ,确诊患儿为SARS。
- 朱汝南钱渊邓洁赵林清王芳曹力王天有陈大坤张琪
- 关键词：基因检测儿童严重急性呼吸综合征疑似病例
- 北京地区人偏肺病毒膜表面糖蛋白G编码基因和特征的分析被引量：4
- 2006年
- 为了解北京地区人偏肺病毒（hMPV）膜表面糖蛋白G编码基因的特征，提取2003年和2004年各6份hMPV阳性的临床呼吸道标本中的RNA，经用随机引物合成cDNA后，用特异性引物扩增G蛋白全基因，克隆至pBST载体中并进行测序。用生物软件与GenBank中hMPV的基因序列进行比较和种系进化分析。12株hMPV可以分为两个主要的进化簇1和2。每个进化簇还可以再分为不同的亚进化簇。3株（2003年）hMPV属于进化簇1；9株（3株2003年和6株2004年）hMPV属于进化簇2。这12株hMPV G蛋白基因的核苷酸长度在624～711nt，使用了两种不同的终止密码，编码的氨基酸长度为208～236aa，蛋白质分子量为22．9～25．8kD。与进化簇2相比，进化簇1的3株hMPV都出现了3个核苷酸的缺失，但未改变读码框架。同一进化簇内的hMPV G蛋白基因核苷酸和氨基酸的同源性分别为95．7％～100％和91．8％～100％，不同进化簇间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为56．3％～57．4％和34．3％～38．2％。疏水性分析表明这12株hMPV G蛋白是典型的Ⅱ型跨膜锚定蛋白，分别与两个进化簇代表株的疏水图一致。这些hMPV的G蛋白氨基酸的替换集中在胞外区。它们都含有高百分比的脯氨酸（P）、丝氨酸（S）和苏氨酸（T），含有相当数量的位于胞外区的O-连接糖基化化点。这些hMPV的G蛋白的N连接糖基化位点数目和位置不尽相同。通过对G蛋白基因的分析显示，2003年和2004年北京地区流行的hMPV分属于两种不同的进化簇。基因分析品示hMPV的G蛋白是高精基化的膜表面蛋白，具有与同属于副粘病毒科、肺病毒亚科的人呼吸道合胞病毒（hRSV）的G蛋白相似的基因特征，推测其功能和在感染免疫中的作用相当于hRSV的G蛋白，但有待进一步深入研究予以证实。
- 朱汝南钱渊赵林清邓洁王芳
- 关键词：人偏肺病毒基因特征
