国家自然科学基金(30873090)
- 作品数：9 被引量：71H指数：4
- 相关作者：毕明刚张鹏董宪喆杨美华李玄更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院哈尔滨商业大学河北北方学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- JR6对人结肠癌细胞HT-29氧化还原系统影响被引量：2
- 2009年
- 探讨新型抗肿瘤药物JR6诱导人结肠癌细胞HT-29凋亡机制.使用噻唑兰比色法(MTT)检测JR6对人结肠癌细胞HT-29的生长抑制作用,并测定HT-29细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)浓度.JR6对HT-29细胞生长有明显抑制作用,可以降低HT-29细胞中SOD、GSH-Px、CAT活性,升高MDA浓度.JR6对HT-29细胞有明显的细胞毒作用,其IC50为39.8μg/mL,可能通过影响HT-29细胞中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA浓度,达到诱导HT-29细胞凋亡的目的.
- 邓景岳张鹏杨美华毕明刚
- 关键词：SODMDAGSH-PXCAT
- 6'-羟基爵床素A对HepG2细胞内质网应激及胞内Ca^(2+)的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:研究新型抗肿瘤药物6'-羟基爵床素A(6'-hydroxy justicidin A,JR6)对HepG2细胞的内质网应激及胞内钙离子浓度变化的影响及其意义。方法:HepG2细胞经过终浓度分别为0,0.615,2.45,9.8μmol.L-1的JR6处理24h后采用实时定量RT-PCR技术、蛋白印迹(Western blot)法检测细胞中X-盒结合蛋白1(XBP-1)mRNA,IRE1α(inositol-requiring enzyme-1α),GRP78/BiP(glucose regulated protein/BiP),及Bcl-2(B cell leukemia 2)蛋白表达量的变化。激光扫描共聚焦显微镜测JR6作用24h后细胞内静息钙浓度变化及IP3R钙泵抑制剂光溜海绵素C干预后JR6的作用变化。结果:IRE1,XBP-1mRNA,Bip,Bcl-2蛋白的表达量均与JR6剂量负相关。高剂量组的各蛋白表达量与空白组相比,均下降了40%左右。共聚焦显微镜观察结果显示JR6引起细胞内钙离子浓度升高了2倍左右;加入IP3R钙泵抑制剂后,JR6不能引起细胞内钙升高。结论:JR6通过内质网钙泵IP3R升高细胞内的钙浓度,破坏细胞内的钙稳态;同时引起了内质网应激,并抑制了未折叠蛋白反应的相关因子。
- 李玄贺晓丽童元峰吴松毕明刚
- 关键词：HEPG2内质网应激钙稳态未折叠蛋白反应
- 新化合物JR6诱导人膀胱癌细胞EJ凋亡机制的研究
- 目的研究新型抗肿瘤化合物JR6对膀胱癌EJ细胞的细胞毒作用及对EJ细胞内SOD活性、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的影响,探讨JR6抗肿瘤作用机制。方法取对数生长期细胞,接种于96孔...
- 张鹏董宪喆周映彤杨美华毕明刚
- 关键词：活性氧
- 文献传递
- 激光扫描共聚焦显微技术及其在肿瘤相关研究中的应用
- 激光扫描共聚焦显微镜使现代显微镜更深入研究和分析细胞的变化过程和结构。在神经、肿瘤相关研究中激光共聚焦显微镜为其定量定性提供有效参考数据。近年发展的活细胞激光扫描共聚焦显微镜与双光子激光扫描共聚焦显微镜在传统共聚焦显微镜...
- 张鹏毕明刚
- 关键词：激光扫描共聚焦基因敲除凋亡
- 文献传递
- 6′-羟基爵床定A对肿瘤细胞的抑制活性及其对肿瘤细胞氧化还原系统的影响被引量：8
- 2010年
- 目的筛选对6′-羟基爵床定A(JR6)敏感的肿瘤细胞株并探讨其对细胞氧化还原功能的影响。方法将人膀胱癌细胞株EJ、肝癌细胞Bel、肺癌细胞A549、结肠癌细胞HCT-8和HT-29、胃癌细胞BGC、大肠癌细胞LS180、宫颈癌细胞HeLa、肝癌细胞HepG2以及乳腺癌细胞MCF-7分为正常对照组、阳性药对照顺铂、多柔比星、替尼泊苷、依托泊苷和5-氟尿嘧啶组及JR6组,细胞加入相应的药物培养48h后,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率并计算IC50值。选用对JR6与多柔比星作用敏感的人膀胱癌细胞EJ,加入相应的药物培养48h后,分别检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量。EJ细胞分为外源性SOD+多柔比星9.19μmol.L-1组和外源性SOD+JR63.02,9.07,27.2,81.7和245μmol.L-1处理组,其中SOD分别为0,1.9,5.6,16.7,50和150kU.L-1,MTT法检测细胞存活率。多柔比星9.19μmo.lL-1,JR612.3,49.0和196μmo.lL-1加入EJ细胞,24h后用激光共聚焦显微镜检测EJ细胞内活性氧类的含量。结果 EJ细胞对JR6较为敏感,IC50为57.1μmol.L-1,多柔比星对EJ细胞的IC50为4.08μmol.L-1。其余9种肿瘤细胞对JR6的IC50值为71.3～123μmol.L-1。与正常对照组比较,多柔比星9.19μmo.lL-1能明显降低EJ细胞内SOD,GSH-Px和CAT活性,分别降低了(64.3±2.1)%,(66.5±3.5)%和(49.6±1.9)%,而MDA的含量明显升高了(432.0±5.4)%(P<0.01);JR63.02,9.07,27.2,81.7和245μmo.lL-1使EJ细胞内SOD的活性分别降低了(7.28±0.3)%,(57.1±3.2)%,(66.5±4.7)%,(72.1±5.5)%和(77.8±2.4)%;GSH-Px活性分别降低了(20.3±1.6)%,(32.8±2.3)%,(45.3±3.6)%,(59.3±4.5)%和(71.9±4.2)%,CAT活性分别降低了(10.1±0.6)%,(15.9±0.7)%,(25.9±2.3)%,(38.8±3.5)%和(52.4±3.9)%;同时MDA含量分别升高了(24.4±1.3)%,(90.2±8.70)%,(217.0±19.0)%,(356.0±24.0)%和(539.0±32.0)%(P<0.05,P<0.01)。与无外源性SOD组比较,在外源性SOD存在时,多柔比星与JR6对EJ细胞的生长抑
- 张鹏周伟勤董宪喆杨美华毕明刚
- 关键词：药物筛选
- 活性氧对P-糖蛋白调节作用的研究进展被引量：10
- 2010年
- P-糖蛋白是由多药耐药基因(MDR1)编码的跨膜糖蛋白,介导ATP依赖的多药耐药,能把多种亲脂性外源物质排出胞外。P-gp过表达介导的多药耐药是目前多药耐药发生的主要机制。活性氧(reactive oxygen species,ROS)是细胞内的信号分子,能被多种物质调节升高。近有研究显示多种ROS诱导剂可以下调P-gp的表达,推测某些ROS诱导剂有望成为P-gp抑制剂而成为肿瘤多药耐药逆转剂研究的新方向。
- 董宪喆毕明刚
- 关键词：P-糖蛋白活性氧诱导剂多药耐药肿瘤逆转
- 活性氧与内质网应激被引量：30
- 2011年
- 内质网(endoplasmic reticulum,ER)是细胞加工蛋白质和贮存Ca2+的主要场所,对应激极为敏感,其功能紊乱时出现错误折叠与未折叠蛋白在腔内聚集以及Ca2+平衡紊乱的状态,称为内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)。活性氧(reactive oxygen species,ROS)作为第二信使,在细胞生物学功能的调节中起着重要作用。细胞内氧化还原状态的改变促进了ROS的产生和凋亡诱导因子的激活,致使细胞凋亡的同时又加剧了细胞内氧化还原状态的改变。研究发现细胞内氧化还原水平的改变在ERS介导的细胞凋亡过程中承担重要的角色,推测ROS可能是ERS介导的凋亡通路的上游信号分子,该文就ROS与ERS之间的关系作一综述。
- 周映彤肖洪彬毕明刚
- 关键词：活性氧内质网应激未折叠蛋白反应钙细胞凋亡
- 内质网应激凋亡通路中的耐药节点被引量：2
- 2013年
- 内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的细胞凋亡是一种新的凋亡途径,ERS过长过强,可多途径诱导细胞凋亡。肿瘤化疗药物的作用机制是诱导肿瘤细胞发生凋亡,因此凋亡信号传导通路在肿瘤治疗中尤为关键。凋亡通路中任意环节缺陷都能导致肿瘤细胞对凋亡的耐受。该文就内质网中影响凋亡信号传导通路中发挥关键作用的一些重点耐药分子作一综述,包括P-gp分子、IAP家族、Bcl-2耐药家族中的关键蛋白以及内质网钙泵IP3R。
- 李玄贺晓丽毕明刚
- 关键词：内质网应激凋亡通路耐药分子
- 活细胞激光扫描共聚焦显微镜在中药药理研究中的应用
- 2010年
- 活细胞激光扫描共聚焦显微镜技术在形态学、分子生物学、神经科学、肿瘤药理学、心血管药理学、遗传学、植物学等领域都有广泛的应用,也广泛应用于中药性状鉴定,成分分析及中药药理研究等方面。常用于定位、定性和定量地检测生物样品中成分变化、生理功能改变,对生物组织、细胞及其亚细胞结构进行形态观察等。本文以应用共聚焦显微镜实时动态监测肿瘤细胞内线粒体膜电位的变化为例简要介绍了共聚焦显微镜技术在中药药理学的应用。
- 董宪喆张鹏毕明刚
- 关键词：线粒体膜电位
- 激光扫描共聚焦显微技术及其在神经、肿瘤相关研究中的应用被引量：2
- 2010年
- 介绍了近年来新出现的共聚焦显微镜新的种类,如传统激光共聚焦和活细胞激光共聚焦,对其功能及在神经、肿瘤研究中的应用进行了综述,使现代显微镜能够更加深入研究和分析细胞的变化过程和结构。活细胞激光扫描共聚焦显微镜与双光子激光扫描共聚焦显微镜实现了对肿瘤、神经活细胞长时间地动态观测,可更加真实地揭示细胞凋亡的机制与规律。
- 张鹏毕明刚
- 关键词：激光扫描共聚焦基因敲除凋亡
