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传染性法氏囊病不同代次细胞毒免疫效果的研究被引量：4: 2005年; 将从山东省东营分离到的1株传染性法氏囊病病毒(IBDV)野毒(暂命名 IBDV SDDY株,经鉴定该株与 IB DV STC株具有较高的同源性)经 SPF 鸡胚传代,然后转为细胞培养,取第 20 代、21 代、25 代毒,以 1 倍剂量(3000TCID50/0.2mL )和5倍剂量不同的免疫剂量,分别在7日龄、14日龄对商品代海蓝褐蛋鸡进行免疫,并于免疫前用 IBD ELISA试剂盒检测 IBDV母源抗体水平,于 35 日龄用传染性法氏囊病病毒超强毒 (very virulent In fectious Bursal Disease Virus, vvIBDV )GX 8/99攻毒,在攻毒前再次检测IBDV的抗体水平,攻毒后观察记录各分组鸡的致病率和死亡率,并计算免疫器官体重指数,观察免疫器官的组织损伤情况。试验结果表明:3 代毒都具有较高免疫原性,但是20代毒仍具有较大的毒性,7 日龄接种会引起法氏囊的萎缩,造成持续的组织损伤;21 代毒、25代毒保护率高,无免疫抑制,是比较理想的疫苗来源;7日龄免疫较14日龄免疫更易造成组织损伤和免疫抑制,14日龄免疫较为合适。; 崔言顺李建亮孙淑红杨萍萍姜世金崔治中张彦明; 关键词：母源抗体酶联免疫吸附试验

新城疫病毒F_(48)E_9株NP基因的克隆与序列分析被引量：1: 2002年; 根据NDVNP蛋白已知基因序列设计合成了一对引物 ,利用RT_PCR扩增出了F4 8E9株NP基因 15 98bp的片段 ,将该片段克隆到pMD18_TVector上 ,并对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,结果证明我们得到了这个基因片段的阳性重组子。为了更充分证实所得阳性质粒的可靠性 ,采用Sanger′s双脱氧末端终止法对阳性重组子进行核苷酸序列测定 ,获得了F4 8E9株NP基因片段的基因序列 ,利用DNASIS分析软件 ,将F4 8E9株与LaSota株的相应序列进行比较 ,其核苷酸序列同源性为 88.2 %。至此 ,我们获得了F4; 柴迎梅曹殿军闫丽辉刘培欣黄永芬汪清胤; 关键词：新城疫病毒基因克隆 NP基因

63株传染性法氏囊病病毒分离株单抗反应谱分析被引量：3: 2001年; 利用 1 2株不同来源的抗传染性法氏囊病病毒 (IBDV)单克隆抗体 ,采用斑点酶联免疫吸附试验方法 ,对 1 992～1 999年从全国不同地区收集的 63株 IBDV毒株进行单抗反应性检测 ,建立各分离毒的单抗反应谱 ,以分析各毒株的抗原性。根据各分离株的单抗反应谱 ,可将 63个分离毒株分成 1; 金文杰刘岳龙秦爱建崔治中; 关键词：传染性法氏囊病病毒分离株

从血清中分离纯化鸡IgG、IgM的实用方法被引量：17: 2000年; 本试验用绵羊红细胞免疫鸡 ,免疫后 5天采血 ,制备富集IgM血清。应用硫酸铵粗提、Sepharose_4B分子筛层析方法 ,从富集IgM的鸡血清一次性分离提取高纯度的IgM及纯度较高的IgG ,并经DEAE_5 2纤维素离子交换层析进一步纯化 ,获得电泳纯的IgG。经鉴定该方法制备的IgG ,IgM完全可以满足免疫学实验要求 ,从一份血清样品中同时纯化IgM、IgG两种免疫球蛋白。; 孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉卢景良; 关键词：硫酸铵 IGG IGM 鸡血清分离纯化

鸡新城疫病毒强弱毒株RT-PCR鉴别诊断方法被引量：30: 2000年; 本研究通过对大量不同毒力NDVF基因核苷酸序列分析 ,根据毒力和序列间的相关规律 ,分别设计合成了两组引物 ,建立了一个可以迅速鉴别NDV强、弱毒株的RT_PCR方法 ,对强毒株可扩增出 133bp的特异性片段和 36 2bp的通用片段 ,弱毒株可以扩增出 2 5 2bp的特异性片段和 36 2bp的通用片段。只需一个RT_PCR反应 ,整个实验过程可在 5小时内完成。敏感性测定结果表明该方法的最低检出量不低于 5 0 0pg的NDVRNA。为了增加方法的实用性。; 曹殿军刘培欣闫丽辉孙建宏; 关键词：新城疫病毒融合蛋白基因 RT-PCR

高纯度鸡IgA的制备与鉴定被引量：9: 2000年; 本试验应用聚乙二醇 (PEG)粗提后 ,DEAE纤维素离子交换 ,Sepharose_4B凝胶过滤层析方法 ,从鸡胆汁分离提取IgA 。; 孙建宏曹殿军徐哮刘培欣闫丽辉卢景良; 关键词：聚乙二醇 IGA 胆汁纯化

NDV La Sota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的主要特异性血清抗体动态变化规律比较被引量：20: 2001年; 本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒(NDV)特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明 ,V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前 3天左右出现 ,但除高峰期 (1周左右 )外 ,其HI抗体水平均低于LaSota免疫鸡。LaSota疫苗免疫鸡血清中NDV特异性IgM和IgG抗体水平高于V4免疫鸡 ,IgG抗体高峰较V4免疫鸡提前约 2周出现 ,攻毒后 ,LaSota免疫鸡血清中特异性IgG和IgG回忆应答显著 ,而V4免疫鸡IgM和IgG回忆应答不明显。; 孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉陈杰曲鲁江刘宝全; 关键词：新城疫血清抗体疫苗

新城疫病毒F_(48)E_9株P基因的克隆及鉴定: 2001年; 根据NDVP蛋白己知基因序列设计合成了一对引物PU/PL ,利用RT_PCR扩增出了F4 8E9株P基因 12 72bp的片段 ,将该片段克隆到pMD18_TVector上 ,并对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,结果证明我们得到了这个基因片段的阳性重组子。为了更充分证实所得阳性质粒的可靠性 ,采用Sanger’s双脱氧末端终止法对阳性重组子从 5’端进行核苷酸序列测定 ,获得了F4 8E9株P基因片段 5’端的基因序列 ,利用DNASIS分析软件 ,将F4 8E9株与LaSota株的相应序列进行比较 ,其核苷酸序列同源性为 83 7%。至此 ,我们获得了F4; 王海艳曹殿军闫丽辉刘培欣曲鲁江李红梅柴迎梅张庆玲; 关键词：新城疫病毒基因克隆

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国家自然科学基金(398932904)