国家自然科学基金(30400012)
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
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- 相关机构：清华大学河北北方学院长安大学更多>>
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- 相关领域：环境科学与工程理学更多>>
- 白腐真菌细胞色素P450的诱导及检测方法研究被引量：5
- 2009年
- 以CO结合差光谱为基本检测法,研究了白腐真菌黄孢原毛平革菌中细胞色素P450的诱导和适宜的分离检测方法.结果表明,正己烷对该真菌P450有显著的诱导作用,P450诱导量受正己烷浓度和诱导时间的影响,每小时投加正己烷2μL/mL、诱导6 h可使该真菌微粒体P450比浓度高达140-160 pmol/mg.在此基础上,本研究优化了分离P450时破碎细胞的方法以及光谱法检测P450的条件.破碎细胞时,采用高速分散结合玻璃研磨,比采用玻璃研磨、超声破碎和珠磨等方法分离的微粒体P450含量高1-5倍,是更为适宜的破碎方法.检测CO结合差光谱时,通气和还原条件对P450检测值有显著影响,较适宜的条件为：样品池和对照池分别通入等量的CO和N2,通气流量为3 mL/min（300μL样本）,通气时间40 s;通气后投加还原剂低亚硫酸钠,投加浓度为0.4 mol/L.
- 宁大亮王慧李冬
- 关键词：白腐真菌细胞色素P450细胞破碎
- 原位光谱法检测白腐真菌P450的诱导及其降解功能被引量：2
- 2007年
- 利用诱导-原位光谱分析法,对黄孢原毛平革菌中的微粒体P450在蛋白质水平上进行原位直接检测和表征,研究结果表明,正己烷、苯甲酸、萘和五氯酚对黄孢原毛平革菌P450酶系均有不同程度的诱导作用,在合适的诱导剂量和诱导条件下,对黄孢原毛平革菌P450的诱导量分别达到未诱导时的7.5,5.6,3.1和3.5倍.其中五氯酚对真菌P450酶系的诱导现象尚未见报道.在不同的培养条件下测定了苯甲酸与P450的底物结合光谱,并检测出微粒体酶液中依赖NADPH的苯甲酸降解活性,证实了降解苯甲酸的P450基因在黄孢原毛平革菌中能够顺利合成并表现出明显的催化活性,抑制剂实验结果表明,除了P450的催化降解途径以外,白腐真菌中还存在其它的苯甲酸降解途径.
- 宁大亮王慧庄芫李冬
- 关键词：白腐真菌P450
- 白腐真菌降解五氯酚的初步研究被引量：6
- 2008年
- 研究了白腐真菌黄孢原毛平革菌在不同营养条件下对五氯酚的降解.采用土豆葡萄糖液体培养基,接种后第2天投加PCP,在胞外木质素降解酶活性极低的真菌反应体系中,五氯酚能够有效降解,4d内10mg·l-1五氯酚降解率达到98%;采用高氮培养基,接种后第6天投加五氯酚,在胞外木质素酶含量极低的真菌反应体系和不含胞外酶的菌丝体反应体系中,五氯酚均能有效降解,1d内降解率分别达到56%和22%;采用低氮培养基,接种后第6天投加五氯酚,在胞外木质素酶含量较高的真菌反应体系、胞外酶液反应体系和不含胞外酶的菌丝体反应体系中,五氯酚均能有效降解,1d内降解率分别达到86%,17%和46%.结果表明,黄孢原毛平革菌在非木质素降解条件下,依赖胞内酶能有效地降解PCP;在木质素降解条件下依赖胞外木质素降解酶和胞内酶降解五氯酚,降解效率高于非木质素降解条件.
- 曾斌宁大亮王慧
- 关键词：白腐真菌五氯酚降解
- 难降解有机物对白腐真菌P450的诱导及P450的作用被引量：9
- 2009年
- 实验考察了多环芳烃和氯酚类化合物对黄孢原毛平革菌P450的诱导作用及其P450对生物降解的影响.结果表明,萘、菲、2,4-二氯酚、五氯酚能够诱导该真菌P450,使微粒体P450比浓度达到37～137pmol/mg.在营养限制条件下,菲诱导的P450是营养丰富条件的5.7倍;P450抑制剂的作用使萘、菲、芘、2,4-二氯酚的降解效率下降36%～100%,但是对2,4,6-三氯酚和五氯酚的降解未产生影响.在营养丰富条件下,P450抑制剂的作用使萘、菲、芘、2,4,6-三氯酚的降解效率下降47%～100%,使五氯酚的降解效率增大57%,但对2,4-二氯酚的降解未产生影响.
- 宁大亮王慧王立华丁昶
- 关键词：白腐真菌P450多环芳烃氯酚
