国家自然科学基金(30470548)
- 作品数：11 被引量：21H指数：3
- 相关作者：金国华田美玲秦建兵朱蕙霞张蕾更多>>
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- 大鼠海马中83KD蛋白诱导神经干细胞向AChE阳性神经元定向分化的作用被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨海马组织中83KD蛋白诱导神经干细胞向ACHE阳性神经元定向分化的作用。方法:将切割海马伞后14天海马和正常海马组织匀浆进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,根据染色脱色结果取83KD差异蛋白条带进行电洗脱,将收集到的蛋白质加入到鼠胚神经干细胞球培养液中,并设阴性对照组。12天后,用AChE组织化学染色检测神经干细胞分化为AChE阳性神经元的情况。结果:83KD切割组中AChE阳性神经元较多,胞体较大且分化较好,突起较粗且长;83KD正常组中AChE阳性神经元数量较少,胞体较小,突起也较短;空白对照组仅看到少量的AChE阳性神经元,胞体很小,突起短而少。结论:海马中83KD蛋白具有诱导神经干细胞向AChE阳性神经元定向分化的作用。
- 张蕾金国华
- 关键词：海马神经干细胞ACHE
- 海马中56kD蛋白诱导人神经干细胞迁移的作用被引量：14
- 2005年
- 为了探讨切割海马伞后的海马和正常海马在蛋白表达方面的差异,获取海马中具有生物活性的特异蛋白,并观察其对人胚神经干细胞迁移的影响,取切割SD大鼠海马伞后10、14、20d及正常海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE)。将用无血清培养技术获取的人胚神经干细胞球分别与切割海马伞后14d海马和正常海马的56kD差异蛋白胶条及空白对照胶条共培养,观察神经干细胞球中神经干细胞迁移情况,第3d时计数朝胶条方向1/4扇区内的迁出细胞数。结果显示,切割后各天组和正常组比较见多条差异蛋白条带,其中56kD差异蛋白的密度积分正常组最低,10d组和20d组较高,14d组最高。神经干细胞球中向56kD差异蛋白胶条方向迁移的细胞数在切割组最多,正常组次之,对照组最少。提示切割海马伞后的海马与正常海马间存在多种差异蛋白,其中56kD蛋白在切割海马伞后14d表达量最高,并具有诱导神经干细胞迁移的作用。
- 陈蓉金国华田美玲朱蕙霞秦建兵谭雪锋徐慧君
- 关键词：海马人神经干细胞细胞迁移
- 切割海马伞海马中56kD差异蛋白的质谱分析被引量：9
- 2006年
- 目的:探讨切割海马伞海马中具有生物活性的56kD差异蛋白的组成成份及其功能。方法:切割SD大鼠海马伞后14d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对56kD差异蛋白进行检测和功能分析。结果:质谱分析找到了33组肽段,这些蛋白按照其功能可以分为:细胞骨架蛋白、参与代谢的酶、信号传递、蛋白降解、核酸水解、氧化应激、神经递质运输、突触形成、功能未知蛋白。结论:切割海马伞海马中56kD差异蛋白中含有功能涉及神经干细胞迁移、分化的蛋白质。
- 朱蕙霞秦建兵田美玲陈蓉金国华
- 关键词：海马质谱分析
- 切割海马伞大鼠海马中65kD和83kD差异蛋白诱导神经干细胞迁移和向神经元分化的作用被引量：3
- 2006年
- 目的：探讨切割海马伞大鼠海马中65 kD、83 kD差异蛋白是否具有诱导神经干细胞迁移和向神经元分化的作用。方法：切割海马伞后的海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,将65 kD、83 kD差异蛋白胶条与大鼠神经干细胞球共培养,计数神经球朝胶条方向1/4扇区内迁移出的细胞数。10 d后行微管相关蛋白2(MAP-2)免疫荧光,计数其中MAP-2阳性神经元数,图像处理其胞体面积和细胞周长。结果：83 kD切割组朝胶条方向迁移的细胞最多,迁移速度最快。其分化的神经元数量多,胞体大、周长长,明显地优于83 kD正常组、65 kD切割组、65 kD正常组和空白对照组。结论：大鼠海马组织中83 kD蛋白具有诱导神经干细胞迁移和向神经元分化的作用。
- 张蕾金国华田美玲秦建兵朱蕙霞
- 关键词：海马伞海马神经干细胞迁移细胞分化神经元
- 原位杂交法检测切割穹窿海马伞大鼠海马中PEBP mRNA的表达被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨切割穹窿海马伞侧大鼠海马与正常侧海马中PEBP mRNA的表达差异。方法:取6只大鼠,于切割右侧穹窿海马伞后第7d,应用寡核苷酸探针原位杂交技术观察PEBP mRNA在切割侧和正常侧海马中的表达差异。结果:切割侧锥体细胞层和齿状回颗粒层PEBP mRNA阳性细胞数量与正常侧比较无明显差异(P>0.05),但切割侧的杂交信号强于正常侧(P<0.05);而在齿状回门区和颗粒下层,切割侧PEBP mRNA阳性细胞数量多于正常侧,杂交信号也强于正常侧(P<0.05)。结论:结合本课题组以往的工作,切割穹窿海马伞后海马内PEBP mRNA的表达上调,可能与海马内神经干细胞向胆碱能神经元的分化有关。
- 张蕾李浩明金国华秦建兵朱蕙霞田美玲
- 关键词：海马原位杂交
- 海马中56 kD蛋白诱导人神经干细胞向神经元分化的作用被引量：12
- 2006年
- 在已证明切割海马伞海马中差异表达的56kD蛋白具有诱导神经干细胞迁移作用的基础上,进一步探讨其诱导神经干细胞向神经元和AChE阳性神经元分化的作用。取切割SD大鼠海马伞后14d及正常海马组织的匀浆进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)。将用无血清培养技术获取的人胚神经干细胞球分别与切割海马伞后14d和正常海马56kD差异蛋白的胶条及空白对照胶条共培养,在倒置显微镜下观察神经干细胞球中细胞的迁移和分化情况,于第21d分别应用MAP-2免疫荧光和AChE组织化学方法检测人神经干细胞分化为神经元和AChE阳性神经元的情况,并进行神经元的计数、细胞面积、细胞周长的图像处理和统计学分析。结果显示,分化的MAP-2阳性神经元的数量、细胞面积及细胞周长三项指标切割组最好,正常组次之,而空白对照组最差;三组AChE组织化学染色均为阴性结果。上述结果提示切割海马伞后海马中差异表达的56kD蛋白具有诱导神经干细胞向MAP-2阳性神经元分化的作用,但不能诱导神经干细胞向AChE阳性神经元分化。
- 金国华陈蓉田美玲秦建兵谭雪锋朱蕙霞徐慧君
- 关键词：人神经干细胞分化神经元海马
- 海马放射状胶质细胞体外诱导激活后的PEBP mRNA表达变化
- 2009年
- 目的:探讨切割穹窿海马伞侧海马提取液对海马放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA表达的影响。方法:将培养的海马胶质细胞接种于培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液,对照组加入单纯的细胞培养液。培养7d后,提取总RNA,然后逆转录合成cDNA,用real-timePCR观察诱导组及切割组中PEBPmRNA的表达情况。结果:PEBPmRNA在放射状胶质细胞中能够表达,诱导组的表达比对照组明显增加(P<0.05)。结论:表达增加的PEBPmRNA可能与切割侧海马提取液"激活"的放射状胶质细胞向胆碱能神经元分化有关。
- 秦建兵李浩明赵荷艳朱蕙霞田美玲金国华
- 关键词：磷脂酰乙醇胺结合蛋白
- 切割穹隆海马伞后大鼠海马中83ku差异蛋白的质谱分析
- 2009年
- 目的:探讨切割穹隆海马伞海马中具有诱导神经干细胞向神经元分化生物活性的83 ku差异蛋白的组成成分及其功能。方法:切割SD大鼠穹隆海马伞后14 d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对83 ku差异蛋白进行检测和功能分析。结果:质谱分析找到了17组肽段,这些蛋白按照其功能可以分为:细胞骨架蛋白、参与代谢的酶、信号传递、蛋白降解、氧化应激、神经递质运输、突触形成、功能未知蛋白。结论:切割穹隆海马伞海马83 ku差异蛋白可以通过参与Rho信号通路,调控神经干细胞向神经元分化。
- 朱蕙霞秦建兵金国华田美玲张新化黄镇
- 关键词：KU蛋白海马质谱分析
- 大鼠海马中56KD、83KD蛋白诱导神经干细胞向神经元分化的协同作用研究
- 2008年
- 目的:探讨切割海马伞大鼠海马中56KD、83KD蛋白在诱导神经干细胞向神经元分化方面是否具有协同作用。方法:切割海马伞后的海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,取低分子量区的56KD、65KD和83KD 3条差异蛋白条带电洗脱后以不同的组合加入鼠胚神经干细胞的分化培养液中诱导神经干细胞分化,12天后行MAP-2免疫荧光染色,记数其中MAP-2阳性神经元数,胞体面积和细胞周长。用STATA7.0软件进行方差分析和两两比较。结果:56KD+65KD+83KD组和56KD+83KD组MAP-2神经元的数量是47.1±9.64,43.7±8.41,胞体大,突起丰富;65KD+83KD组、56KD+65KD组、56KD组和83KD组MAP-2神经元的胞体较小,突起较短;65KD组和对照组的神经元胞体最小,突起最短。MAP-2神经元的数量、面积和周长统计分析结果显示:56KD+65KD+83KD组和56KD+83KD组与其他6组均有显著性差异。56KD+65KD+83KD组和56KD+83KD组之间没有显著性差异;65KD+83KD组、56KD+65KD组、56KD组和83KD组四组之间没有显著性差异,但是它们与65KD组和对照组均有显著性差异,65KD组和对照组之间没有显著性差异。结论:56KD、83KD蛋白在诱导神经干细胞向神经元分化方面具有协同作用。
- 张蕾金国华
- 关键词：神经干细胞
- 海马放射状胶质细胞体外诱导激活后PEBP蛋白的表达变化
- 2010年
- 目的:探讨切割穹窿海马伞的侧海马提取液对放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)表达的影响。方法:将培养的海马放射状胶质细胞接种于培养板中,分成对照组和诱导组,对照组中加入含5%正常海马提取液的DMEM/F12细胞培养液,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液。培养7 d后,通过免疫荧光标记法观察PEBP在放射状胶质细胞中的表达,并提取总蛋白,采用Western blot的方法观察对照组及诱导组中PEBP蛋白的表达变化。结果:PEBP蛋白在放射状胶质细胞中能够表达,诱导组的表达比对照组明显增加(P<0.05)。结论:PEBP的表达增加可能与切割侧海马提取液"激活"的放射状胶质细胞向神经元分化有关。
- 秦建兵李浩明金国华赵荷艳杨伟伟田美玲朱蕙霞邹琳清
- 关键词：磷脂酰乙醇胺结合蛋白免疫印迹免疫荧光
