中国博士后科学基金(20070410230)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 相关作者：吕同德惠玲王晓辉哈小琴杨金升更多>>
- 相关机构：兰州军区兰州总医院兰州大学敦煌研究院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金甘肃省社科规划项目更多>>
- 相关领域：生物学历史地理医药卫生更多>>
- LMO3过表达对胶质细胞增殖的作用
- 2010年
- 构建重组质粒pcDNA4/HisA-LMO3,转染C8-D1A胶质细胞,对照组为pcDNA4/HisA空载体质粒转染组和未转染组,MTT观察各组细胞的体外生长情况,流式细胞术(FCM)测定各组细胞的细胞周期和凋亡细胞百分比,Western-blot检测LMO3转染后凋亡相关蛋白的表达变化,从而观察LMO3基因对C8-D1A胶质细胞体外生长的影响.RT-PCR、Western印迹显示pcDNA4/HisA-LMO3转染组LMO3mRNA及LMO3蛋白表达水平明显高于对照组;与对照组细胞相比,转染组细胞的增殖能力明显高于空载体对照组及C8细胞(P<0.01),S期细胞增加,G0/G1期细胞减少,C8细胞转染LMO3后可以促进C8细胞从G0/G1期进入S期,从而促进细胞的增殖.
- 惠玲吕同德王建峰王晓辉哈小琴张军莉杨桂兰鞠英
- 关键词：基因转染胶质细胞增殖
- 钙整合素结合蛋白CIB的原核表达及多克隆抗体的制备与亚细胞定位被引量：5
- 2009年
- 目的:构建钙整合素结合蛋白(calcium-and inte-grin-binding protein,CIB)的原核表达载体,制备小鼠抗人CIB的多克隆抗体并探讨其亚细胞定位。方法:采用RT-PCR方法从人脑组织扩增CIB的cDNA片段,利用DNA重组技术构建原核表达载体pET32a-CIB,转入BL21(DE3)中,以IPTG诱导BL21(DE3)表达CIB融合蛋白,SDS-PAGE鉴定融合蛋白CIB的表达。用含CIB融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶颗粒为抗原免疫小鼠制备抗血清,抗血清分别经Protein G、抗原亲和层析后用Western blot及免疫组化方法进行鉴定。结果:通过重组表达获得CIB抗原蛋白,免疫小鼠并纯化抗血清得到特异性的抗CIB抗体,该抗体能检测细胞内源性CIB蛋白的表达;同时免疫组化结果显示:CIB在SHG44、Hhu7细胞株中主要定位于细胞质。结论:成功克隆CIB基因并制备了特异性的小鼠抗人的CIB多克隆抗体,对进一步研究CIB的功能奠定了基础。
- 石洁惠玲张煦王晓辉杨金升吕同德赵治华哈小琴
- 关键词：CIB基因重组多克隆抗体亚细胞定位
- 莫高窟“报恩吉祥窟”再考被引量：9
- 2008年
- 本文在前人研究的基础上,就P.2991《报恩吉祥之窟记》所记僧镇国建"报恩吉祥窟"功德窟,结合写本所记洞窟基本信息,如洞窟的"报恩"思想、主尊彩塑一铺"卢舍那佛并八大菩萨像"、彩塑所在洞窟空间建筑"当阳"考辨,最终确认莫高窟第234窟极有可能即是此"报恩吉祥窟"。
- 沙武田
- 癌基因LMO3的原核表达及多克隆抗体的制备及应用被引量：3
- 2009年
- 目的:制备抗神经特异性表达的癌基因LMO3的多克隆抗体,进行LMO3分子检测和功能研究。方法:采用RT-PCR方法扩增LMO3的基因序列,构建其原核表达载体pET32a-LMO3。在大肠埃希菌中诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE分离纯化原核表达的融合蛋白,PBS溶解聚丙烯酰胺凝胶颗粒中的融合蛋白,乳化后免疫新西兰兔制备多克隆抗体。采用免疫印迹、免疫组化等对该抗体的特异性进行鉴定。结果:构建的重组质粒经酶切鉴定和测序证实序列正确。经诱导表达在相对分子质量为37×103处有一条明显的蛋白条带,与预期值一致;免疫动物所得抗血清效价为1∶16 000,该抗体能够识别原核表达的LMO3蛋白及细胞内源性表达的LMO3蛋白;免疫组化显示,LMO3在SHG44胶质瘤细胞株及脑胶质瘤组织中均有表达。结论:制备了能识别天然LMO3分子的抗LMO3的多克隆抗体,为检测LMO3分子的表达和进一步研究其功能提供了有力的工具。
- 惠玲石洁王晓辉吕同德杨金升哈小琴
- 关键词：基因原核表达抗体多克隆
