安徽省高校省级自然科学研究项目(kj2007A097)
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 相关作者：吴俊英张克昌李柏青吕坤葛晓松更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院蚌埠医学院第二附属医院宝鸡市中医医院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人肝癌细胞系HepG_2培养上清液对人淋巴细胞活性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察人肝癌细胞系HepG2培养上清液对人淋巴细胞活化、增殖、IL-2分泌及凋亡诱导作用的影响,进一步揭示肿瘤的免疫逃逸机制。方法将不同浓度肿瘤细胞培养上清液与体外分离的人淋巴细胞一起培养;用标准白细胞计数法和MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测其免疫表型及凋亡;ELISA法检测IL-2分泌水平。结果肿瘤细胞培养上清液对淋巴细胞活化无明显影响,但能明显抑制淋巴细胞增殖和分泌IL-2,促进淋巴细胞凋亡。结论肿瘤细胞可能通过产生某些可溶性蛋白分子抑制淋巴细胞活性,从而逃避宿主免疫监视。
- 张克昌吴俊英李柏青
- 关键词：人肝癌淋巴细胞
- 人4-1BBL融合蛋白的表达及鉴定
- 2008年
- 目的:在TOP10大肠埃希菌pTrcHisB系统中表达人4-1BBL(h4-1BBL)融合蛋白,并对其进行鉴定。方法:应用RT-PCR方法,从Raji细胞中克隆h4-1BBL基因中的CDS序列,构建pTrcHisB-h4-1BBL原核表达载体,测序后,经IPTG诱导表达,Westernblot鉴定h4-1BBL融合蛋白的表达情况。结果:成功构建了重组载体pTrcHisB-h4-1BBL,重组蛋白是带6个His标记的h4-1BBL融合蛋白。结论:重组载体pTrcHisB-h4-1BBL成功表达了h4-1BBL融合蛋白,为进一步研究其功能奠定了一定的基础。
- 汤复根陈昌杰耿英华吴俊英
- 关键词：大肠埃希菌细胞株融合蛋白
- 共刺激分子4-1BBL高表达与肿瘤免疫逃逸关系的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:观察高表达4-1BBL的HL-60细胞培养上清液对人淋巴细胞活化、增殖、IL-2分泌及凋亡诱导作用的影响;分析阻断4-1BB/4-1BBL信号对肿瘤细胞增殖、细胞因子分泌的影响,揭示肿瘤的免疫逃逸机制。方法:将不同浓度的HL-60肿瘤细胞培养上清液与体外分离的人淋巴细胞共培养,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测免疫表型、细胞因子分泌及细胞凋亡;ELISA法检测IL-2分泌水平;用抗4-1BBL单抗作用后,观察对HL-60细胞增殖及细胞因子分泌的影响。结果:不同的肿瘤细胞株表面均有4-1BBL表达,但表达水平不同;HL-60细胞培养上清液对淋巴细胞活化没有明显影响(P>0.05),但能明显抑制淋巴细胞增殖(P<0.01)和IL-2分泌(P<0.05),诱导淋巴细胞凋亡(P<0.05)。抗4-1BBL单抗能抑制HL-60细胞增殖和TGF-β的分泌(P<0.05)。结论:HL-60细胞高表达4-1BBL具有反向调节作用,可通过促进肿瘤细胞增殖及TGF-β分泌等抑制淋巴细胞功能,从而使之逃避宿主的免疫监视。
- 张克昌吴俊英李柏青
- 关键词：肿瘤细胞淋巴细胞4-1BBL免疫逃逸
- 4-1BB配体在肿瘤细胞株上的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系被引量：3
- 2007年
- 目的检测4-1BBL在肿瘤细胞株上的表达及其功能。方法半定量RT-PCR检测几种肿瘤细胞株内4-1BBL mRNA表达;流式细胞术检测肿瘤细胞表面4-1BBL蛋白的表达;MTT法检测4-1BBLmAb对肿瘤细胞增殖的影响。结果4- 1BBL在Raji和THP-1细胞株表面表达率分别为26.8%和15.3%,而在T1301和Jurkat细胞株中,4-1BBL mRNA水平虽有一定表达,但蛋白水平却几乎不表达;4-1BBLmAb可以促进肿瘤细胞的增殖。结论4-1BBL在不同肿瘤细胞株上的表达有差异;4-1BBL在肿瘤细胞的增殖和长期存活中发挥重要作用。
- 刘琦吕坤葛晓松吴俊英
- 关键词：肿瘤细胞4-1BB配体增殖
- siRNA靶向抑制4-1BBL基因表达在HL-60细胞对淋巴细胞增殖和凋亡的影响
- 2018年
- 目的:观察4-1BB配体(4-1BBL)-siRNA对HL-60细胞细胞因子分泌的影响;对比观察4-1BBL基因被干扰前后,HL-60细胞培养上清液对淋巴细胞增殖、凋亡诱导作用的影响;探讨肿瘤细胞的免疫逃逸机制。方法:采用化学合成法人工合成靶向人4-1BBL基因的siRNA,脂质体转染法转染HL-60细胞;半定量RT-PCR和流式细胞术检测干扰前后HL-60细胞4-1BBLmRNA和表面蛋白的表达水平; ELISA法检测4-1BBL干扰前后HL-60细胞培养上清液转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)分泌水平。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,收集4-1BBL干扰后的HL-60细胞培养上清液与体外分离的人淋巴细胞共培养,MTT法检测机体淋巴细胞增殖水平;流式细胞术检测淋巴细胞凋亡比率的变化。结果:靶向4-1BBLsiRNA转染HL-60后,4-1BBL-mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P <0. 01); ELISA结果显示,4-1BBL基因被干扰后,HL-60细胞培养上清液中TGF-β和VEGF分泌水平明显降低(P <0. 01和P <0. 05)。与干扰前比较,干扰后的HL-60细胞培养上清液对机体淋巴细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用均下降(P <0. 05)。结论:HL-60细胞高表达的4-1BBL信号具有反向调节作用,通过促进其分泌TGF-β、VEGF,使肿瘤细胞培养上清液对淋巴细胞活性的抑制作用增强并促进淋巴细胞凋亡,可能是肿瘤细胞逃避宿主免疫监视的机制之一。
- 王慧吴俊英
- 关键词：肿瘤免疫4-1BB配体SIRNAHL-60细胞免疫逃逸
