国家自然科学基金(81170154)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：陈曦丛祥凤陈海波范雪松王宪云更多>>
- 相关机构：北京协和医学院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 溶血磷脂酸对心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护作用及机制被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)对心肌细胞缺氧/复氧诱导损伤的保护作用及机制。方法:建立H9c2心肌细胞和原代乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型。实验分组:对照组:不做任何处理;缺氧/复氧组(H/R组):无血清培养的细胞在缺氧罐中缺氧24 h后,换含10%胎牛血清的DMEM培养液在常氧条件下培养3 h;LPA预处理组(H/R+LPA组)和LPA3受体特异激动剂(OMPT)预处理组(H/R+OMPT组):细胞分别用LPA(1,10,25μM)和OMPT(1,5,10μM)处理1 h后,进行缺氧/复氧,复氧时不加LPA和OMPT。台盼蓝染色和细胞活性试剂盒检测细胞活力。流式细胞术检测凋亡细胞,Caspase-3/7活性检测试剂盒分析Caspase-3/7活性,免疫印迹检测凋亡相关蛋白包括裂解的Caspase-3,Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:与对照组相比,H/R组的H9c2心肌细胞的活细胞数和细胞存活率均降低(P均<0.05);早期凋亡细胞数增加(P<0.05)。与H/R组相比,H/R+LPA组的心肌细胞活细胞数和细胞存活率增加(P均<0.05),其中以10μM浓度的LPA作用最为明显。10μM LPA也提高了原代乳鼠心肌细胞存活率(P<0.05)。H/R+LPA组两个浓度(LPA 1,10μM)H9c2心肌细胞的Caspase-3/7活性较H/R组显著降低(P<0.05)。同时,H/R+OMPT组三个浓度较H/R组都减少线粒体促凋亡Bax蛋白表达,增加了线粒体抗凋亡Bcl-2蛋白表达(P<0.05或0.01)。结论:LPA可能通过激活LPA3受体,抑制线粒体依赖的细胞凋亡途径,保护缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤,为心肌缺血再灌注损伤的防治提供了新的理论依据。
- 杨晋静陈海波王宪云范雪松丛祥凤陈曦
- 关键词：溶血磷脂酸缺氧复氧
- 溶血磷脂酸对幼年大鼠心肌细胞收缩和钙瞬变的影响
- 2013年
- 目的我们前期的研究发现LPA受体在幼年大鼠心脏的表达显著高于成年的表达,提示LPA信号在心脏收缩功能尚未成熟时可能具有更为重要的调节作用。本研究通过观察LPA对此未成熟阶段心肌细胞钙瞬变和收缩力的作用,探讨LPA信号对幼年心肌兴奋-收缩耦联的影响。方法 Langendorff装置逆向灌流胶原酶分离获得不同发育阶段大鼠心肌细胞;采用IonOptix细胞收缩和钙离子浓度同步测定系统进行心肌细胞收缩力和钙瞬变的测定;Western blot检测不同发育阶段心肌细胞LPA受体的表达。结果 LPA对出生后14天和21天大鼠心肌细胞的收缩和钙瞬变均没有显著影响,表明LPA信号并不参与出生后14-21天大鼠心肌细胞的兴奋-收缩耦联过程和心肌细胞收缩。在大鼠出生后发育过程中,LPA受体在心肌细胞的表达在出生后14天已显著下调,不同于在整体心脏表达下调的时间点(P21d),这可能是LPA对此发育阶段心肌细胞的收缩和钙瞬变均不产生影响的原因,提示在出生后14天LPA信号对心肌细胞的发育调节功能可能即已减弱或消失。结论 LPA信号对出生后14天及之后心肌收缩和钙瞬变无显著影响,但尚不能排除LPA对出生后更早期的未成熟心肌细胞收缩和兴奋-收缩耦联的作用。
- 王芳韩变梅刘学文蔡琳丛祥凤陈曦
- 关键词：溶血磷脂酸未成熟心肌钙瞬变
