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国家自然科学基金(30325001): 作品数：6 被引量：44H指数：3; 相关作者：于嘉林韩成贵李大伟张凌娣王献兵更多>>; 相关机构：中国农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

大麦条纹花叶病毒(BSMV)诱导的基因沉默载体的改造: 利用病毒引导的基因沉默(virus induced gene silence,VIGS)来研究植物内源基因的功能已逐步在一些作物的功能基因组研究中得到应用。目前 VIGS 载体的应用主要集中在拟南芥、烟草、番茄、辣椒、豌...; 李萃袁诚韩成贵于嘉林Andrew Jackson李大伟; 文献传递

FMDV VP1表位肽在烟草坏死病毒A中的表达效率与稳定性: 烟草坏死病毒 A 中国大豆分离物(Tobacco necrosis virus A Chinese isolate,TNV-A)是烟草坏死病毒 A 的一个新株系,球形病毒粒子的直径约28nm,可以侵染8科29种植物。本实...; 张永亮李江蒲恒靳津张晓峰韩成贵于嘉林李大伟; 文献传递

甜菜黑色焦枯病毒外壳蛋白与病毒致病性的关系被引量：5: 2006年; 利用RT-PCR方法,构建获得了由T7RNA聚合酶启动子驱动的甜菜黑色焦枯病毒(BBSV)全长cDNA克隆pUBF52.摩擦接种苋色藜(Chenopodiumamaranticolor)后,体外转录产物可导致与野生病毒相同的枯斑症状,蛋白质印迹和RNA印迹检测也都证明了转录产物的侵染活性.构建了BBSVp24基因的原核表达载体pECP1,转化大肠杆菌BL21后的诱导表达产物能够与BBSV的抗血清呈现特异性反应,表明该基因编码产生BBSV的外壳蛋白(CP).以pUBF52为模板,分别构建了BBSVCP基因的移码突变体和不同程度的缺失突变体.侵染性检测表明,CP基因的移码突变对BBSV在苋色藜上所导致的枯斑症状及病毒RNA在寄主体内的积累基本没有影响,但CP基因的大部或完全缺失会使体内病毒RNA的积累水平大大降低,其中CP基因完全缺失的突变体转录物接种苋色藜后仅能够产生很轻的枯斑症状.将绿色荧光蛋白(GFP)基因和葡糖苷酸酶(GUS)基因分别与BBSVCP基因的5′端融合,构建了表达载体pBGFP和pBGUS.摩擦接种苋色藜叶片后可观察到GFP或GUS基因的表达,为探索利用BBSV作为外源蛋白的表达载体奠定了基础.; 曹云鹤原雪峰王晓星郭立华蔡祝南韩成贵李大伟于嘉林; 关键词：甜菜黑色焦枯病毒外壳蛋白

两种植物病毒编码蛋白的基因沉默抑制子功能鉴定被引量：29: 2005年; 采用农杆菌浸润方法以及重组的马铃薯X病毒(PVX)表达载体,研究了甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)编码的P14蛋白和水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)编码的S6蛋白对植物基因沉默的抑制作用.绿色荧光蛋白(GFP)表型观察及核酸杂交结果表明,这2种病毒基因均能够强烈抑制转基因本生烟(16C)中由同源序列引起的gfp基因沉默,gfp基因mRNA的含量明显高于未发生沉默抑制的对照植株,并导致PVX感染后的寄主症状加重,说明它们可能是由病毒编码的RNA沉默抑制因子.其中,RBSDVS6基因对植株体内基因组DNA甲基化过程的抑制作用更为强烈.; 张凌娣王朝辉王献兵张卫华李大伟韩成贵翟亚锋于嘉林; 关键词：感染后症状加重编码蛋白 PVX 植物病毒植株

轮状病毒VP6蛋白在不同载体和表达系统中的表达效率: 本文以VP6作为目的蛋白，对不同的表达系统和不同载体的表达效率进行了比较。结果表明：(1)基于BBSV的瞬时表达系统可以在较短的时间内获得大量VP6蛋白，但其前提是使用适当的双元载体使BBSV可以通过农杆菌注射(agr...; 张永亮周勃王献兵韩成贵于嘉林李大伟; 关键词：植物病害轮状病毒目的蛋白基因载体

甜菜黑色焦枯病毒新疆分离物基因组RNA的序列分析及侵染性cDNA克隆构建被引量：3: 2006年; 甜菜黑色焦枯病毒(Beet black scorch virus,BBSV)新疆分离物(BBSV-X)和宁夏分离物(BBSV-N)分别来自生态环境不同的新疆和宁夏的甜菜产区,自然条件下,BBSV-X含有卫星RNA,BBSV-N不含有卫星RNA。为明确二者的分子差异,以BBSV-X基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增获得了全长cDNA克隆。序列分析显示,BBSV-X基因组RNA全长为3 644个核苷酸,与以往报道的BBSV-N相同,且核苷酸序列一致性高达99.45%。除5′和3′非翻译区各有一个核苷酸发生变异外,核苷酸序列差异主要存在于ORF1通读区和ORF6,氨基酸序列差异仅存在于ORF1的通读区。构建获得了BBSV-X的侵染性cDNA克隆,用体外转录物定量接种了苋色藜(Chenopodiumamaranticolor)和豇豆(Vigna sinensis),结果显示BBSV-X与BBSV-N之间在致病性上存在一定的差异。; 席德慧曹云鹤郭立华原雪峰蔡祝南韩成贵李大伟于嘉林; 关键词：甜菜黑色焦枯病毒

与甜菜坏死黄脉病毒p31互作的本生烟寄主因子的酵母双杂交筛选: 由甜菜多黏菌传播的甜菜坏死黄脉病毒(Beet necrotic yellow vein virus,BNYVV)引起的甜菜丛根病,在世界上分布广泛,对甜菜产量和含糖量影响巨大。该病毒基因组含4～5条正单链 RNA,根据大...; 张靖佶张艳敬李旻韩成贵李大伟于嘉林; 文献传递

甜菜坏死黄脉病毒RNA4基因表达和沉默载体的构建: 植物病毒载体是植物基因工程和植物基因组功能研究的重要工具之一,具有表达量大、操作简便和周期短的特点。甜菜坏死黄脉病毒(Beet necrotic yellow vein virus,BNYVV)的基因组由4至5条正单链 ...; 李旻李江韩艳红韩成贵李大伟于嘉林; 文献传递

大麦条纹花叶病毒诱导的基因沉默载体系统的改造及其应用: 本文对大麦条纹花叶病毒诱导的基因沉默载体系统进行改造，探讨了其应用于单子叶模式植物-短柄草(Brachypodium distachyon)的效果，结果表明，短柄草PDS基因发生沉默后出现明显的白化表型，沉默效率在80%...; 袁诚李萃马金韩成贵于嘉林AndrewJackson李大伟; 关键词：植物病害大麦条纹花叶病毒基因沉默

烟草坏死病毒A诱导的基因沉默载体的探索: 构建能够诱发基因沉默的瞬时表达系统,为重要农作物的功能基因组学研究提供新的工具是近年来植物病毒学领域中的一个热点。将植物来源的目的基因插入到植物病毒载体中,接种感染寄主植物后,由于病毒诱导的基因沉默(virus indu...; 高阳马金王献兵韩成贵于嘉林李大伟; 文献传递

国家自然科学基金(30325001)