国家自然科学基金(30470709)
- 作品数：14 被引量：24H指数：3
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- IFRD1基因在大鼠胚胎心脏发育中的表达
- 2006年
- 目的检测大鼠胚胎心脏发育过程中IFRD1基因mRNA及蛋白的表达。方法取大鼠胚胎12、15、19 d心脏,应用RT-PCR、Western-blot、免疫组织化学技术检测胚胎大鼠心脏IFRD1基因mRNA及蛋白表达。结果在大鼠胚胎12、15、19 d心脏中,IFRD1基因mRNA及蛋白均有表达,且呈逐渐下调趋势;其蛋白主要表达于心房、心室、肌小梁等处心肌组织,而在心内膜垫、瓣膜、流出道、大血管内层等处未见表达。结论IFRD1基因的表达随大鼠胚胎心脏的生长发育逐渐下调,且特异表达于大鼠胚胎心脏心房、心室、肌小梁等处心肌组织,可能与心脏发育密切相关。
- 孙凤荣龚杰钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
- 关键词：胚胎心脏发育
- HCK基因在小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化过程中的表达
- 2008年
- 目的探讨HCK基因在小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化过程中的表达及HCK基因在维持胚胎干细胞未分化状态中的意义。方法培养小鼠胚胎干细胞,并诱导其向心肌细胞分化。抽提其胚胎干细胞未分化及分化第2、4、6、8天的总RNA,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对HCK基因mRNA的表达进行半定量分析;同时抽提胚胎干细胞未分化及分化第2、4、6、8天的总蛋白,应用Western-blot方法对HCK蛋白的表达进行半定量分析。采用SPSS11.5软件进行统计学分析,P<0.05为有统计学差异。结果HCK基因mRNA在未分化的胚胎干细胞(D0)及分化的第2天(D2)均有表达,而在分化的第4天(D4)开始已不能检测到有表达,HCK基因mRNA的表达水平随小鼠胚胎干细胞的分化呈急剧下调趋势;HCK蛋白的表达与mRNA的表达相一致,在小鼠胚胎干细胞的分化进程中逐渐下调,至第4天已基本检测不出。结论HCK基因随着小鼠胚胎干细胞向心肌分化,表达呈下调的趋势,HCK基因可能在维持胚胎干细胞未分化状态中起重要作用。
- 龚杰孙凤荣钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
- 关键词：干细胞分化
- 房间隔缺损患者介入封堵术后血栓前高凝血状态的研究被引量：4
- 2009年
- 目的研究房间隔缺损(ASD)患者介入关闭术后高凝血状态的机制及干预方法。方法观察82例ASD患者介入治疗前后抗凝血酶-III(antithrombin-III,AT-III)活性、纤维蛋白原(Fibrinogen,Fib)、D-二聚体(D-dimer,D-D)和组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator,t-PA)水平的变化以及肝素对它们的影响作用。结果介入关闭ASD的患者术后30min,血浆AT-III活性较术前明显下降(P<0.01),Fib、D-D和t-PA浓度较术前明显升高(P均<0.01)。术后第3天,血浆AT-III活性较封堵术前和术后30min下降更加明显(P均<0.01);Fib和D-D浓度较术后30min明显下降(P<0.01),但仍明显高于封堵术前(P<0.01);血浆t-PA浓度较术前和术后30min明显下降(P均<0.01)。ASD封堵术后30min血浆Fib、D-D和t-PA浓度与心导管在心血管内的操作时间呈正相关(r分别为0.464、0.758和0.251。P<0.01,P<0.01,P<0.05)。术后应用低分子肝素3d的患者在术后第3d,血浆AT-III活性明显高于术后只应用1d低分子肝素的患者(P<0.01),Fib和D-D浓度明显低于术后只应用1d低分子肝素的患者(P均<0.01)。结论介入关闭ASD的患者术后抗凝血因子活性下降,促凝血因子活性增强,产生了高凝血状态,术后低分子肝素的应用可以减轻高凝血状态。
- 杨荣盛燕辉曹克将周蕾许迪雍永宏钱岭梅陆凤翔孔祥清
- 关键词：房间隔缺损高凝血状态
- P19细胞向心肌细胞分化过程中FABP3基因表达的变化被引量：3
- 2008年
- 目的观察脂肪酸结合蛋白（FABP3）基因在胚胎癌细胞（P19细胞）向心肌细胞诱导分化过程中表达水平的变化，探讨FABP3基因与心肌细胞分化之间的关系。方法P19细胞经1％二甲基亚砜（DMSO）诱导至第15天，用肌钙蛋白I（cTnI）抗体行蛋白质斑迹法（Western blot）鉴定心肌细胞分化，并采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot技术检测FABP3基因mRNA和蛋白的表达水平。结果诱导的P19细胞于第8天出现自发性节律跳动，Western blot检测cTnI蛋白呈阳性。在P19细胞分化过程中，FABP3基因mRNA表达呈先下调（0～6d）后再逐渐上调（5～15d）的表达模式，每隔两个时间点均有显著差异（P〈0．05）；FABP3蛋白也呈现相同的表达模式，但其表达水平在0～4d间无显著差异（P〉0．05）。结论FABP3基因可能参与心肌细胞的分化。
- 张奇军郭英杰钱玲梅孔祥清曹克将
- 关键词：细胞分化
- P19细胞向心肌细胞分化过程中FHL1基因的表达变化被引量：3
- 2008年
- 目的:观察FHL1(Four and a half LIM domains protein1)基因在P19细胞向心肌细胞诱导分化过程中表达水平的变化,探讨FHL1基因与心肌细胞分化之间的关系。方法:P19细胞经1%二甲基亚砜(DMSO)诱导悬浮培养4天形成细胞聚集体,将聚集体用生长培养基黏附培养至14天,观察细胞跳动情况,用肌钙蛋白I(cTnI)抗体行Western Blot以鉴定心肌细胞分化,并采用RT-PCR、Western Blot技术在细胞分化成熟的不同时段检测P19细胞中FHL1基因mRNA和蛋白的表达水平。结果:DMSO诱导4天后,用生长培养基黏附培养至第8天,P19细胞出现自发性节律跳动的细胞团片,Western Blot检测cTnI蛋白呈阳性。FHL1基因在P19细胞向心肌细胞分化过程中,随细胞分化成熟该基因表达水平逐渐上调,Western Blot检测结果与RT-PCR检测结果基本一致。FHL1基因在分化第0～8天表达显著增高,各时间点之间差异显著(P<0.05);第8～14天表达趋于稳定,各时间点之间差异无显著性(P>0.05)。结论:FHL1基因在P19细胞向心肌细胞分化过程中表达逐渐上调,可能参与心肌细胞的分化和发育。
- 郭英杰张奇军钱玲梅孔祥清曹克将
- 关键词：P19细胞细胞分化
- 缬沙坦对乳鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨缬沙坦对过氧化氢(H2O2)致心肌细胞过氧化损伤的保护作用。方法:分离培养SD乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞过氧化损伤模型。用2～10μmol/L缬沙坦预处理后,测定各组心肌细胞存活率;用10μmol/L缬沙坦预处理后,检测各组心肌细胞培养介质中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)浓度。结果:在2～10μmol/L范围内,缬沙坦剂量依赖性地提高心肌细胞过氧化损伤的细胞存活率(P<0.05);10μmol/L缬沙坦预处理后,培养介质中LDH和MDA的生成减少(P<0.05),而SOD含量增高(P<0.05)。结论:缬沙坦可能通过稳定细胞膜、抗脂质过氧化反应及提高清除氧自由基,对心肌心肌细胞过氧化损伤起剂量依赖性保护作用。
- 王亮戴振华孙伟盛燕辉周蕾杨荣孔祥清
- 关键词：过氧化氢氧化应激心肌细胞
- 房间隔缺损患者心房肌组织凋亡基因表达谱特征的初步分析
- 2005年
- 目的:探讨房间隔缺损(atrialseptaldefect,ASD)患者心房肌组织与正常人心房肌组织凋亡基因表达谱的差异,寻找差异表达的凋亡相关基因,初步分析ASD患者心房肌组织凋亡基因表达谱的特征。方法:提取ASD患者及正常人心房肌组织mRNA,标记cDNA探针,分别与含有218个人类细胞凋亡相关基因片段的cDNA微矩阵芯片杂交,对二者差异表达基因进行生物信息学分析。结果:①差异表达的凋亡相关基因17个,其中11个基因具有促凋亡作用,6个基因具有凋亡抑制作用;②ASD患者心房肌组织中抗凋亡基因均明显下调,而促凋亡基因中3个基因表达下调外,其余基因均明显上调。结论:ASD患者心房肌组织的凋亡基因表达谱已发生明显变化,心房肌细胞凋亡可能与ASD的病因及病理生理学有关。
- 钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
- 关键词：房间隔缺损先天性心脏病基因表达谱
- p19细胞向心肌样细胞分化过程中NRD1基因表达的变化被引量：1
- 2009年
- 目的观察苯乙肼裂解酶1（NRD1）在p19细胞向心肌样细胞诱导分化过程中表达的变化。方法p19细胞经1％二甲基亚砜（DMSO）悬浮诱导培养4d，续用生长培养基贴壁培养至16d，观察细胞跳动情况，用Western blot鉴定心肌细胞肌钙蛋白I（cTnI），并采用RT-PCR、Western blot检测p19细胞中NRD1基因mRNA和蛋白的表达。结果p19细胞于诱导分化的第8天出现自发性节律跳动，cTnI蛋白呈阳性。NRD1基因在分化的第0-10天表达显著增高，各时间点之间差异有统计学意义（P〈0.05）；第12-16天该基因表达趋于稳定，各时间点之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论NRD1基因在p19细胞向心肌细胞分化过程中表达逐渐上调，可能参与心肌细胞的分化和发育。
- 王飞钱玲梅孔祥清曹克将
- 关键词：P19细胞心肌样细胞
- GATA-4基因在大鼠胚胎心脏中的表达被引量：5
- 2007年
- 目的:检测GATA-4基因在大鼠胚胎心脏中的蛋白表达变化。方法:取大鼠胚胎12、15、19天心脏,应用Westernblot、免疫组化的方法进行半定量、定位分析。结果:免疫组化显示,GATA-4基因在房室肌、心内膜、心内膜垫、房室瓣及大动脉根部均有表达。Western blot显示,在胚胎12天心脏中,GATA-4基因已有较高表达;在胚胎15天表达明显上调,胚胎19天时表达又有所下降。结论:GATA-4随大鼠胚胎心脏的生长发育呈动态表达,GATA-4与心脏发育密切相关。
- 孙凤荣龚杰钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
- 关键词：胚胎心脏
- 房间隔缺损患者心房肌组织中HCK基因的表达被引量：3
- 2006年
- 目的探讨HCK(hemopoietic cell kinase)基因在心房肌组织中的表达与房间隔缺损(ASD)的病理生理学关系。方法获取10例单纯Ⅱ孔型ASD患者和8例正常对照者右房心耳肌组织标本,采用RT-PCR技术检测HCK基因mRNA的表达丰度。结果HCK基因mRNA在正常心房肌和ASD心房肌组织中均有表达,但ASD患者心房肌组织中的HCK基因表达丰度为(24.50±10.29)%,显著低于正常对照组(60.19±17.03)%(t=5.5100,P<0.01)。结论HCK基因在心房肌组织中的异常表达可能与ASD的病理生理学相关。
- 钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
- 关键词：房间隔缺损心肌
