国家自然科学基金(30890042)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：梁琳琅冯晓丽祝之明王利娟罗志丹更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院沈阳军区总医院北京大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- Forskolin引起大鼠脂肪细胞内脂滴重塑(英文)被引量：5
- 2019年
- 脂肪组织是人体的主要能量储库,甘油三酯贮存在细胞内脂滴(lipid droplets, LDs)中,越来越多的研究表明脂滴是细胞内代谢活跃的细胞器。本研究旨在探讨forskolin长时间刺激脂肪分解过程中脂滴形态和脂滴表面perilipin家族蛋白的改变。以Sprague-Dawley (SD)大鼠附睾脂肪垫来源的分化脂肪细胞为研究对象,给予1μmol/L forskolin慢性刺激24 h,采用比色方法测定培养基中甘油的浓度;采用尼罗红染色观察细胞内脂滴形态的变化;采用荧光定量PCR检测perilipin家族蛋白mRNA水平的改变;采用免疫印迹和免疫荧光染色观察蛋白水平以及蛋白的亚细胞定位。结果表明,1μmol/L forskolin孵育24 h可以持续刺激脂肪分解。伴随着脂肪分解的进行,细胞内脂滴形态逐渐发生改变,细胞内聚集存在的大脂滴逐渐减少,位于细胞周边的小脂滴逐渐增加,最终细胞内大脂滴全部消失,取而代之的是在细胞质中弥散存在的微小脂滴。在脂肪分解过程中,perilipin家族蛋白水平也发生明显变化。分化成熟的脂肪细胞几乎没有Plin2蛋白表达,而forskolin慢性刺激可以显著增加Plin2蛋白以及mRNA的水平,增加的Plin2蛋白特异性结合在脂滴表面。Forskolin慢性刺激对Plin3的mRNA水平无显著影响,但可以显著降低Plin1、Plin4和Plin5的mRNA水平。以上结果提示,在forskolin慢性持续刺激脂肪分解过程中,脂滴形态和perilipin家族蛋白均发生显著改变。
- 刘梅芳杜从阔苏雪莹
- 关键词：FORSKOLIN脂肪细胞脂滴
- 替米沙坦阻断血管紧张素Ⅱ作用促进骨骼肌细胞糖摄取被引量：1
- 2009年
- 目的研究替米沙坦和血管紧张素Ⅱ对小鼠骨骼肌成肌细胞C2C12的葡萄糖摄取和胰岛素信号传导途径的影响,探讨替米沙坦影响糖代谢的可能机制。方法诱导成熟的C2C12细胞分为对照组(C组)、胰岛素组(Ins组)、胰岛素+血管紧张素Ⅱ组(Ins+AngⅡ组)、胰岛素+血管紧张素Ⅱ+替米沙坦组(Ins+AngⅡ+Tel组)。经相应药物干预后测定细胞2-脱氧葡萄糖摄入率,并用Western印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3-K)p85α、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)1、P38、胞外信号调节激酶(ERK)1蛋白表达。结果Ins组胰岛素信号转导通路的信号分子PI3-Kp85α、AKT1、P38、胞外信号调节激酶(ERK1)的蛋白表达均较C组显著升高(P值均<0.05);Ins+AngⅡ组PI3-Kp85α和AKT1的蛋白表达较Ins组显著下降(P值均<0.05),而两组间P38和ERK1蛋白表达的差异则无统计学意义(P值均>0.05);Ins+AngⅡ+Tel组PI3-Kp85α和AKT1的蛋白表达较Ins+AngⅡ组显著增加(P值均<0.05),两组P38和ERK1蛋白表达的差异则无统计学意义(P值均>0.05)。结论替米沙坦逆转血管紧张素Ⅱ对骨骼肌细胞葡萄糖吸收和抑制胰岛素信号转导PI3-K途径的作用,可能是其影响糖代谢的机制之一。
- 冯晓丽罗志丹马丽群梁琳琅马双陶曹廷兵祝之明
- 关键词：替米沙坦胰岛素信号转导糖代谢
- 替米沙坦对自发性高血压大鼠肌肉组织中PPARγ和PPARδ表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的观察替米沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)肌肉组织和大鼠成肌细胞系L6细胞过氧化物酶体增殖激活受体(PPARγ、PPARδ)表达的影响,探讨替米沙坦影响糖代谢的可能机制。方法12只8周龄SHR分为对照组和替米沙坦干预组,经12周喂养后测鼠尾收缩压,取大腿肌肉组织用Westernblot检测PPARγ、PPARδ和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达;L6细胞分为对照组和替米沙坦组,干预24h后收集细胞用Westernblot检测PPARγ、PPARδ和AT1R表达。结果SHR替米沙坦组鼠尾收缩压较对照组明显下降(P<0.01),肌肉组织PPARγ、PPARδ表达增加(P<0.05);L6细胞替米沙坦组PPARγ、PPARδ的表达也增加(P<0.05和P<0.01)。结论替米沙坦除有降压作用外尚能促进肌肉组织中PPARγ和PPARδ的表达,这可能与替米沙坦改善糖代谢有关。
- 冯晓丽杨大春梁琳琅陈晓平王利娟祝之明
- 关键词：替米沙坦肌肉组织过氧化物酶体增殖激活受体
- 瞬时受体电位家族香草醛1型受体转基因小鼠模型的建立被引量：1
- 2009年
- 目的建立瞬时受体电位家族香草醛1型受体(Trpv1)转基因小鼠模型。方法通过显微注射法把pcDNA3.1-rTrpv1导入C57BL/6J×CBAF1小鼠的受精卵雄原核中并移植到假孕母鼠输卵管内,用PCR方法鉴定子代基因型,用蛋白免疫印迹法检测TRPV1在组织中的表达水平。结果将400枚注射卵移植到16只假孕母鼠的输卵管中,共出生小鼠120只,获得5只转基因阳性小鼠。其中2只阳性小鼠可稳定传代,经过与C57小鼠回交数次后各自建系。经蛋白免疫印迹法证实,与同窝野生型小鼠相比,转基因小鼠的脑组织和肌肉组织中TRPV1蛋白的表达显著升高。结论成功建立了Trpv1转基因小鼠模型,为深入研究TRPV1通道的功能提供了更好的条件。
- 罗志丹曹廷兵马丽群梁琳琅冯晓丽王利娟祝之明
- 关键词：转基因小鼠显微注射法
