国家自然科学基金(30572443)
- 作品数：9 被引量：64H指数：6
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- 丹酚酸B干预内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞心脏移植后存活的影响被引量：6
- 2012年
- 目的:观察丹酚酸B(SalB)预处理的内皮祖细胞(EPCs)不同比例与骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合心脏移植后BMSCs的存活状况。方法:通过结扎左冠状动脉复制大鼠急性心肌梗死模型;密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs,免疫细胞化学法鉴定细胞;丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs以不同比例与5-溴脱氧尿核苷(Brdu)标记的BMSCs混合,移植至心肌梗死区。4周后,硝基四氮唑蓝(N-BT)染色法测算心梗面积;免疫组化法检测Brdu的表达情况。结果:8:1组和模型组心肌梗死面积分别为(9.23±2.35)%和(19.60±3.23)%,8:1组与其他各组比较心梗面积显著缩小(P<0.05)。4:1组和8:1组BMSCs阳性细胞数与其他治疗组比较,存活细胞显著增多(P<0.05)。结论:丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSCs的移植,能够提高BMSCs在梗死周边和缺血局部的存活。随着EPCs移植比例的增加,BMSCs的存活数量增多。
- 赵桂峰范英昌华声喻
- 关键词：丹酚酸B内皮祖细胞骨髓间充质干细胞细胞移植
- 骨髓间充质干细胞与丹酚酸B预处理内皮祖细胞共移植对急性心肌梗死大鼠心功能及分化基因表达的影响被引量：9
- 2009年
- 背景:由于心肌细胞自身增殖能力有限,急性心肌梗死后细胞移植是目前流行的再生心肌方法。骨髓间充质干细胞的存活受心肌微环境的影响,而内皮祖细胞参与血管新生,可为骨髓间充质干细胞提供微环境。目的:探讨骨髓间充质干细胞联合中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞共移植后,对急性心肌梗死大鼠心功能改善及骨髓间充质干细胞分化早期基因表达的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-01/2008-03在天津中医药大学完成。材料:清洁级雄性Wistar大鼠45只,由中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供。丹酚酸B为天津天士力现代中药资源有限公司产品,批号20060601。方法:分别取2只和1只大鼠,采用密度梯度离心法+贴壁筛选法分离培养纯化内皮祖细胞、骨髓间充质干细胞。剩余42只大鼠随机分为4组:假手术组9只、模型组11只、骨髓间充质干细胞组12只、共移植组10只。假手术组只开胸穿线,不结扎左冠状动脉;其余3组结扎左冠状动脉建立心肌梗死模型。结扎冠状动脉15min后再次开胸,共移植组吸取骨髓间充质干细胞悬液250μL(浓度1×1010L-1)+8mg/L丹酚酸B预处理的内皮祖细胞悬液250μL(浓度1×108L-1),于结扎区附近心肌组织分5点注射;骨髓间充质干细胞组同法注射单纯骨髓间充质干细胞悬液500μL,模型组注射等量细胞培养液。主要观察指标:采用超声心动仪测定左室功能,Real-timePCR检测心肌分化基因Nkx2.5,GATA-4的表达。结果:细胞移植4周后与模型组比较,骨髓间充质干细胞组左室结构有改善趋势,但差异无显著性意义(P>0.05);共移植组左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、舒张末期室间隔厚度、收缩末期室间隔厚度均明显改善(P<0.05),心室收缩功能指标射血分数、心输出量均明显改善(P<0.05)。细胞移植4周后与模型组比较,骨髓间充质干细胞组、共移�
- 李庆雯南亚昀谭俊珍范英昌
- 关键词：骨髓间充质干细胞内皮祖细胞丹酚酸B
- 丹酚酸B对离体内皮祖细胞黏附、趋化和增殖的影响被引量：14
- 2009年
- [目的]探讨中药单体丹酚酸B对离体内皮祖细胞(EPCs)黏附、趋化和增殖的影响。[方法]密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs,免疫细胞化学法(CD_(34)/CD_(133)/)鉴定。丹酚酸B最佳药物浓度干预的EPCs, DiI染色法,Transewell小室与DAPI染色法和Brdu免疫细胞化学法测定EPCs的黏附、趋化和增殖能力。[结果]丹酚酸B组EPCs的黏附细胞数量为(37.00±3.27),24h和48h趋化的细胞数量分别为(26.32±2.66)和(53.41±3.85),增殖的细胞数量为(41.17±3.43),与对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。[结论]丹酚酸B能够有效促进离体内皮祖细胞的黏附、趋化和增殖能力。
- 李庆雯南亚昀姜希娟谭俊珍范英昌
- 关键词：丹酚酸B内皮祖细胞趋化增殖
- 丹酚酸B干预内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞向心肌分化早期基因表达的影响被引量：8
- 2010年
- 目的探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌分化早期基因表达的影响。方法密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34/CD133/CD44)分别鉴定两种细胞。结扎大鼠左冠状动脉,制作大鼠AMI模型,42只大鼠随机分为假手术组,模型组,BMSCs组,EPCs+BMSCs组,其中治疗组用丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs与BMSCs混合,在大鼠AMI区周边分五点注射。RT-PCR检测心肌分化早期基因Nkx2.5、GATA-4表达。结果细胞移植4w后,EPCs+BMSCs组心肌Nkx2.5、GATA-4表达量分别为2.256±0.524和1.567±0.287,与对照组比较差异显著。结论丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSCs的移植上调了BMSCs向心肌分化过程中Nkx2.5、GATA-4基因的表达,对心肌细胞的数量增加有重要影响,从而有可能改善心功能。
- 李庆雯谭俊珍南亚昀范英昌
- 关键词：丹酚酸B急性心肌梗死内皮祖细胞骨髓间充质干细胞细胞移植
- 丹酚酸B预处理内皮祖细胞在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中对心肌早期基因表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨丹酚酸B预处理内皮祖细胞(EPCs)联合大鼠骨髓间充质干细胞(BMSc)移植于梗死心肌对BMSc分化过程中早期基因Nkx2.5、GATA-4 mRNA表达的影响,从而找出能够使两种细胞达到最佳协同作用的移植方法。方法分离培养大鼠BMSc、EPCs,将Wistar大鼠冠状动脉左前降支结扎制成急性心肌梗死模型后,在梗死心肌处植入BMSc和丹酚酸B预处理的不同浓度EPCs或DMEM培养液。移植后4周,实时荧光定量PCR检测丹酚酸B预处理的EPCs在BMSc分化过程中对心肌早期基因Nkx2.5和GATA-4 mRNA表达的影响。结果与模型组比较,各细胞移植组Nkx2.5及GATA-4 mRNA表达均明显增加(P<0.01,P<0.05);各细胞移植组之间,EPCs含量高(EPCs∶BMSc为8∶1组)的移植组Nkx2.5(2.654±0.606)、GATA-4 mRNA(1.573±0.372)表达增加更明显。结论BMSc在心肌微环境可向心肌样细胞分化,其分化情况与其内环境改善程度有关。
- 谭俊珍李庆雯南亚昀范英昌
- 关键词：骨髓间充质干细胞丹酚酸B细胞移植
- 丹酚酸B对离体培养内皮祖细胞VEGF、bFGF mRNA表达及抗氧化酶活性的影响被引量：16
- 2011年
- 目的探讨中药单体丹酚酸B对离体培养内皮祖细胞(EPCs)细胞因子mRNA表达及抗氧化酶活性的影响。方法密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs,免疫细胞化学法鉴定。选择丹酚酸B最佳药物浓度干预的EPCs,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞VEGF,bFGF mRNA表达,测定细胞培养液抗氧化酶SOD,GSH-Px的活性。结果丹酚酸B组VEGF,bFGFmRNA的表达量增加,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。丹酚酸B组细胞培养液中SOD活性增强,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);GSH-Px活性有增强趋势,但与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论丹酚酸B对EPCs具有保护作用,增强其细胞功能的部分机制与其增强分泌细胞因子VEGF和bFGF mRNA的表达,并且促进细胞释放SOD、GSH-Px,清除自由基能力增强有关。
- 薛亮范英昌李庆雯南亚昀
- 关键词：丹酚酸B内皮祖细胞抗氧化酶
- 丹酚酸B对内皮祖细胞与骨髓间充质干细胞联合心脏移植后增殖状况的影响被引量：10
- 2012年
- 目的通过丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)与骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)混合后对心肌梗死大鼠进行心脏移植,观察移植细胞的增殖情况。方法密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34、CD133、CD44)分别鉴定2种细胞。采用左冠状动脉结扎法制作大鼠急性心肌梗死模型。丹酚酸B最佳药物浓度(8μg/mL)预处理EPCs,并以不同比例与BMSCs混合(EPCs/BMSCs分别为1∶1、2∶1、4∶1和8∶1),手术移植至心肌梗死区。HE和N-BT染色法检测心肌梗死面积;免疫组化法检测Ki-67的表达情况。结果与模型组(19.60%±3.23%)比较,各细胞移植组心肌梗死面积均明显下降(P<0.05),其中4∶1组(11.37%±2.18%)和8∶1组(9.23%±2.35%)效果最明显(P<0.05)。与模型组[(5.17±2.31)个/高倍视野]比较,各细胞移植组Ki-67阳性细胞数均显著增多(P<0.05),其中8∶1组阳性细胞数[(15.00±3.16)个/高倍视野]明显高于其他细胞移植组(P<0.05)。结论丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSCs进行心脏移植,能够减少大鼠心肌梗死面积,提高BMSCs在梗死周边和缺血局部的增殖。并且随着EPCs移植比例的增加,梗死面积逐渐减少,增殖表达逐渐增强。
- 赵桂峰范英昌姜希娟
- 关键词：丹酚酸B内皮祖细胞骨髓间充质干细胞细胞移植
- 丹酚酸B干预EPCs对BMSCs移植的AMI大鼠心肌VEGF、bFGF蛋白表达的影响被引量：10
- 2009年
- [目的]探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植后,急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌血管新生的影响。[方法]密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34/CD133/CD44)分别鉴定两种细胞。结扎大鼠左冠状动脉,制作大鼠急性心肌梗死模型;丹酚酸B最佳药物浓度干预的EPCs,与BMSCs混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射。免疫组织化学法检测心肌蛋白的表达。[结果]细胞移植4周后,EPCs与BMSCs共移植组血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的积分光密度(IOD)分别13.179±3.053、23.634±4.705,与对照组差异具有统计学意义。[结论]丹酚酸干预EPCs提高BMSCs移植后大鼠心肌VEGF、bFGF蛋白表达,有效改善了BMSCs向心肌分化的血管微环境。
- 李庆雯谭俊珍南亚昀范英昌
- 关键词：丹酚酸B内皮祖细胞细胞移植
- 丹酚酸B预处理EPCs联合BMSc移植对AMI大鼠心功能的影响被引量：5
- 2009年
- [目的]通过建立大鼠急性心肌梗死模型,将中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)按不同比例与骨髓基质细胞(BMSc)进行混合后注射至缺血局部,观察细胞移植后大鼠急性心肌梗死模型心功能的改善情况。[方法]应用密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;采用结扎大鼠左冠状动脉前降支,制作大鼠急性心肌梗死模型。丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs,以不同比例(1∶1,2∶1,4∶1,8∶1)与BMSc混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射。[结果]各细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能。超声心动图结果:同一时间细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能,与模型组相比,4∶1组、8∶1组左室射血分数及心输出量明显升高(P<0.05)。[结论]丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSc的移植促进了AMI大鼠左室功能的恢复。
- 南亚昀李庆雯谭俊珍王宇春范英昌
- 关键词：内皮祖细胞丹酚酸B细胞移植
