湖北省“十一五”科技攻关项目(2006AA301A05)
- 作品数：11 被引量：36H指数：3
- 相关作者：黄韬刘春萍田元王国斌贺艳丽更多>>
- 相关机构：华中科技大学广东药学院武汉大学更多>>
- 发文基金：湖北省“十一五”科技攻关项目国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 5-Aza-CdR对乳腺癌细胞增殖及Maspin基因表达的影响
- 2007年
- 目的研究5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对乳腺癌MDA-MB-435S细胞增殖及抑癌基因Maspin表达的影响。方法用特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理乳腺癌细胞株MDA-MB-435S8d后,采用四唑盐(MTT)比色法观察细胞在药物处理前后的生长活性,应用流式细胞仪进行细胞周期的检测,RT-PCR检测细胞处理前后Maspin mRNA的表达。结果 5μmol/L5-Aza-CdR处理乳腺癌细胞株MDA-MB-435S8d后,与对照组比较能明显抑制肿瘤细胞的生长。流式细胞仪检测发现5μmol/L5-Aza-CdR作用72h后可导致MDA-MB-435S细胞G2/M期阻滞,减少进入有丝分裂期的细胞百分比。RT-PCR显示Maspin mRNA在5μmol/L5-Aza-CdR作用72h后重新表达。结论在人乳腺癌MDA-MB-435S细胞中,Maspin基因可能因高甲基化而导致转录失活,经特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理可使Maspin基因重新表达,后者能导致该肿瘤细胞G2/M期阻滞,并抑制细胞生长。
- 张波刘科陈剑英王国斌
- 关键词：MASPIN基因甲基化
- 人乳腺癌细胞系MCF-7中不同亚群细胞的体内外克隆和成瘤能力分析
- 2008年
- 目的了解在人乳腺癌细胞系MCF-7中是否存在乳腺癌干细胞。方法采用流式细胞技术对MCF-7细胞进行分选,检测MCF-7中不同亚群细胞的体外克隆形成能力和体内成瘤能力。结果MCF-7中有部分细胞具有体外克隆形成能力和体内成瘤能力,而且和CD44+CD24+细胞相比,CD44+CD24-细胞中成瘤细胞的含量更高。结论MCF-7中存在乳腺癌干细胞,并主要集中于CD44+CD24-细胞中,CD44+CD24+细胞也可能是乳腺癌祖细胞。
- 李治刘春萍贺艳丽田元黄韬
- 关键词：干细胞乳腺癌自我更新
- 黏蛋白MUC1和Cyclin D1在胰腺癌组织中的表达意义被引量：6
- 2011年
- 目的探讨胰腺癌组织中黏蛋白MUC1和周期蛋白Cyclin D1的表达及其意义。方法采用免疫组化方法对47例胰腺癌和15例正常胰腺组织中的MUC1和Cyclin D1进行检测。结果 47例胰腺癌组织中有39例(82.98%)MUC1表达阳性和32例(68.09%)Cyclin D1表达阳性,15例正常胰腺组织中3例(2.00%)MUC1表达阳性和0例(0)Cyclin D1表达阳性;MUC1的表达和Cyclin D1的表达呈正相关;且MUC1的阳性表达在胰腺癌分期较晚和淋巴结转移的组织中明显高于分期较早和无淋巴结转移的组织(P<0.05);Cyclin D1在有淋巴结转移的胰腺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移的胰腺癌组织(P<0.05)。结论 MUC1和Cyclin D1参与胰腺癌的发生发展,MUC1是胰腺癌诊断和治疗靶点的理想标志物。
- 陈干涛白少华彭汉斌陈干红高志强
- 关键词：MUC1蛋白CYCLIND1蛋白胰腺癌
- Wnt信号通路在SD大鼠乳腺癌发生过程中动态变化意义的探讨被引量：3
- 2008年
- 目的：观察SD大鼠乳腺癌发生过程中wnt信号通路中各因子的动态变化情况，探讨其中与癌发生密切相关的基因。方法：利用二甲基苯蒽（DMBA）灌胃诱导SD大鼠乳腺癌的发生，在癌发生过程中动态获取SD大鼠的第4对乳腺组织标本，采用基因芯片技术对上述组织标本中Wnt信号通路相关基因的mRNA表达水平进行检测。结果：SD大鼠乳腺癌发生过程中，Wnt2、Wnt5a、Wnt9b和Tcf3、Tel4的表达出现渐进性上调，明显上调出现在诱癌后的第4～6周；APC、APC2、DDK1、DDK4和Wisp2的表达出现渐进性下调，明显下调出现在诱癌后的第6周。结论：wnt2、wnt5a、Wnt9b、Tcf3和Tel4表达的增加以及APC、APC2、DDK1、DDK4和Wisp2表达的减少与SD大鼠的乳腺癌发生密切相关，可能具有“开关”作用，有可能作为乳腺癌治疗或预防的新靶点。
- 李治刘春萍张宁田元黄韬华
- 关键词：乳腺肿瘤信号传导
- 人乳腺癌原代细胞和细胞系中肿瘤干细胞的比较被引量：2
- 2008年
- 目的比较人乳腺癌原代细胞以及人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231S中乳腺癌干细胞的含量和细胞表型。方法采用流式细胞技术对人乳腺癌原代细胞以及MCF-7、MDA-MB-231S进行检测和分选,并测定不同细胞亚群在裸鼠体内重建肿瘤的能力。结果人乳腺癌原代细胞以及MCF-7、MDA-MB-231S细胞的CD44和CD24表达与分布不同;和人乳腺癌原代细胞相比,MCF-7、MDA-MB-231S细胞中乳腺癌干细胞的含量更高(P<0.01)。结论和人乳腺癌原代细胞相比,人乳腺癌细胞系中含有更高比例的乳腺癌干细胞,并且细胞表型也发生了改变。
- 李治刘春萍贺艳丽田元黄韬
- 关键词：干细胞原代细胞乳腺癌细胞表型
- EGF对一膜表面稳定表达EGFR细胞系生物学特性的影响
- 2006年
- 目的探讨表皮生长因子(ep iderm al growth factor,EGF)对一膜表面稳定表达表皮生长因子受体(EGF receptor,EGFR)细胞系CHO-EGFR-GFP1生物学特性的影响。方法采用台盼蓝染色计数活细胞数观察不同浓度EGF刺激48 h后细胞增殖情况;PI染色一步法流式细胞仪检测不同浓度EGF刺激48 h和100 ng/mL EGF刺激不同时间细胞周期改变以及细胞凋亡,Ho-echst 33258染色观察细胞凋亡;流式细胞术测定GFP(green fluorescent prote in,绿色荧光蛋白)平均荧光强度判定EGFR表达水平的变化。结果低浓度的EGF可促进CHO-EGFR-GFP1细胞增殖,而高浓度EGF刺激则引起CHO-EGFR-GFP1细胞失去黏附、细胞周期阻滞、促进细胞凋亡以及抑制细胞增殖;高浓度EGF以一种剂量依赖性方式同时上调EGFR的表达和引起细胞凋亡。结论不同浓度EGF对CHO-EGFR-GFP1细胞生长特性影响不同,高浓度EGF刺激引起肿瘤细胞失去黏附可能是导致肿瘤细胞容易脱落、发生转移的机制之一。
- 赵晓蓉王敏彭吉林吴砂赵晓平黄韬王国斌伍钢沈关心
- 关键词：表皮生长因子受体
- 血管内皮生长因子936C／T基因多态性与结直肠腺瘤易感性的关系被引量：1
- 2010年
- 目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）1498C／T、936C／T基因多态性与结直肠腺瘤易感性的关系。方法对224份结直肠腺瘤及200份正常对照标本进行研究．应用TaqMa。探针法检测VEGF1498C／T、936C／T基因型，搜集相对应的临床病理资料。结果与VEGF936CC基因型相比．CT基因型和CT＋TT基因型患者结直肠腺瘤的发生危险显著增加（DR=2．00，95％CI：1．23—3．25，P=0．006；OR=2．04，95％C1：1．28—3．26，P=0．003）；与VEGF936-C等位基因相比，T等位基因携带者结直肠腺瘤的发生危险亦显著增加（DR=1．91，95％CI：1．25—2．91．P=0．003）。结直肠腺瘤患者为VEGF936CT＋TT基因型或携带T等位基因，其病理类型倾向于绒毛状腺瘤（OR=2．54，95％CI：1．12—5．75，P：0．040；OR=3．08，95％CI：1．64-5．80，P=0．001）。VEGF1498C／T基因多态性在腺瘤组与对照组间的差异无统计学意义（19〉0．05）。结论VEGF936C／T基凶多态性与结直肠腺瘤易感性密切相关。
- 吴翔磊李冬青刘志苏万新月吴云华江从庆张中林秦前波钱群
- 关键词：结直肠肿瘤腺瘤血管内皮生长因子
- Wnt信号途径在不同性质乳腺组织和细胞中的表达与分布被引量：4
- 2009年
- 目的探讨乳腺癌发生发展中Wnt信号途径的改变及其关机制。方法用基因芯片和荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）技术检测5例乳腺癌患者不同性质乳腺组织和细胞中Wnt信号途径相关基因的表达。结果与正常乳腺组织比较，癌组织中Frizzled3、Lrp5、Lrp6、Wnt9a、Wnt10a表达分别上调了8．11、10．28、9．37、15．47、19．63倍（发生频率均〉160％），DDK1、DDK4、WIF1表达分别下调了10．87、9．62、12．05倍（发生频率均≥60％）；其中Wntga、Wnt10a以及DDK1、DDK4、WIF1表达的改变主要在癌源性成纤维细胞，分别上调40．88、61．59倍和下调38．46、19．61、29．41倍（P〈0．01）；Frizzled3、Lrp5、Lrp6表达改变主要在乳腺癌干细胞，分别上调了27．36、31．41、21．25倍（P〈0．01）。结论在乳腺癌发生发展过程中，成纤维细胞源性因子Wnt9a、Wnt10a和DDK1、DDK4、WIF1的改变参与了Wnt信号途径的异常，并主要影响乳腺癌干细胞的自我更新调控。
- 李治刘春萍张景辉田元黄韬
- 关键词：乳腺肿瘤干细胞WNT信号途径
- 乳腺癌干细胞多药耐药基因的表达及意义被引量：18
- 2008年
- 目的:探讨乳腺癌干细胞和乳腺癌分化细胞多药耐药基因MDR1、BCRP的表达和意义。方法:采用流式细胞分选技术从人乳腺癌原代组织和MCF-7细胞中分离出乳腺癌干细胞,实时PCR技术测定不同亚群细胞的MDR1和BCRP表达情况。结果:与乳腺癌分化细胞相比,乳腺癌干细胞MDR1和BCRP的表达明显增强(P<0.01),并且在化疗后干细胞比例也明显增加(P<0.01)。结论:和乳腺癌分化细胞相比,乳腺癌干细胞能通过高表达多药耐药基因具有更强的化疗耐药能力,是乳腺癌化疗失败和复发的关键因素之一。
- 李治刘春萍贺艳丽张景辉黄韬
- 关键词：乳腺肿瘤干细胞
- 抗转铁蛋白受体双价抗体的构建、表达及鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:抗转铁蛋白受体(TfR)双价抗体(bsFv)构建、表达及其与细胞结合的活性鉴定。方法:以抗TfR的单链抗体(scFv)为模板,设计引物引入中间连接肽(G4S)及酶切位点AscI,通过PCR方法扩增两条scFv片段,将其连接并克隆至原核表达载体pAB1,转化大肠杆菌TG1,阳性菌经IPTG诱导表达,FCM检测bsFv与K562,HepG2肿瘤细胞结合的活性及特异性。结果:酶切鉴定及DNA测序证明该bsFv构建成功;SDS-PAGE、Western blot鉴定表明表达蛋白分子量与bsFv理论值一致;FCM结果证明bsFv可与K562,HepG2肿瘤细胞特异性结合,且结合的阳性率较scFv有所提高。结论:成功构建了抗转TfR的bsFv,且能与K562,HepG2肿瘤细胞特异性结合。
- 肖代雯朱慧芬沈昕邢薇黄宇雷萍黄韬王国斌沈关心
- 关键词：转铁蛋白受体单链抗体双价抗体
