广东省科技计划工业攻关项目(2009B030801320)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 相关作者：李宇纪影畅林常敏胡志奇高建华更多>>
- 相关机构：汕头大学医学院第一附属医院南方医科大学南方医院汕头大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人Wnt10b基因真核表达载体的构建及表达鉴定
- 2011年
- 目的:利用基因工程技术构建人Wnt10b基因的pEGFP-N1-Wnt10b真核表达载体,观察其在COS-7细胞中的表达。方法:以pUC19-Wnt10b为模板,PCR扩增人Wnt10b基因的cDNA编码区序列,扩增产物和pEGFP-N1载体双酶切,T4 DNA连接酶连接,构建pEGFP-N1-Wnt10b,酶切和测序鉴定该载体;LipofectamineTM2000将该载体转染入COS-7中,Western blot和免疫细胞化学检测COS-7 Wnt10b蛋白表达。结果:PCR扩增出的人Wnt10b基因cDNA正确克隆到pEGFP-N1载体,成功构建了pEGFP-N1-Wnt10b;将其转染入COS-7,COS-7 Wnt10b蛋白表达明显增高。结论:成功构建了人pEGFP-N1-Wnt10b,这为进一步研究Wnt10b基因功能奠定了前期基础。
- 纪影畅蔡湘娜林常敏李宇
- 关键词：COS-7细胞基因表达
- 大鼠胚胎皮肤毛囊形态发生与Wnt—10b／β-catenin的表达被引量：8
- 2010年
- 目的研究大鼠胚胎皮肤毛囊的形态发生与Wnt-10b／β-catenin信号的表达情况.方法取不同胎龄的SD大鼠胚胎及1～3d新生鼠的背部皮肤，采用石蜡包埋、切片、HE染色，对SD大鼠胚胎毛囊的发生过程及其形态学特征进行描述，同时应用荧比免疫组化染色，观察Wnt-10b及β—catenin在毛囊发育过程中的时空表达。结果在第14、15天时，胚胎背部皮肤逐渐由单层向多层转化，毛囊最早形态发生的时间约为胚胎第15天后期、第16天早期；毛睫基板形成之前，Wnt—10b及β—catenin均匀表达于表皮；当毛囊基板形成后，Wnt-10b及β-catenin仅仅强表达于基板；随着毛囊继续发育，Wnt-10b及β—catenin的表达局限于紧贴“真皮浓缩”的毛囊上皮及毛基质细胞；毛囊之间的表皮未见明显表达，结论SD大鼠背部皮肤毛囊的形态发生很可能始于胚胎第15天后期、第16天早期；Wnt-10b及β—catenin参与调控毛囊发生的启动和进一步发育。
- 纪影畅李宇鲁峰胡志奇王森林常敏高建华
- 关键词：毛囊WNT信号
